A Codonopsis pilosula antioxidáns károsodásának kutatása a hálózati farmakológia alapján
A Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. a Campanulaceae családba tartozó növény Codonopsis pilosula Nannf var. modesta (Nannf.) L. A T. Shen vagy Codonopsis tangshen Oliv. szárított gyökerei. A Codonopsis pilosula Kínában általánosan használt tonizáló hagyományos kínai gyógyászat, amely főként szénhidrátokat, alkaloidokat, poliacetiléneket, glikozidokat, terpéneket és egyéb összetevőket tartalmaz. Számos farmakológiai hatása van, mint például a vércukorszint szabályozása, a vérképző funkció elősegítése, a hipoxia elleni, a stressz elleni, a fáradtság elleni, a szervezet immunitásának fokozása, az öregedés késleltetése, a gyomorösszehúzódás szabályozása, a gyomor-bél nyálkahártya védelme és a fekély elleni. Mostanáig hiányoznak a Codonopsis pilosula jellegzetes, természetükben stabil, kizárólagos és a klinikai hatékonysággal szorosan összefüggő hatóanyagok kutatása, ami a Codonopsis pilosula átfogó minőségellenőrzését korlátozó szűk keresztmetszetté vált.
A hálózati farmakológia hatékony módszereket és eszközöket biztosít a hagyományos kínai orvoslás komplex rendszereinek tanulmányozásához. Ezt a módszert alkalmazták a kínai gyógyszerkészítmények kompatibilitási szabályainak értelmezésére, a hatóanyagok szűrésére, a farmakológiai anyagok alapjainak tanulmányozására és a hatásmechanizmusok vizsgálatára, számos kutatási eredményt elérve. A jelenlegi hálózati farmakológia azonban még mindig szembesül néhány kihívással, mint például a hálózati farmakológia alkalmazása olyan betegségek hatóanyagainak szűrésére, amelyek nem a fő minőségellenőrzési összetevők vagy a hagyományos kínai gyógyászatban a jelenlegi szabványok szerint magasabb tartalmú összetevők. A meglévő kísérleti bizonyítékok azt mutatják, hogy a hálózati farmakológiai szűréssel nyert egyes komponensek alacsonyabb tartalommal rendelkeznek az eredeti gyógyászati anyagokban vagy összetett formulákban. Így a Codonopsis pilosula több értékes hatóanyagának megtalálása érdekében ez a cikk a Codonopsis pilosula több olyan komponensét kereste, amelyek HPLC-vel elemezhetőek az irodalmi áttekintésen keresztül. A hálózati farmakológiai módszerek és az "oxidatív stressz" mint keresési kifejezés használatával feltárták a több monomer fő hatásmechanizmusát az antioxidáns stresszben; És a H2O2 indukált RAW264.7 sejtek modellként történő felhasználásával igazolták a Codonopsis pilosula hatóanyagainak antioxidáns hatását, ami referenciát biztosít a Codonopsis pilosula gyógyászati anyagok minőségellenőrzéséhez.

 

A hálózati farmakológia előrejelzési eredményei szerint a Codonopsis pilosula alkinil-glikozid A és a Codonopsis pilosula alkaloidok B kémiai képletei nem szerepelnek a PubMedben. A Codonopsis pilosula glikozid I-et nem jósolták célpontként a Swiss Target Predictionben, és egy Codonopsis pilosula alkinil glikozid Ning volt. A 10 monomer közül az antioxidáns hatású komponensek a következők lehetnek: Codonopsis pilosula alkinil glikozid, Syringin, Codonopsis pilosula alkinil glikozid B, L-triptofán, Codonopsis pilosula alkinil alkohol és Codonopsis pilosula alkaloid A. A Codonopsis pilosula alkinil glikozid, a Codonopsis pilosula alkinil glikozid Ning, a Codonopsis pilosula alkinil alkohol és a Heart leaf Codonopsis pilosula alkinil glikozid B mind a Codonopsis pilosula alkinil ene osztályba tartozó komponensek. A bíbor eugenol a fenilpropanoid osztályba tartozó komponens, az L-triptofán és a Guanhua Codonopsis pilosula alkaloid A pedig az alkaloid osztályba tartozó komponensek. Ez a cikk a Codonopsis pilosula alkinilglikozidokat, a fenilpropanoidok közül a sziringint és az alkaloidok közül az L-triptofánt választja ki képviselőnek az Nrf2 Keap1 jelátviteli útvonal antioxidáns stresszhatásainak in vitro kísérleti vizsgálataihoz. A RAW264.7 sejtekben in vitro H2O2 indukált oxidatív károsodási modell létrehozásával vizsgáltuk a modellre gyakorolt védőhatást és az Nrf2 Keap1 jelátviteli útvonalra gyakorolt hatását.

