A különböző gyártók teknőspáncél-ragasztójának aminosavtartalmában és az antiosteoporózis potenciális mechanizmusaiban rejlő különbségek feltárása UHPLC-QTRAP-MS/MS és hálózati farmakológia kombinációján alapuló UHPLC-QTRAP-MS/MS alapján
A Testudinis Carapacis et Plasti Colla (TCPC) egy hagyományos kínai tápláló gyógyszer, amely a Chinemys reevesii (Gray) teknősbéka családba tartozó teknősbéka páncéljának vízben való forralásával és koncentrálásával készült szilárd gél. Először a "Compendium of Materia Medica" című könyvben jegyezték fel. Hűvös jellegű, sós és édes ízű, és alkalmas a máj, a vese és a szív meridiánok kezelésére. A klinikai gyakorlatban gyakran használják a csontritkulás kezelésében. A főként teknőspáncél ragasztóból álló klasszikus formulák, mint például a Guilu Erxian sorozatú formula, a Zuogui Wan, Huqian Wan stb. jelentős hatással vannak a lényeg táplálására, a csontvelő feltöltésére, az inak és csontok erősítésére. A teknőspáncél ragasztó gazdag kollagénben, keratinban és szabad aminosavakban. A fehérje hidrolíziséből nyert aminosavak a teknőspáncél ragasztó fő hatóanyagai, amelyek végül felszívódnak és hasznosulnak az emberi szervezetben. A hagyományos kínai orvoslás diagnózisában és kezelésében a csontritkulást többnyire a "csontelzáródás", a "csontnekrózis" és a "csontsipoly" kategóriákba sorolják. A "Sürgősségi ellátás alapvető receptjei" szerint: "Az extrém csontbetegségben szenvedőknél... fájdalmat tapasztalhatnak a kezükben és a lábukban, képtelenek hosszú ideig állni, és nehézséget tapasztalhatnak a hajlításban és nyújtásban, ami a test elzáródásához, agyi és gerincvelői diszfunkcióhoz vezethet. A vese tárolja az esszenciát és szabályozza a csontvelő termelését. Ha nem elegendő, a csontvelő csökken, és a csont elsorvad. A csontvelő elvesztése fokozott csonttörékenységhez és csontritkuláshoz vezet. A modern kutatások kimutatták, hogy a teknőspáncél ragasztó és klasszikus formulái jó hatással vannak a csontok egészségére, az immunrendszer erősítésére, a daganatellenes és egyéb szempontok szerint. A teknőspáncél ragasztóban található glicin és prolin potenciális biomarkerekként szolgálhatnak a posztmenopauzális csontritkulás diagnosztizálásában. Az aminosavak maguk is jelzőmolekulák, és szinergikusan aktiválhatják a kalcium-érzékeny receptorokat a kalciumionokkal, növelhetik a csontsűrűséget, elősegíthetik az oszteoblasztok differenciálódását és fokozhatják a csontok meszesedését. A különböző gyártóktól származó teknőspáncélragasztó aminosavtartalmának különbségeinek feltárása érdekében ez a tanulmány 4 különböző gyártótól származó 15 tétel teknőspáncélragasztó-mintát választott ki. Folyadékkromatográfia-tömegspektrometriát használtak 17 aminosav meghatározására a teknőspáncélragasztó savas hidrolízise után. Többváltozós statisztikát alkalmaztunk a különböző gyártók teknőspáncél-ragasztójában lévő hidrolizált aminosavkomponensek összetételének különbségeinek összehasonlítására, ami referenciát szolgáltat a teknőspáncél-ragasztó minőségellenőrzéséhez. És a hálózati farmakológiával kombinálva elemezték a teknőspáncél ragasztóban lévő aminosavkomponenseket, ami alapot szolgáltatott a teknőspáncél ragasztó fő hatóanyagainak és célpontjainak további előrejelzéséhez a csontritkulás elleni küzdelemben.

