Las saponinas de Panax notoginseng inhiben la formación de células espumosas ateroscleróticas en ratones knockout ApoE mediante la regulación de las señales TLR4/SYK
Las enfermedades cardiovasculares son la principal causa de muerte en todo el mundo. La causa fundamental de la mayoría de las enfermedades cardiovasculares es la aterosclerosis. En la pared vascular se acumulan lípidos, especialmente lipoproteínas de baja densidad oxidadas (LDL ox), lo que conduce a la aterosclerosis. Aunque muchas células intervienen en el desarrollo y la progresión de la aterosclerosis, los macrófagos son la principal fuente de células espumosas y el factor clave de la aterosclerosis. Bajo la estimulación repetida de diversos factores patológicos, los monocitos se reúnen en el lugar de la lesión, se desplazan al endotelio inferior y se diferencian en macrófagos. Engullen los componentes lipídicos circundantes y otras sustancias relacionadas para formar células espumosas, lo que conduce a la formación de placas ateroscleróticas vasculares. Estudios relacionados han demostrado que la capacidad de los macrófagos para captar lipoproteínas está regulada principalmente por la señalización TLR4/SYK. Las saponinas del Panax notoginseng son principios activos eficaces extraídos de las raíces de las plantas de Panax notoginseng de la familia de las Araliaceae. Sus principales funciones son promover la circulación sanguínea, eliminar la estasis sanguínea, desbloquear los vasos sanguíneos y las colaterales, y tener efectos antiinflamatorios, protectores de las células endoteliales y antitrombóticos. Estudios anteriores han demostrado que las saponinas del Panax notoginseng pueden inhibir eficazmente el engrosamiento de la íntima de la arteria carótida y el agrandamiento de la placa aterosclerótica, y su mecanismo puede estar relacionado con la vía de señalización CD40-CD40L, ampliamente utilizada en la clínica de las enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares. Sin embargo, aún no se ha estudiado el mecanismo de su efecto sobre las células espumosas ateroscleróticas. Observamos el tamaño de la placa aterosclerótica, el nivel de expresión de lípidos en suero y la expresión de ARNm y proteínas de TLR4, SYK y ERK1/2 en cada grupo del experimento in vivo; Además, se llevaron a cabo experimentos in vitro para evaluar la fagocitosis de macrófagos en cada grupo y, a continuación, explorar la influencia y el mecanismo molecular de las saponinas de Panax notoginseng (PNS) en la formación de células espumosas ateroscleróticas y el proceso de aterosclerosis en ratones ApoE -/-, a fin de proporcionar una base experimental para la prevención y el tratamiento de las enfermedades ateroscleróticas.

La AS es la principal base patológica de las enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares, como la cardiopatía isquémica. Entre ellas, la gran cantidad de lipoproteínas de baja densidad (especialmente lipoproteínas de baja densidad oxidadas) y la acumulación de colesterol en los macrófagos son las principales causas de la formación de células espumosas. En la actualidad, no existe ningún tratamiento eficaz para la EA, por lo que la búsqueda de un fármaco terapéutico eficaz es un problema urgente que debe resolverse en la práctica clínica.

El SNP es una sustancia beneficiosa extraída de las raíces de la planta Panax notoginseng. Sus principales funciones son antiinflamatorias, inhibidoras de la agregación plaquetaria y protectoras de las células endoteliales vasculares. Estudios pertinentes han demostrado que el SNP tiene muchos efectos, como la neuroprotección, la lucha contra la aterosclerosis y la lucha contra el accidente cerebrovascular después de la reperfusión de la isquemia cerebral. En este estudio, ratones ApoE -/- con formación temprana de placas de AS fueron tratados con SNP por sonda. Se observó que el área de la placa carotídea y las células espumosas de la placa de los ratones del grupo tratado con SNP se redujeron significativamente, lo que concuerda con los resultados de las investigaciones anteriores. Otras investigaciones revelaron que, tras el tratamiento por sonda con SNP, la expresión de TG, TC y LDL en el suero de los ratones se redujo significativamente, mientras que la expresión de HDL aumentó significativamente. Esto concuerda con estudios anteriores que demuestran que la SNP tiene una capacidad significativa para reducir los lípidos sanguíneos. A la vista de estudios anteriores sobre la NMP y de este experimento, la NMP puede inhibir la formación de la placa aterosclerótica vascular, pero el mecanismo de acción no se ha explorado completamente. Este estudio exploró cómo la ENP inhibía la formación de placa aterosclerótica en ratones ApoE -/- afectando a la formación de células espumosas, con el fin de obtener el efecto de la ENP sobre la aterosclerosis y sus mecanismos relacionados.