A Codonopsis pilosula farmakológiai hatásai között bizonyos kapcsolat van a stressz elleni, öregedésgátló, a gyomor-bél nyálkahártya védelme, a fáradtság és a hipoxia elleni és antioxidáns farmakológiai hatások között. Ezért ez a cikk az "oxidatív stressz" kifejezést használja keresőszóként, és hálózati farmakológiai módszereket alkalmaz a Codonopsis pilosula antioxidáns stressz mechanizmusának feltárására.

Miután a Codonopsis pilosula hét komponensének előre jelzett célfehérjéit kereszteztük az oxidatív stresszel kapcsolatos fehérjékkel, 33 Codonopsis pilosula antioxidáns károsodást okozó célfehérjét kaptunk. Konstruáljunk fehérje-fehérje kölcsönhatási hálózatokat a 33 metszett célponthoz, amelyek között az AKT1, CASP3, APP, MAPK1, MAPK8, MAPK3 és LCK szoros kapcsolatban állnak egymással. Az NFE2L2 és a KEAP1 fontos molekulák az Nrf2 Keap1 jelátviteli útvonalban, míg az APP, CASP3, CASP6, SYK, AKT1, GSK3B, MDM2, MMP2, PARP1, HSPA8, CDK2 az Nrf2 jelátviteli útvonalat aktiválhatják olyan jelátviteli utak aktiválásával, mint a MAPK1/MAP2K1/MAPK3/MAPK9/MAPK8. Ezért feltételezhető, hogy az Nrf2 Keap1 fontos útvonal lehet a Codonopsis pilosula potenciális hatóanyagai számára, hogy antioxidáns károsító hatásokat fejtsenek ki. Az LCK, JAK2, EGFR és a Codonopsis pilosula hatóanyagok más célfehérjéi szorosan kapcsolódnak az immungyulladáshoz, ami arra utal, hogy a Codonopsis pilosula az immungyulladás szabályozásával antioxidáns károsodást is kifejthet. A GO dúsítási elemzés a Codonopsis pilosula potenciális hatóanyagainak 33 célfehérjét mutatta ki az antioxidáns stresszre, ami arra utal, hogy ezek a célfehérjék olyan molekuláris funkciók révén fejthetik ki antioxidáns károsító hatásukat, mint a fehérje kináz aktivitás, gyógyszer-kötés, nukleotid-kötés, valamint az oxigéntartalmú vegyületekre adott sejtválasz és a sejtek biológiai folyamatainak szabályozása.

Az in vitro kísérlet előkísérletében 490 μ mol/l H2O2-t választottunk a későbbi beavatkozási koncentrációnak, és azt találtuk, hogy a Codonopsis pilosula acetilid, az L-triptofán és a sziringin 100 és 200 μ mol/l nem volt jelentős hatással a RAW 264.7 sejtek proliferációjára 24 órás beavatkozás után. Ezért a későbbi szakaszban 100 és 200 μ mol/L Codonopsis pilosula acetilid, L-triptofán és sziringin kísérleti koncentrációkat használtunk.

He és munkatársai meghatározták a Codonopsis pilosula acetilid és sziringin tartalmát a Codonopsis pilosulában, amely 404,71 ± 5,90 és 25,23 ± 0,21 μ g/g volt. Gao megmérte a Codonopsis pilosula acetilid, sziringin és L-triptofán tartalmát a szárított, napon szárított és árnyékban szárított Codonopsis pilosula-ban, amely a Codonopsis pilosula acetilid esetében 1134,7, 1581,3 és 1985,7 μ g/g, a sziringin esetében 7,3, 27,6 és 121,6 μ g/g, az L-triptofán esetében pedig 96,9, 135,0 és 148,7 μ g/g volt. A Codonopsis pilosula alkinil-glikozid, sziringin és L-triptofán tartalma a Codonopsis pilosula-ban számszerűsíthető.

Összefoglalva, ez a cikk hálózati farmakológiai módszereket használ a Codonopsis pilosula fő potenciális aktív összetevőinek antioxidáns stressz fő mechanizmusainak előrejelzésére. Sejtkísérleteken keresztül igazoltuk a reprezentatív összetevők, például a Codonopsis pilosula acetilid, az L-triptofán és a sziringin hatását a H2O2-vel kezelt RAW264.7 sejtekre. A kutatási eredmények referenciaként szolgálnak a Codonopsis pilosula gyógyászati anyagok, főzetdarabok és készítmények minőségellenőrzéséhez.