Szteroid alkaloidok azonosítása a rezveratrolban és a lizoszomális aktivitást elősegítő hatásuk vizsgálata
A lizoszomális bioszintézis diszfunkciója szorosan összefügg a neurodegeneratív betegségekkel. A lizoszómák, mint a sejtek lebontásáért felelős fő organellumok, segítenek a sejtekben a sérült és öregedő organellumok és a rosszul összeállított fehérjék eltávolításában. Létfontosságúak az idegrendszer homeosztázisának fenntartásában, és szoros kapcsolatban állnak a neurodegeneratív betegségekkel. A resveratrol a Liliaceae családba tartozó Resveratrol nemzetségbe tartozó évelő lágyszárú növény. Világszerte mintegy 40 növényfaj tartozik a Resveratrol nemzetségbe, ebből 13 fajt és 1 fajtát Kínában, 4 fajt pedig Yunnanban jegyeztek fel. Ge Hong "Sürgősségi receptek a könyökvédők számára" című könyvében (1955-ös kiadás) fel van jegyezve, hogy a resveratrol képes kezelni "az eszméletlen és összeszorított fogú stroke-os betegeket"; A Hagyományos Kínai Orvostudomány Kínai Gyógyszerkönyve is említi a kínai gyógyászatban a resveratrol használatát a stroke afázia, fejfájás, sárgaság, rüh, malária, vérhas, valamint rovarölő és hánytató célokra. A resveratrol hatékonysága a neurodegeneratív betegségekkel kapcsolatos. Eddig a Veratrumban található szteroid alkaloidokat tekintették a Veratrum nemzetségbe tartozó növények hatóanyagbázisának. Több mint 200 fajt izoláltak, amelyek négyféle vázra oszthatók: solanidin, veraramin, jervin és cevanin (lásd az 1. ábrát). Legtöbbjük C-27-es szteroidvázzal rendelkezik, amelyek közül a szolanidin és a vera ramin a kolestán alkaloidok közé tartozik. Az A-, B- és C-gyűrűk mind hattagú gyűrűk, a D-gyűrű pedig egy öttagú gyűrű. A különböző nitrogénatom-képződés szerint az E/F indolgyűrűt alkot, amelynek N a C-16 pozícióban van, ami egy szolanidin-alkaloid. A veraramin alkaloidok többnyire nem rendelkeznek E gyűrűvel, és az F gyűrű egy piridingyűrű; a jervin és a cevanin az izokolesztán alkaloidok osztályába tartozik, amelyeket c-nor-homo [14 (13 → 12) - abeo] gyűrűrendszer jellemez. A. A B és D gyűrűk hatszögletes gyűrűk, míg a C gyűrű ötszögletes gyűrű. A cevanin alkaloidok a C-17 és az F gyűrűk N atomjának egyesítésével egy új hexagonális E gyűrűt képeznek. A jervin és a cevin alkaloidok váza közötti különbség a C-17 és a nitrogénatom közötti kovalens kötés jelenlétében rejlik. A jelenlegi vizsgálatok azt mutatták, hogy a jervin alkaloidok erős fájdalomcsillapító hatással rendelkeznek; a veratramin típusú alkaloidok széles hatásspektrummal rendelkeznek és 5-HT receptor antagonisták. Részt vesznek az AP-1 cél-DNS-szekvenciák szabályozásában és képesek blokkolni a nátriumcsatornákat. A veratramin típusú alkaloidok erős in vivo és in vitro vérlemezkeaggregáció-gátló hatással is rendelkeznek, gátolják az artériás trombózist, és széles körben tanulmányozták őket daganatellenes vizsgálatokban; a ciklopamin az első olyan Hedgehog (Hh) jelátviteli útvonal-gátló, amely gátolja az ezen útvonal rendellenes aktivációja által okozott tumor növekedését. Összefoglalva, az ilyen alkaloidok és a neurodegeneratív betegségek közötti kapcsolatról eddig nem érkezett jelentés.