Los macrófagos absorben una gran cantidad de sustancias lipídicas y se acumulan en las células para formar células espumosas, que es el principal factor de formación de la EA. Las lipoproteínas de baja densidad oxidadas (oxLDL) son un importante inductor de la formación de espuma en los macrófagos. Estudios relevantes han demostrado que las LDL también pueden sufrir una débil modificación oxidativa, y su producto modificado es la LDL menos oxidada (mm LDL), que también acelera a los macrófagos a fagocitar sustancias lipídicas para formar células espumosas. Los TLR (especialmente TLR4) desempeñan un papel importante en la formación de células espumosas en la aterosclerosis. Los receptores de tipo peaje (TLR) forman parte de la superfamilia de receptores de interleucina-1/receptores de tipo peaje, mientras que TLR4 es un miembro de la subfamilia TLR, expresado principalmente en macrófagos, neutrófilos y células dendríticas. En la fase inicial de la aterosclerosis, el LDL-C en el organismo puede oxidarse u oxidarse débilmente a ox LDL y mm LDL. TLR4 en la superficie de los macrófagos puede reconocer ox LDL, mm LDL y sus productos activos, haciendo que TLR4 se combine con SYK y se fosforile, provocando así la activación de las vías de señalización descendentes Ras, Raf, y proteínas quinasas reguladas extracelularmente (ERK1/2), potenciando así la fagocitosis de los macrófagos en LDL, ox LDL y otras sustancias lipídicas y aumentando la agregación en las células, produciendo células espumosas, lo que conduce a la formación de aterosclerosis y a la ruptura de la placa inestable. Verificar si la SNP puede inhibir la formación de aterosclerosis a través de los mecanismos mencionados. Por lo tanto, este estudio detectó los niveles de ARNm de TLR4, SYK y ERK1/2 en ratones tratándolos de diferentes maneras. Los resultados mostraron que la expresión de ARNm de TLR4, SYK, ERK1/2 y proteína p-ERK1/2 en ratones del grupo PNS disminuyó significativamente en comparación con el grupo modelo; al mismo tiempo, tratamos macrófagos RAW246.7 de diferentes maneras para observar la función fagocítica de los macrófagos RAW246.7. Los resultados mostraron que la función fagocítica de los macrófagos RAW246.7 disminuyó significativamente en comparación con el grupo modelo. Los resultados mostraron que la capacidad fagocítica de los macrófagos no tratados con SNP era significativamente mayor que la de los macrófagos tratados con SNP, lo que indicaba que la SNP podía inhibir la capacidad de los macrófagos para fagocitar sustancias lipídicas y, en última instancia, impedir que los macrófagos se transformaran en células espumosas. Estudios previos han demostrado que la expresión de TLR4 en las placas ateroscleróticas está significativamente aumentada, y la expresión de CD36 en los macrófagos está correspondientemente aumentada, lo que promueve que los macrófagos ingieran LDL oxidadas, y acelera la ruptura de las células espumosas y la inestabilidad de las placas. Basándonos en los estudios anteriores mencionados, evaluamos además el efecto de la SNP en los macrófagos detectando el contenido de CD36 en los macrófagos RAW246.7. A través de la investigación, se encontró que el contenido de CD36 en macrófagos tratados con SNP disminuyó significativamente, lo que indica que la SNP puede inhibir la progresión de la aterosclerosis mediante la supresión de la expresión de CD36 en macrófagos. En resumen, la SNP puede inhibir la capacidad de los macrófagos para engullir lípidos y la producción de CD36 en los macrófagos, y su mecanismo puede estar relacionado con la inhibición de la vía de señalización TLR4/SYK.

Mediante el experimento, descubrimos que tras la administración intragástrica de solución de SNP, los lípidos en sangre de los ratones ApoE -/- disminuían significativamente, el alcance de las lesiones ateroscleróticas en la arteria carótida se hacía más pequeño, la capacidad de fagocitosis de lípidos de los macrófagos y las células espumosas disminuía significativamente, y se inhibía la expresión de TLR4, SYK, ERK en la placa. Por lo tanto, confirmamos que la SNP puede reducir los lípidos sanguíneos e inhibir la formación de células espumosas ateroscleróticas, y su mecanismo puede estar relacionado con la inhibición de la vía de señalización TLR4/SYK en los macrófagos.