Характеристика активных компонентов, ингибирующих липазу, в листьях гугу с помощью метода тонкослойной хроматографии биоавтографии MSn
Гугу (Ilex cornuta Lindl Ex Paxt) - растение рода Илекс семейства Илексовые, широко распространенное в Китае. Высушенные листья гугу, традиционного китайского лекарства, включены во многие травяные монографии со времен династии Тан и имеют лекарственную историю более тысячи лет. Согласно Фармакопее Китайской Народной Республики (издание 2020 года, том 1), вкус листьев Ligusticum barbarum горький, с прохладным характером. Он относится к меридианам печени и почек и обладает функциями очищения от жара и питания инь, благотворно влияет на почки и успокаивает печень. Применяется при туберкулезном кровохарканье, распаривании костей и приливах жара, головокружении и вертиго и т. д. В народной культуре, благодаря жаропонижающему эффекту листьев гугу, их нежные листья заваривают и употребляют как чай кудинг. Современные исследования показали, что листья Cornus officinalis богаты тритерпеноидами и сапонинами, которые являются его основными действующими веществами. Кроме того, в них присутствуют различные компоненты, такие как флавоноиды, полифенолы, стерины и т.д., которые обладают различными видами активности, такими как снижение уровня липидов в крови, борьба с ишемией миокарда, антиоксидация, иммуносупрессия и борьба с бесплодием. В связи с недостаточной эффективностью и значительными побочными эффектами большинства препаратов для снижения веса, липидоснижающая активность листьев Ligusticum barbarum постепенно привлекает внимание людей. Ученые в стране и за рубежом провели обширные исследования химических компонентов листьев Ligusticum barbarum, но для поиска липидоснижающих активных ингредиентов использовались традиционные методы химического разделения, которые имеют такие недостатки, как длительность, сложность операций и потеря активных ингредиентов.
Тонкослойная хроматография с биолюминесценцией - это метод скрининга лекарств, объединяющий идентификацию, разделение и определение активности. За последние 20 лет он широко использовался для быстрого скрининга антиоксидантов, ингибиторов холинэстеразы и ингибиторов липазы. В то же время этот метод отличается простотой работы и низкой стоимостью эксперимента. Технология прямой ионизации - это новый метод ионизации, используемый для быстрого масс-спектрометрического анализа образцов со сложной матрицей без предварительной обработки при атмосферном давлении. Тонкослойная хроматография в сочетании с многоступенчатой масс-спектрометрией с ионизацией в электростатическом поле (TLC-EFISI-MSn) позволяет проводить in-situ структурную характеристику активных компонентов в тонкослойной авторадиографии листьев Lycium barbarum. Эта технология прямой ионизации позволяет извлекать соединения на тонкослойных хроматографических пластинах путем микрокапельной экстракции без дополнительных газовых и нагревательных устройств и ионизировать их непосредственно под действием электростатического поля перед поступлением в масс-спектрометр для анализа; это метод ионизации, который легко разбирается, работает и быстро обнаруживается. Таким образом, в данной статье используется метод тонкослойной хроматографии и биологической авторадиографической масс-спектрометрии для быстрой идентификации компонентов с липидоснижающей активностью из листьев Ligustrum lucidum, что позволяет уточнить субстанциональную основу липидоснижающего эффекта листьев Ligustrum lucidum.

В этой статье сначала был разработан тестовый образец листьев Ligustrum lucidum в двух системах: хлороформ-этилацетат-метанол-вода (1:3:1:0,3, V/V/V) и этилацетат-метанол-вода (6:2:1, V/V/V), чтобы получить больше пятен. С помощью тонкослойной хроматографии и биолюминесцентного исследования ингибирования липазы были отобраны 10 пятен с активностью ингибирования липазы в листьях Ligustrum lucidum, а затем технология TLC EFISI MSn была использована для быстрого структурного анализа этих пятен. На основе данных многоступенчатой масс-спектрометрии в сочетании с литературными данными были предположены возможные пути фрагментации различных соединений, и предварительно охарактеризованы 15 возможных структур, все из которых являются тритерпеноидными сапонинами, включая 9 тритерпеноидов арбутина, 1 тритерпеноид олеанана и 5 тритерпеноидов 18,19-кольца. После сравнения с эталонным веществом были подтверждены 12 соединений. Данный метод позволяет быстро выявить и охарактеризовать компоненты с ингибирующей липазу активностью из листьев Cornus officinalis, что дает возможность уточнить субстанциональную основу липидоснижающей эффективности листьев Cornus officinalis.