Friss Rehmannia glutinosa-ból származó oligoszacharidok tisztítása, fizikai-kémiai tulajdonságai és antioxidáns aktivitása
A Rehmannia glutinosa Libosch. a Scrophulariaceae családba és a Rehmannia nemzetségbe tartozó növény, a Rehmannia glutinosa Libosch gyökérgumója. Gyakran használt hagyományos kínai gyógyászatban, és általában három formában (friss Rehmannia, nyers Rehmannia és főtt Rehmannia) használják. A Rehmannia glutinosa friss gyökerét friss Rehmannia glutinosának nevezik. A friss Rehmannia glutinosa hideg természetű, édes és keserű ízű, és vércukorcsökkentő, a májat és a veséket tápláló hatású. Különleges hatásait az orvostörténet már tárgyalta és klinikailag bizonyított. A friss Rehmannia glutinosa-t a henani népi kultúrában frissen fogyasztják, például hideg ételek és sült ételek formájában. A Rehmannia glutinosa-ban található cukorvegyületek a teljes terület nagy részét foglalják el, és oligoszacharidjai a glikozidok és poliszacharidok után felfedezett másik típusú aktív komponensek. Ismert, hogy a Rehmannia glutinosa oligoszacharidok farmakológiai tevékenységgel rendelkeznek, például vértónusító és vércukorszint-csökkentő hatásúak, és a Rehmannia glutinosa hatékony összetevői. A tárolási és szállítási nehézségek miatt a friss Rehmannia glutinosa fejlesztése és alkalmazása bizonyos mértékig korlátozott. Jelenleg a kutatások többnyire a nyers és főtt Rehmannia glutinosa-ra összpontosítanak, és viszonylag kevés kutatás foglalkozik a friss Rehmannia glutinosa rendszerével. Jia et al. kutatási eredményei azt mutatják, hogy a friss Rehmannia glutinosa raffinóz tartalma 26,45%, ami jelentősen magasabb, mint a nyers Rehmannia glutinosa (9,16%) és a főtt Rehmannia glutinosa (5,98%), és potenciális kutatási értékkel bír. Ebben a kísérletben nyersanyagként friss, fagyasztva szárított tablettákat használtak oligoszacharidok előállításához, mind ultrahangos, mind forró vizes módszerrel. További tisztítás után az oligoszacharid fragmentumok két csoportját (GRCP és GRSP) nyerték, és fiziko-kémiai tulajdonságaikat és antioxidáns kapacitásukat szisztematikusan és átfogóan elemezték. A cél az, hogy elméleti alapot biztosítsunk a friss Rehmannia glutinosa fejlesztéséhez és felhasználásához.

Nyersanyagként friss Rehmannia glutinosa fagyasztva szárított tablettákat használtak, a bennük lévő oligoszacharidokat ultrahangos és forró vizes módszerrel extrahálták és tisztították, és két töredékcsoportot, GRCP-t és GRSP-t kaptak. A kettő szénhidráttartalma 901,39, illetve 948,06 mg/g. Mindkettő alacsony szennyeződéssel és nagy tisztasággal rendelkezik, ami a sikeres tisztítást jelzi, ami sokkal magasabb, mint a korábbi következtetés, miszerint a raffinóz aránya a kivont cukrokban 26,45%. Ez a kísérlet átfogóan tanulmányozta a raffinóz extrakcióját, tisztítását és fizikai-kémiai tulajdonságait a friss Rehmannia glutinosa-ban. Az eredmények azt mutatták, hogy a GRCP és a GRSP fő funkcionális csoportjai megegyeznek, és a fő komponensek oligoszacharidok, főként raffinóz. A termikus elemzés azt mutatta, hogy szerkezetük viszonylag stabil volt 205,5 ℃ és 209,0 ℃ alatt. A két fragmentum monoszacharid-összetétele megegyezik, de az arányok eltérőek. A SEM-megfigyelés azt mutatja, hogy megjelenésük és morfológiájuk bizonyos különbségeket mutat, ami arra utal, hogy a különböző extrakciós módszerek bizonyos mértékben befolyásolják az oligoszacharidok szerkezetét. Az aktivitásvizsgálati eredmények azt mutatják, hogy mindkét fragmenscsoport rendelkezik bizonyos antioxidáns aktivitással. A tömegspektrometriás eredmények azt is jelzik, hogy a GRCP és a GRSP fő összetevője a sztachióz, amely egy funkcionális oligoszacharid, amely 2 molekula alfa-galaktózból, 1 molekula alfa-glükózból és 1 molekula béta-fruktózból áll. Hatására szabályozza a bél mikrobióta egyensúlyát és az immunrendszer szabályozását, és kiváló funkcionális élelmiszer-összetevő. Az oligoszacharidok 2-10 monoszacharid glikozidos kötéseken keresztül történő összekapcsolásával képződő oligoszacharidok. Az oligoszacharidok kivonására általánosan használt módszer a vizes extrakció és az alkoholos kicsapás, amely 80% térfogatszázalékos etanollal történő kicsapást jelent a poliszacharidok eltávolítása és interferenciájuk csökkentése érdekében, ami előnyös a további tisztítás szempontjából. Wu 75% etanolt használt a friss Rehmannia oligoszacharidok kivonásához, és a felülúszót vette a későbbi extrakcióhoz. Eközben a 80% körüli térfogatfrakciójú etanolt gyakran használják kicsapásra a poliszacharidok kinyeréséhez. Ahogy Wang és munkatársai megállapították, különböző molekulatömegű poliszacharidok nyerhetők 30%, 60%, illetve 80% térfogati frakciójú etanollal történő kicsapással, hogy Pleurotus ostreatusból származó poliszacharidokat nyerjenek. Yang és munkatársai 80% etanolt használtak a poliszacharidok kicsapására és tisztítására, végül a Botrytis cinerea és a jujube poliszacharidjait nyerték. Ye és munkatársai a Hedyotis diffusa poliszacharidjait az extrakciós oldat 90% etanolos kicsapásával nyerték. Ebben a kísérletben az extrakciós oldat térfogatának négyszeresét adták vízmentes etanolhoz (80% végkoncentrációjú) alkoholos kicsapáshoz. A csapadékot tovább tisztítottuk, és a tisztított végtermék fő összetevője raffinóz volt, ami azt jelzi, hogy a 80% etanolos csapadékban oligoszacharidok voltak jelen, amelyek közül nem mindegyik poliszacharid. Ennek az eredménynek az lehet az oka, hogy a 80% etanol a sztachiózt beburkolja és erősen kicsapja, vagy hogy a sztachióznak korlátozott az oldhatósága a 80% etanolban, és részben kicsapódhat. A konkrét okok azonban még további kutatásokat igényelnek. Az előzetes kísérletben az alkoholos csapadékot 3500Da dializálózsák segítségével dializálták, és azt találták, hogy a 3500Da dializálózsákban a cukoranyagok hozama csak 0,61% volt, ami azt jelzi, hogy az alkoholos csapadékban lévő anyagok többsége kis molekulatömegű. Ezért a későbbi szakaszban egy 500~1000Da dialíziszsákot használnak a tisztított anyagnak a többi kis molekulájú anyagtól és szennyeződéstől való elválasztására, ami egyszerű és hatékony módszer a minta tisztaságának javítására. Ez a tanulmány elméleti alapot nyújt a friss Rehmannia oligoszacharidok, különösen a raffinózforrások szisztematikus kutatásához és további racionális fejlesztéséhez és felhasználásához.