Tek test çoklu değerlendirme yöntemi kullanılarak farklı kökenlerden Morinda officinalis'te dört sikloheksen eter terpen içeriğinin belirlenmesi
Morinda officinalis, Rubiaceae bitkisi Morinda officinalis How'un kurutulmuş köklerinden elde edilir. Bu geleneksel Çin ilacı ilk olarak "Shennong Bencao Jing "de kaydedilmiştir ve birinci sınıf bir bitki olarak sınıflandırılmıştır. Tarih boyunca kaydedilmiştir ve ünlü bir sağlık Çin ilacıdır. Aynı zamanda Çin'deki "Dört Büyük Güney İlacı "ndan biridir ve yerel üretim alanı Guangdong'dur. Anti osteoporoz, böbrek yangını tonifiye etme, antioksidasyon, anti-tümör, anti-enflamatuar, anti yorgunluk ve vücudun bağışıklığını artırma gibi etkileri vardır. Morinda officinalis'in ana bileşenleri arasında iridoidler, antrakinonlar, şekerler ve organik asitler bulunur. Kristal orkide glikozitleri ile temsil edilen iridoid bileşikleri anti-enflamatuar, analjezik, antioksidan, anti-tümör, anti-aging ve antiobezite etkilerine sahiptir. Caryophyllin ayrıca kemik koruyucu etkilere sahiptir ve akut akciğer hasarını azaltır.

Son yıllarda, insanların farkındalığı tıbbi bakımdan önleyici sağlık hizmetlerine doğru kaydıkça, Morinda officinalis'e olan talep artmaya devam etmiş ve giderek daha düşük kalitenin iyi ile ikame edilmesi olgusuna yol açmıştır. Çin Farmakopesi'nin 2015 baskısı, Morinda officinalis'in içeriğinin belirlenmesi için nicel bir gösterge olarak tek bir bileşen olan Nissin'i kullanmaktadır ve bu da belirli sınırlamalara sahiptir. Kantitatif göstergeye aynı anda birden fazla gösterge bileşeni dahil edilebilirse, Morinda officinalis'in kalitesinin daha kapsamlı bir şekilde değerlendirilmesini sağlayacaktır.

Tek test çoklu değerlendirme yöntemi, geleneksel Çin tıbbının aktif bileşenleri arasındaki içsel işlevleri ve orantısal ilişkileri kullanarak, tek bir bileşeni ölçerek (referans standartların elde edilmesi kolaydır) birden fazla bileşenin (referans standartların elde edilmesi zor veya pahalıdır) eşzamanlı olarak belirlenmesini sağlayan bir yöntemdir. Bu yöntem, Çin Farmakopesi'nin 2015 baskısında önemli bir tanıtım yöntemidir ve geleneksel Çin tıbbında çoklu göstergelerin içeriğini belirlemek için tercih edilen yöntem haline gelmiştir. Bununla birlikte, şu anda içeriğini belirlemek için tek test çoklu değerlendirme yönteminin kullanımına ilişkin yurtiçi ve yurtdışında herhangi bir rapor bulunmamaktadır.

Bu deney, Morinda officinalis'te kristal orkide glikozidi, deasetillenmiş kumarinik asit, kumarinik asit ve kumarin dahil olmak üzere dört sikloheksen eter terpenoid bileşeninin ilk kez eşzamanlı olarak belirlenmesini sağlayan tek testli çoklu değerlendirme yöntemini oluşturmuştur. Kalite standartlarının revizyonu için referans sağlayan farklı kökenlerden Morinda officinalis üzerinde kalite kontrolü de gerçekleştirilmiştir.

 

Bu deneyde ekstraksiyon çözücüleri (70%, 80%, 90% metanol), farklı ekstraksiyon yöntemleri (ultrasonik ekstraksiyon, ısıtma reflü ekstraksiyonu) ve farklı ekstraksiyon süreleri (20, 30, 40 dakika), ekstraksiyon yönteminin kullanım kolaylığı, işletme maliyetleri ve test edilen bileşenlerin ekstraksiyon oranı gibi çeşitli faktörler dikkate alınarak incelenmiştir. Son olarak, Morinda officinalis test çözeltisinin hazırlama yöntemi, ekstraksiyon çözücüsü olarak 80% metanol, iki kez ultrasonik ekstraksiyon ve her bir ekstraksiyon süresi 30 dakika olacak şekilde belirlenmiştir.

Bu deneyde mobil faz olarak metanol fosforik asit suyu ve asetonitril fosforik asit suyu kullanılmıştır. Mobil faz olarak asetonitril fosforik asit suyu kullanıldığında, test edilen her bir bileşenin pik şeklinin ve ayırma derecesinin iyi olduğu ve teorik tepsi sayısının da yüksek olduğu bulunmuştur. Son olarak, mobil faz asetonitril (A)~0.2% fosforik asit çözeltisi+0.01 mol/L dipotasyum dihidrojen fosfat tampon tuzu (B), gradyan elüsyon (0-12 dk, 1% A; 12-30 dk, 1% A → 17% A; 30-40 dk, 17% A) olarak belirlenmiştir.

Deasetillenmiş kumarin asidi için referans maddenin düşük fiyatı, kolay bulunabilirliği ve kararlı özellikleri nedeniyle, bu deneyde çoklu değerlendirme analizi için dahili referans olarak deasetillenmiş kumarin asidi kullanılacaktır.

Bu deneyde oluşturulan QAMS yöntemi, Morinda officinalis'te kristal orkide glikozidi, deasetillenmiş kumarinik asit, kumarinik asit ve kumarin dahil olmak üzere dört iridoid bileşenin eşzamanlı olarak belirlenmesini ilk kez başarmıştır. Metodolojik inceleme, bağıl düzeltme faktörü dayanıklılık deneyleri ve QAMS yöntemiyle hesaplanan değerlerin ESM yöntemiyle ölçülen RSD değerleriyle karşılaştırılması yoluyla, bu makalede oluşturulan yöntemin kullanımının kolay, sonuçlarının doğru ve tekrarlanabilirliğinin iyi olduğu gösterilmiştir. Geleneksel çoklu indeks bileşen değerlendirme modelinin, referans malzemelerin geniş kullanımı, yüksek tespit maliyetleri ve bazı referans malzemelerin elde edilmesindeki zorluklar gibi eksikliklerini çözmüştür. Bu, Morinda officinalis'in kalitesinin kapsamlı bir şekilde değerlendirilmesi için bir referans sağlayabilir.

Farklı bölgelerden gelen Morinda officinalis'teki çeşitli bileşenlerin içeriğinde farklılıklar vardır, kristal orkide glikozitlerinin içeriğinde daha önemli bir fark vardır. Kristal orkide glikozitlerinin 9. ve 10. partilerdeki içeriği daha düşüktür, bu da Morinda officinalis'in farklı bölgelerden gelmesiyle ilgili olabilir.

Özet olarak, bu deneyde oluşturulan QAMS yöntemi doğru, güvenilir ve iyi bir tekrarlanabilirliğe sahiptir ve Morinda officinalis'in kalite kontrolü için yeni bir yöntem sağlayabilir.