Recherche sur l'évaluation de la qualité de la verveine et la loi de transfert de la dose de décoction standard basée sur la carte de caractéristiques UPLC et la méthode d'évaluation multiple d'un test
La verveine officinale (Verbena officinalis L.), partie aérienne sèche de la plante Verbena officinalis L. de la famille des Verbenaceae, a été enregistrée pour la première fois dans le "Catalogue des médecins célèbres" et classée dans la catégorie inférieure. Les composants chimiques de la verveine sont principalement des glycosides iridoïdes, des flavonoïdes, des stérols, des triterpènes, des polyphénols, des huiles volatiles, des tanins, du bêta-carotène, de l'acide caféique, des sucres, etc. Les principaux ingrédients actifs sont les glycosides iridoïdes. Il a une nature fraîche, un goût amer et appartient aux méridiens du foie et de la rate. Il a pour effet de favoriser la circulation sanguine, de disperser la stase sanguine, de désintoxiquer, de favoriser la diurèse, de réduire la jaunisse et d'intercepter le paludisme. En clinique, elle est utilisée pour l'accumulation de symptômes tels que la dysménorrhée, l'aménorrhée, la pharyngite, l'abcès, l'œdème, la jaunisse et le paludisme. Les ressources de la verveine sont abondantes, parmi lesquelles les glycosides iridoïdes ont des effets variés tels qu'antioxydants, hépatoprotecteurs, neuroprotecteurs, protecteurs contre l'ischémie cardiaque et cérébrale, anti-inflammatoires, etc. Les décoctions de plantes chinoises (décoctions standard) sont les préparations composées de médecine chinoise traditionnelle les plus couramment utilisées dans la pratique clinique, ainsi que les préparations les plus anciennes et les plus largement utilisées dans l'histoire de la médecine chinoise. Qu'il s'agisse de morceaux de décoction de la médecine traditionnelle chinoise, de morceaux de décoction de la paroi brisée, de granules de formules de la médecine traditionnelle chinoise ou d'autres morceaux de décoction de la nouvelle médecine chinoise, ils sont tous pris par décoction ou par rinçage à l'eau. Il est donc très important d'utiliser la recherche sur la décoction standard comme contrôle privilégié pour l'étude d'autres préparations de médecine chinoise. Cette étude élucide la loi de transfert quantitatif des morceaux de décoction aux décoctions standard, jetant ainsi les bases de la recherche et de l'évaluation de la qualité des préparations de médecine traditionnelle chinoise à base de verveine.
Cette étude se concentre sur la préparation du verbascoside, du 5-hydroxyverbascoside et du verbascoside dans les tranches de verbascoside, et établit sa carte de caractéristiques UPLC. Les informations de la carte sont analysées à l'aide d'une analyse de mode chimique, et la teneur en verbascoside, 5-hydroxyverbascoside et verbascoside dans le verbascoside est déterminée simultanément par chromatographie liquide à ultra-haute performance combinée à une méthode d'évaluation de test multiple. Les résultats sont comparés à ceux obtenus par la méthode de l'étalon externe. On mesure le rendement de la décoction standard, la teneur en verbascoside, en 5-hydroxyverbascoside et en verbascoside, on calcule le taux de transfert et, sur cette base, on réalise une étude sur le transfert des morceaux de décoction de verbascoside vers la décoction standard afin de démontrer la rationalité des différents indicateurs de qualité.

