Иммуномодулирующий эффект полисахаридов из Rosa davurica Pall. на циклофосфамид-индуцированную иммуносупрессию у мышей. Rosa davurica Pall. - это высушенный корень Rosa davurica Pall., также известный как корень Rosa davurica, корень дикой розы и корень плодов малины. Shan Ci Mei широко выращивается в Северо-Восточном Китае, а его цветы, плоды и корни используются в качестве лекарственного средства. Стандарт на лекарственную траву Rosa rugosa включен в стандарты лекарственных средств провинции Цзилинь. Она имеет горький и вяжущий вкус, мягкий характер, обладает кровоостанавливающим и антибактериальным действием. Используется для лечения менструальных кровотечений, функциональных маточных кровотечений, хронического бронхита, энтерита, бактериальной дизентерии, цистита и нефрита. В монгольской медицине корень колючей груши называется "Жерелигэ - Замуэр Инь Вэнь Ду Су". Его эффективность заключается в рассеивании Си Ри, контроле Хе И и переваривании пищи. Его применяют при синдроме Хэ И Се Ри, синдроме Бадагана Се Ри, синдроме желудка Се Ри, болезнях пульса, кашле и очищении печени от токсинов. По данным исследований, корень Rosa rugosa содержит лактоны, дубильные вещества, полисахариды, общие гликозиды, флавоноиды, фенолы, алкалоиды, белки, антрахиноны и другие компоненты, которые обладают фармакологическим действием, таким как антиоксидантное, гипогликемическое, антибактериальное и сосудорасширяющее. Хан и др. сообщили, что полисахариды из корня Rosa rugosa оказывают улучшающее действие на иммунную функцию стареющих мышей, но исследований полисахаридов из корня Rosa rugosa мало.
В последние годы полисахариды привлекают все большее внимание как натуральные продукты, обладающие множественной биологической активностью. Многочисленные исследования показали, что полисахариды обладают различными видами активности, такими как иммунная регуляция, противоопухолевая, противовирусная, антиоксидантная и снижающая уровень глюкозы в крови. Китайские растительные полисахариды, являясь природными иммуномодуляторами, обладают очевидной эффективностью и небольшим количеством побочных эффектов, а также оказывают регулирующее воздействие на иммунные клетки, иммунные органы и кишечную микробиоту. Северо-восточный регион Китая располагает богатыми ресурсами дикого горного терна, и его исследование и разработка в медицине и функциональных продуктах питания будет способствовать местному экономическому развитию. Корень шиповника широко используется в медицине, но его применение в сопутствующих медицинских продуктах или продуктах питания относительно ограничено. В этой статье мы выделяем, очищаем и анализируем структуру полисахаридов из корней Rosa rugosa. В то же время в ней оценивается регулирующее влияние циклофосфамида (CTX) на иммунную функцию иммунокомпрометированных мышей и исследуется механизм его действия, что дает экспериментальные данные для разработки полисахаридов корней Rosa rugosa в будущем.

Растительные полисахариды обладают различной биологической активностью и все больше привлекают внимание исследователей натуральных продуктов. Биоактивные растительные полисахариды играют важную роль в таких областях, как фармацевтика, продукты питания, товары для здоровья и экологически чистые продукты. С непрерывным развитием науки и техники методы экстракции, очистки и структурной идентификации растительных полисахаридов постепенно становятся все более разнообразными, например, экстракция горячей водой, щелочная экстракция, осаждение при ферментации этанола, экстракция с помощью ферментов, экстракция с помощью микроволн, ультразвуковая экстракция, экстракция с помощью ферментов, экстракция субкритической водой, экстракция сверхвысоким давлением и вакуумная экстракция. Все эти методы имеют свои преимущества и недостатки, среди которых метод экстракции горячей водой, хотя скорость экстракции не очень высока, имеет преимущества экономичности, нетоксичности, безопасности и отсутствия повреждения клеточных стенок, и широко используется для экстракции полисахаридов. В данном исследовании для извлечения полисахаридов из корней Rosa rugosa использовался метод экстракции горячей водой/осаждения этанолом, а для депротеинизации применялись два метода. Результаты показали, что метод TCA оказывает значительное влияние на депротеинизацию, но при этом происходит большая потеря сахаров. Поэтому метод Sevage более подходит для депротеинизации полисахаридов из корней Rosa rugosa по сравнению с методом TCA. После осаждения этанолом спиртовым осадком 60% был получен полисахарид RDRP с относительно низкой полидисперсностью, содержание сахара в котором составляло 94,1%. Структура растительных полисахаридов напрямую влияет на их биологическую активность, а базовая структура полисахаридов может быть идентифицирована по распределению молекулярной массы, характерным пикам поглощения в инфракрасном диапазоне, составу моносахаридов и т.д. В данном исследовании для определения молекулярной массы полисахаридов из корней Rosa rugosa использовался метод ГПХ, и было установлено, что RDRP представляет собой смесь полисахаридов со средневесовой молекулярной массой 13,1 кДа и низкой молекулярной массой (66,7 кДа). Результаты инфракрасного анализа показывают, что полисахарид из корня Rosa rugosa представляет собой нейтральный полисахарид пирана с альфа-конфигурацией. Анализ состава моносахаридов показывает, что в основном он состоит из глюкозы, арабинозы, галактозы, маннозы и ксилозы. Однако метод соединения его моносахаридов с разветвленной цепью требует дальнейшего углубленного изучения.
