Négy ciklohexén-éterterpén tartalmának meghatározása különböző eredetű Morinda officinalisban az egy vizsgálatból származó többszörös értékelési módszerrel
Morinda officinalis, a Rubiaceae növény Morinda officinalis How. Ezt a hagyományos kínai gyógyszert először a "Shennong Bencao Jing" című könyvben jegyezték fel, és a legmagasabb rendű gyógynövények közé sorolják. A történelem során feljegyezték, és híres egészségügyi kínai gyógyszer. A "Négy nagy déli gyógyszer" egyike Kínában, Guangdong a helyi termőterület. Olyan hatásai vannak, mint a csontritkulás elleni, a vese-jang tonizálása, az oxidáció elleni, daganatellenes, gyulladáscsökkentő, fáradtság elleni és a szervezet immunitásának fokozása. A Morinda officinalis fő összetevői közé tartoznak az iridoidok, antrakinonok, cukrok és szerves savak. A kristály orchidea glikozidok által képviselt iridoid vegyületek gyulladáscsökkentő, fájdalomcsillapító, antioxidáns, daganatellenes, öregedésgátló és elhízás elleni hatással rendelkeznek. A karyofillin csontvédő hatással is rendelkezik, és csökkenti az akut tüdőkárosodást.

Az elmúlt években, ahogy az emberek tudatossága az orvosi ellátásról a megelőző egészségügyi ellátás felé tolódott el, a Morinda officinalis iránti kereslet tovább nőtt, ami fokozatosan a rosszabb helyettesítésének jelenségéhez vezetett. A Kínai Gyógyszerkönyv 2015-ös kiadása egy összetevőt, a Nissin-t használja mennyiségi mutatónak a Morinda officinalis tartalmának meghatározásához, amely bizonyos korlátokkal rendelkezik. Ha a mennyiségi mutatóba egyszerre több indikátorkomponenst is be lehet vonni, az a Morinda officinalis minőségének átfogóbb értékelését teszi lehetővé.

Az egy teszt többszörös értékelési módszer olyan módszer, amely a hagyományos kínai gyógyászat hatóanyagai közötti belső funkciókat és arányos kapcsolatokat használja ki, hogy több összetevő (nehezen beszerezhető vagy drágán beszerezhető referencia standardok) szinkron meghatározását egy összetevő mérésével érje el (a referencia standardok könnyen beszerezhetők). Ez a módszer a Kínai Gyógyszerkönyv 2015-ös kiadásában kulcsfontosságú promóciós módszer, és a hagyományos kínai gyógyászatban a több mutató tartalmának meghatározására szolgáló preferált módszerré vált. Jelenleg azonban sem itthon, sem külföldön nem állnak rendelkezésre jelentések az egy vizsgálatból álló többszörös értékelési módszer alkalmazásáról a tartalom meghatározására.

Ez a kísérlet egy olyan, egy tesztből álló, többszörös értékelési módszert hozott létre, amely első alkalommal valósította meg a Morinda officinalis négy ciklohexén-éterterpenoid komponensének, köztük a kristály orchidea glikozidnak, a deacetilezett kumarinsavnak, a kumarinsavnak és a kumarinnak a szinkron meghatározását. A különböző eredetű Morinda officinalis minőségellenőrzését is elvégezték, ami referenciát szolgáltatott a minőségi szabványok felülvizsgálatához.

 

Ebben a kísérletben az extrakciós oldószereket (70%, 80%, 90% metanol), különböző extrakciós módszereket (ultrahangos extrakció, fűtési reflux extrakció) és különböző extrakciós időket (20, 30, 40 perc) vizsgáltak, figyelembe véve különböző tényezőket, mint például az extrakciós módszer könnyű kezelhetőségét, a működési költségeket és a vizsgált komponensek extrakciós sebességét. Végül a Morinda officinalis tesztoldat elkészítési módszere úgy lett meghatározva, hogy extrakciós oldószerként 80% metanolt használtak, az ultrahangos extrakciót kétszer végezték el, és minden egyes extrakciós idő 30 perc volt.

Ebben a kísérletben mozgófázisként metanol-foszforsav-vizet és acetonitril-foszforsav-vizet használtunk. Megállapítottuk, hogy amikor mozgófázisként acetonitril-foszforsav-vizet használtunk, az egyes vizsgált komponensek csúcsformája és elválasztási foka jó volt, és az elméleti tálcák száma is magas volt. Végül a mozgófázisként acetonitrilt (A)~0,2% foszforsavoldat+0,01 mol/L dikálium-dihidrogén-foszfát puffersó (B), gradiens elúció (0-12 perc, 1% A; 12-30 perc, 1% A → 17% A; 30-40 perc, 17% A) határoztuk meg.

A deacetilezett kumarinsav referenciaanyagának alacsony ára, könnyű hozzáférhetősége és stabil tulajdonságai miatt ez a kísérlet a deacetilezett kumarinsavat fogja használni belső referenciaként a többszörös értékelési elemzéshez.

Az ebben a kísérletben létrehozott QAMS-módszerrel először sikerült egyidejűleg meghatározni négy iridoidkomponenst a Morinda officinalisban, beleértve a kristály orchidea glikozidot, a deacetilezett kumarinsavat, a kumarinsavat és a kumarint. Módszertani vizsgálat, relatív korrekciós tényező tartóssági kísérletek, valamint a QAMS módszerrel számított értékek és az ESM módszerrel mért értékek RSD-értékeinek összehasonlítása révén bebizonyosodott, hogy az ebben a cikkben létrehozott módszer könnyen kezelhető, pontos eredményeket ad, és jó ismételhetőséggel rendelkezik. Megoldotta a hagyományos több indexkomponensű komponensértékelő modell hiányosságait, például a referenciaanyagok nagymértékű használatát, a magas kimutatási költségeket és egyes referenciaanyagok beszerzésének nehézségeit. Ez referenciát nyújthat a Morinda officinalis minőségének átfogó értékeléséhez.

A különböző régiókból származó Morinda officinalis különböző összetevőinek tartalma között különbségek vannak, a kristályos orchidea glikozidok tartalma tekintetében jelentősebb a különbség. A 9. és 10. tételben a kristály orchidea glikozidok tartalma alacsonyabb, ami összefügghet azzal, hogy a Morinda officinalis különböző régiókból származik.

Összefoglalva, az ebben a kísérletben megállapított QAMS módszer pontos, megbízható és jó reprodukálhatósággal rendelkezik, ami új módszert biztosíthat a Morinda officinalis minőségellenőrzéséhez.