L'élution isocratique du spectre caractéristique de l'échantillon de verveine ne permet pas d'obtenir une séparation de la ligne de base, c'est pourquoi l'élution en gradient a été utilisée. Dans les expériences préliminaires, cette étude a comparé les phases mobiles telles que l'eau méthanol, l'eau acétonitrile, la solution d'acide phosphorique acétonitrile-0,1% et la solution d'acide phosphorique acétonitrile-0,05%. Finalement, la solution d'acide phosphorique acétonitrile-0,05% a été sélectionnée comme phase mobile. Dans les conditions chromatographiques ci-dessus, la séparation des pics chromatographiques, le nombre théorique de plaques et les paramètres de forme des pics étaient tous bons. Cette étude a utilisé un système expérimental à facteur unique pour étudier les effets du solvant d'extraction, de la méthode et du temps d'extraction, et du rapport solide-liquide sur l'efficacité de l'extraction. Les résultats ont montré que l'efficacité d'extraction était la plus élevée lorsque le solvant d'extraction était le méthanol 80%, que le rapport solide-liquide était de 1:50 (g/mL) et que l'extraction à reflux était effectuée pendant 120 minutes. Par conséquent, la méthode ci-dessus a été utilisée comme méthode d'extraction pour les tranches de verveine.
Le contrôle global de la qualité des composants à indices multiples dans la médecine traditionnelle chinoise est devenu une tendance inévitable dans le développement du contrôle de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise. Le spectre caractéristique/empreinte digitale est une méthode efficace d'évaluation de la qualité, et sa combinaison avec la méthode d'analyse de l'évaluation multiple d'un test permet d'assurer l'intégrité et la précision de l'évaluation de la qualité. Cette étude a établi une carte caractéristique UPLC des morceaux de décoction de verbascoside, identifié 5 pics communs et 3 composants. Le temps d'analyse a été considérablement réduit par rapport à la CLHP et les conditions chromatographiques ont pu être utilisées pour la détermination du 5-hydroxyverbascoside, du verbascoside et de la teneur en verbascoside. L'analyse des composantes principales a été effectuée sur la surface des pics caractéristiques et le modèle d'évaluation complet des composantes principales a permis d'améliorer l'évaluation de la qualité et la méthode d'analyse de la verveine.

L'indice de détermination de la teneur de la verveine dans la pharmacopée chinoise 2020 est la quantité totale d'acide oléanolique et d'acide ursolique, qui sont tous deux des triterpénoïdes à faible polarité et à faible solubilité dans l'eau. Les résultats préliminaires de la recherche expérimentale montrent que la teneur totale en acide oléanolique et en acide ursolique dans la décoction standard de verveine est inférieure à 2,0 mg/g, et que le taux de transfert est inférieur à 6%. Par conséquent, sur la base de la carte des caractéristiques, une méthode d'évaluation multiple a été établie pour la détermination de la teneur en 5-hydroxy verbascoside, verbascoside et verbascoside. Les composants polaires de la verveine sont principalement des terpènes à éther cyclohexène, parmi lesquels le verbascoside et le 5-hydroxyverbascoside sont les principaux composants ayant la teneur la plus élevée, et la décoction standard a un taux de transfert plus élevé. Le taux de transfert de certains lots dépasse 100%, tandis que la plage de transfert totale du 5-hydroxyverbascoside et du verbascoside se situe entre 56,6% et 91,2%. Cela peut s'expliquer par le fait que des composants similaires subissent une transformation structurelle au cours du chauffage, de l'ébullition et d'autres processus. Il existe des différences dans la teneur et le taux de transfert du verbascoside, du 5-hydroxyverbascoside et du verbascoside entre les 18 lots de décoction standard de verbascoside, qui peuvent être liées à la teneur et à la texture des morceaux de décoction. Certains morceaux de décoction ont des couleurs plus claires, des durées de stockage plus longues et plus de débris pendant le traitement, ce qui peut expliquer les fluctuations importantes de leur teneur et de leur taux de transfert. Les trois ingrédients sélectionnés ont une teneur élevée en verveine et ont de bonnes activités pharmacologiques en matière d'antioxydation, d'hépatoprotection, de neuroprotection, de protection contre l'ischémie cardiaque et cérébrale, d'anti-inflammation et d'autres aspects. Ils constituent l'une des principales bases matérielles permettant à la verveine d'exercer ses effets pharmacologiques.

Les résultats de la méthode d'évaluation multiple à un test n'ont montré aucune différence significative par rapport à la méthode de l'étalon externe et peuvent être utilisés pour l'analyse quantitative des composants multiples de la verveine. La carte de caractéristiques UPLC combinée à la méthode d'évaluation multiple à une mesure des composants à indices multiples peut servir de référence pour la recherche et l'évaluation de la qualité du processus de production de la verveine et des préparations à base d'herbes chinoises à base de verveine.