Иммунная система включает в себя иммунные органы, иммунные клетки и иммунные молекулы, которые работают вместе, чтобы защитить организм от патогенов. Тимус и селезенка - основные иммунные органы, играющие важную роль в выработке и поддержании иммунных клеток. Являясь центром гуморального и клеточного иммунитета, селезенка - основное место расселения Т- и В-лимфоцитов, поэтому показатель селезенки может отражать уровень иммунитета организма. Циклофосфамид - один из видов алкилирующих агентов, широко используемых в лечении рака. Однако он обладает различной токсичностью не только для раковых клеток, но и для быстро делящихся клеток, таких как иммунные клетки и эпителиальные клетки, и часто используется для создания иммуносупрессивных моделей. В данном исследовании после внутрибрюшинного введения циклофосфамида мышам масса тела, индекс селезенки, индекс тимуса и уровень концентрации иммуноглобулинов были значительно ниже, чем в контрольной группе (P<0,01), что свидетельствует об успешном создании иммуносупрессивной модели мышей. После непрерывного применения RDRP из полисахаридов корня Rosa rugosa в течение 2 недель, по сравнению с контрольной группой, количество лейкоцитов, лимфоцитов, тромбоцитов в периферической крови, индекс селезенки и тимуса у мышей в группе RDRP значительно увеличилось (P<0,05 или P<0,01), что указывает на возможность стимулирования развития иммунных органов у иммунокомпрометированных мышей. Патологические изменения тимуса и селезенки наблюдали под биологическим оптическим микроскопом, и результаты показали, что группа RDRP полисахаридов Rosa rugosa улучшила патологические изменения селезенки и тимуса у мышей, что указывает на то, что она может повысить иммунную функцию иммунных органов. ИФА показал, что уровни иммуноглобулинов IgA, IgG и IgM в группах RDRP полисахаридов корня Rosa rugosa и полисахаридов гриба шиитаке значительно повысились (P<0,01), что указывает на то, что полисахариды корня Rosa rugosa способствуют повышению иммунной функции организма. Кроме того, растительные полисахариды могут активировать Т-лимфоциты, В-лимфоциты, макрофаги и т.д., способствовать выработке соответствующих цитокинов и улучшать иммунную функцию организма. В данном исследовании обе группы дозировок полисахаридов корня Rosa rugosa и группа полисахаридов гриба шиитаке значительно повышали уровни IL-2, IFN - γ, TNF - α и IL-6 в сыворотке иммунокомпрометированных мышей (P<0.01), что указывает на то, что полисахариды корня Rosa rugosa могут регулировать иммунную функцию и смягчать иммуносупрессию, вызванную циклофосфамидом, путем повышения уровня цитокинов в сыворотке крови иммунокомпрометированных мышей.
В настоящее время изучению иммуномодулирующих механизмов полисахаридов также уделяется внимание. Среди них наибольшее количество сообщений поступает о нисходящем пути TLR, NF - κ B. В данном исследовании с помощью вестерн-блота были измерены уровни экспрессии белков TLR4, MyD88, TRAF-6 и NF - κ B p65 в каждой группе. Результаты показали, что по сравнению с модельной группой, белки TLR4, MyD88 и TRAF-6 в группе высоких доз RDRP из корня Rosa rugosa были значительно увеличены (P<0,01), а белок NF - κ B p65 в каждой группе доз RDRP из корня Rosa rugosa показал тенденцию к увеличению. Этот результат позволяет предположить, что полисахариды из корня Rosa rugosa могут активировать рецепторы TLR4, которые, в свою очередь, активируют MyD88 (фактор миелоидной дифференцировки 88) для связывания с IRAK (киназа, ассоциированная с рецептором IL) для деактивации TRAF-6 (фактор 6, ассоциированный с рецептором TNF) и комплекса I κ B киназы, вызывают ингибирование NF - κ B фосфорилирования протеинкиназы I κ B, увеличивают секрецию цитокинов, таких как TNF - α и IL-6, и таким образом оказывают иммуномодулирующее действие.
Таким образом, полисахариды из Rosa rugosa, состоящие в основном из полисахаридов со средним молекулярным весом 13,1 кДа, способны повышать индекс иммунных органов и количество лейкоцитов, лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови, улучшать патологические изменения иммунных органов, повышать уровень экспрессии связанных с иммунитетом белков и цитокинов, облегчать иммунодефицит, вызванный CTX, и проявлять определенную иммунорегулирующую активность. Механизм его действия связан с TLR/NF - κ B каналами. Результаты данного исследования дают ценные экспериментальные данные для разработки и применения полисахаридов из корней Rosa rugosa.