A resveratrol hatékonyságának inspirációja a "stroke afáziára" összpontosít, amely neurodegeneratív betegségekkel kapcsolatos. Ezt a lehetőséget kihasználva a kutatás tárgyául a resveratrol gyógynövényforrását - a szőrös levelű resveratrolt - választottuk. Az Atractylodes macrocephala gyökereinek és rizómáinak metanolos kivonataiban lévő szteroid alkaloidokat vizsgáltuk, azzal a céllal, hogy izoláljuk az Atractylodes macrocephala gyökereiből és rizómáiból a lizoszóma termelést elősegítő kémiai komponenseket, tisztázzuk az Atractylodes macrocephala lizoszóma működését befolyásoló hatóanyag-alapot, és vezető vegyületeket szolgáltassunk a neurodegeneratív betegségek számára.

Ballabio olasz tudós kutatócsoportja megállapította, hogy a lizoszóma keletkezését elsősorban a transzkripciós szinten a MiTF/TFE családba tartozó TFEB és TFE3 transzkripciós faktorok szabályozzák, amelyek különböző szövetekben expresszálódnak. Normális sejtkörülmények között a TFEB foszforilálódik, és a 14-3-3 fehérjéhez kötődik, szétszóródva a citoplazmában. Külső ingerek, például éhség vagy károsodott lizoszómális funkció hatására, vagy amikor a sejtek stressznek vannak kitéve, a TFEB azonban defoszforiláción megy keresztül és belép a sejtmagba, szabályozva a downstream gének expresszióját, és széles körben részt vesz a különböző fiziológiai és patológiai tevékenységekben. A TFEB foszforilációját különböző fehérjemolekulák is szabályozzák in vivo és in vitro. A TFEB/CLEAR hálózat szabályozó központként szolgál a lizoszóma-termelés és a kapcsolódó lizoszóma-degradációs funkciók (makromolekuláris degradáció, autofágia lizoszóma-útvonal, mitózis és lipofágia stb.) elősegítésére, döntő szerepet játszva a neurodegeneratív betegségek javításában. Jelenleg a TFEB nukleáris belépését szabályozó kis molekulájú vegyületekről szóló irodalmi jelentések közé tartoznak a HEP14 és HEP15 óriás diterpének, a Polygonatum sibiricum XVII szaponinjai és a kurkuminszármazékok; a lizoszóma-képződés szteroid alkaloidák általi elősegítéséről nem találtak beszámolót. Ezért új szerkezeti típusokkal rendelkező, a lizoszóma biogenezist elősegítő vezető vegyületek után kutatunk, és feltárjuk hatásmechanizmusukat, új ötleteket nyújtva a neurodegeneratív betegségek új terápiás gyógyszereinek kifejlesztéséhez.
A hagyományos kínai orvoslás elméletének vezérelveiből kiindulva ez a tanulmány a "stroke afázia" resveratrolal történő kezelésére összpontosít, és azt feltételezi, hogy ez összefügg a neurodegeneratív betegségekkel. Ezt a lehetőséget kihasználva, a szőrös levél resveratrol kémiai összetételének kutatására kerül sor, és a resveratrol hatóanyag-alapját mélyen feltárjuk annak feltárása érdekében, hogy elősegítheti-e a lizoszóma generálódását, és vezető vegyületeket biztosíthat-e a neurodegeneratív betegségek kezeléséhez. Ebben a kísérletben 8 szteroid alkaloidot izoláltak a kínai parazita fa leveleiből. Az 1, 2, 3, 6 és 7 vegyületek mind képesek elősegíteni a lizoszóma képződést, a 6. vegyület mutatta a legjobb hatást. Megállapítottuk, hogy a 6. vegyület képes elősegíteni a TFEB transzkripciós faktor sejtmagba jutását. A jövőben ellenőrizzük a lizoszóma funkciót és tanulmányozzuk a vizsgált vegyületek hatásmechanizmusát.