Определение содержания четырех циклогексеновых эфиров терпенов в Morinda officinalis различного происхождения с помощью метода множественной оценки одного теста
Моринда лекарственная, полученная из высушенных корней растения семейства Rubiaceae Morinda officinalis How. Это традиционное китайское лекарство впервые было записано в "Шэньнун Бэнькао Цзин" и классифицируется как трава высшего сорта. Он был записан на протяжении всей истории человечества и является известным оздоровительным средством китайской медицины. Это также одно из "Четырех великих южных лекарств" в Китае, местным районом производства которого является Гуандун. Он обладает такими свойствами, как противодействие остеопорозу, тонизирование почек ян, антиоксидация, противоопухолевое, противовоспалительное, противоусталостное и укрепляющее иммунитет организма действие. Основными компонентами Morinda officinalis являются иридоиды, антрахиноны, сахара и органические кислоты. Иридоидные соединения, представленные гликозидами кристаллической орхидеи, оказывают противовоспалительное, обезболивающее, антиоксидантное, противоопухолевое, антивозрастное и противоожирительное действие. Кариофиллин также обладает костезащитным действием и снижает острое повреждение легких.

В последние годы, когда сознание людей переключилось с медицинской помощи на профилактику заболеваний, спрос на Morinda officinalis продолжает расти, что постепенно приводит к явлению замены плохого на хорошее. В издании Китайской фармакопеи 2015 года в качестве количественного показателя для определения содержания Morinda officinalis используется один компонент - Nissin, что имеет определенные ограничения. Если в количественный показатель можно включить одновременно несколько компонентов-индикаторов, это обеспечит более полную оценку качества Morinda officinalis.

Метод множественной оценки с помощью одного теста - это метод, использующий внутренние функции и пропорциональные соотношения между активными ингредиентами традиционной китайской медицины для синхронного определения нескольких ингредиентов (труднодоступных или дорогостоящих эталонных стандартов) путем измерения одного ингредиента (эталонные стандарты легко получить). Этот метод является ключевым методом продвижения в издании Китайской фармакопеи 2015 года и стал предпочтительным методом для определения содержания нескольких показателей в традиционной китайской медицине. Однако в настоящее время в стране и за рубежом нет сообщений об использовании метода множественной оценки с помощью одного теста для определения содержания.

В ходе эксперимента был разработан метод многократной оценки, который впервые позволил синхронно определить четыре циклогексеновых эфира терпеноидных компонентов в Morinda officinalis, включая гликозид кристаллической орхидеи, деацетилированную кумариновую кислоту, кумариновую кислоту и кумарин. Также был проведен контроль качества Morinda officinalis различного происхождения, что послужило основой для пересмотра стандартов качества.

 

В данном эксперименте исследовались растворители для экстракции (метанол 70%, 80%, 90%), различные методы экстракции (ультразвуковая экстракция, экстракция при нагревании) и различное время экстракции (20, 30, 40 мин) с учетом различных факторов, таких как простота использования метода экстракции, эксплуатационные расходы и степень извлечения тестируемых компонентов. В итоге был определен метод приготовления тест-раствора Morinda officinalis, в котором в качестве экстракционного растворителя использовался метанол 80%, ультразвуковая экстракция проводилась дважды, а время каждой экстракции составляло 30 мин.

В этом эксперименте в качестве подвижных фаз использовались метанол-фосфорная кислота-вода и ацетонитрил-фосфорная кислота-вода. Было обнаружено, что при использовании ацетонитрил-фосфорно-кислой воды в качестве подвижной фазы форма пиков и степень разделения каждого исследуемого компонента были хорошими, а теоретическое количество лотков также было высоким. Наконец, подвижная фаза была определена как ацетонитрил (A)~0,2% раствор фосфорной кислоты+0,01 моль/л дипотассиевой соли дигидрогенфосфатного буфера (B), градиентное элюирование (0-12 мин, 1% A; 12-30 мин, 1% A → 17% A; 30-40 мин, 17% A).

Благодаря низкой цене, легкой доступности и стабильным свойствам эталонного вещества деацетилированной кумариновой кислоты, в данном эксперименте деацетилированная кумариновая кислота будет использоваться в качестве внутреннего эталона для анализа с несколькими оценками.

Метод QAMS, созданный в данном эксперименте, впервые позволил одновременно определить четыре иридоидных компонента в Morinda officinalis, включая кристаллический гликозид орхидеи, деацетилированную кумариновую кислоту, кумариновую кислоту и кумарин. Методологическое исследование, эксперименты по определению относительного поправочного коэффициента прочности и сравнение расчетных значений метода QAMS с измеренными значениями RSD метода ESM показали, что метод, созданный в данной работе, прост в эксплуатации, точен в результатах и обладает хорошей воспроизводимостью. Устранены недостатки традиционной многоиндексной модели оценки компонентов, такие как большое использование эталонных материалов, высокая стоимость обнаружения и трудности с получением некоторых эталонных материалов. Это может послужить основой для комплексной оценки качества Morinda officinalis.

Наблюдаются различия в содержании различных компонентов в Morinda officinalis из разных регионов, причем более существенные различия наблюдаются в содержании кристаллических гликозидов орхидеи. Содержание кристаллических орхидных гликозидов в 9-й и 10-й партиях ниже, что может быть связано с тем, что Morinda officinalis поступает из разных регионов.

Таким образом, метод QAMS, установленный в этом эксперименте, является точным, надежным и обладает хорошей воспроизводимостью, что может обеспечить новый метод контроля качества Morinda officinalis.