A különböző gyártókból és tételekből származó hidrolizált teknőspáncél-ragasztó teljes aminosavtartalma ebben a cikkben alacsonyabb, mint a gyógyszerkönyvi szint. Ennek oka nemcsak magával a minta minőségével, hanem a vizsgálati módszerrel is összefügghet. A hidrolizált aminosavak jellegzetes ionpárjainak kimutatására folyadékkromatográfia-tömegspektrometriát használunk, amely nagy érzékenységgel és specifikussággal rendelkezik; A gyógyszerkönyvben használt HPLC-módszer a vegyületek jellegzetes funkcionális csoportjainak abszorbanciajeleit érzékeli, ami megnehezíti a hasonló szerkezetű vegyületek megkülönböztetését. A folyadékkromatográfia-tömegspektrometria (LC-MS) módszer pontosabb és képes kiküszöbölni a nem specifikus komponensek interferenciáját, így a hidrolizált aminosavak tartalma alacsonyabb lehet, mint a gyógyszerkönyvben szereplő. A hálózati farmakológia eredményei azt mutatják, hogy a teknőspáncél-ragasztó kulcsfontosságú összetevői a csontritkulás kezelésében az Ala és a Gly. Az Ala segítheti a cukrok és szerves savak anyagcseréjét, és javíthatja a posztmenopauzális csontritkulást. A Gly közvetlenül összefügg a férfiaknál a törések kockázatával, a kollagén mutációi pedig osteogenesis imperfectát okozhatnak. A csontritkulás teknőspáncélragasztóval történő kezelésének kulcsfontosságú célpontjai közé tartozik a CAT, a NOS1, NOS3, F2 stb. A kataláz (CAT) az oxidatív stressz gátlásával növelheti a csontsűrűséget és a csont ásványianyag-tartalmát egerekben; a neuronális nitrogén-oxid-szintáz (NOS1) a csontgyógyuláshoz kapcsolódik, és főként a rostos szövet és a kallusz közötti fibrocsont régióban fejeződik ki; az endothelialis nitrogén-oxid-szintáz (NOS3) szintén a csontgyógyuláshoz kapcsolódik, és főként a kondrocitákban és a perivascularis sejtekben fejeződik ki; a protrombin specifikus agonista az oszteoblasztokban, amely szervkultúrában stimulálhatja a csontfelszívódást. A KEGG és GO dúsítási elemzés eredményei azt sugallják, hogy a teknőspáncél gumi egy sor biológiai funkcióban vehet részt, mint például a vitaminkötés, a piridoxál-foszfát kötés, a szerves savak kötése és az aminosavszintézis anyagcseréje a csontsejtekben; Úgy működik, hogy befolyásolja az olyan jelátviteli útvonalakat, mint az inzulin jelátvitel, a kalcium jelátvitel, a ciklikus guanozin-monofoszfát protein kináz G (cGMP PKG) jelátvitel, a szén anyagcsere és az aminosavszintézis. Az inzulin jelátviteli útvonal serkentheti a vázizmokat, hogy felvegyék a szervezet 80% glükózát; A cGMP PKG jelátviteli útvonal szabályozhatja a csontképződést és elősegítheti az oszteoblasztok mineralizációját és érését, kétirányú és komplex szabályozást mutatva az oszteogenezisben.
Összefoglalva, ez a cikk az UHPLC-QTRAP-MS / MS-t használja többváltozós statisztikai elemzéssel kombinálva, hogy megállapítsa, hogy a négy gyártó közül az A gyártó stabil minőségű teknőspáncél ragasztóval és magas hidrolizált aminosavtartalommal rendelkezik; A teknőspáncél ragasztó szabályozhatja a csontritkulás 68 alapvető célpontját, beleértve a CAT, NOS1, NOS3 stb., stb, olyan összetevőkön keresztül, mint az alanin és a glicin, ezáltal 212 jelátviteli útvonalat befolyásolva, mint az aminosavszintézis, az arginin és prolin anyagcsere és a szénanyagcsere, hogy terápiás hatást gyakoroljon a csontritkuláson.