Étude de l'effet inhibiteur de l'oleuropéine sur la tyrosinase
La tyrosinase (EC. 1.14.18.1) est largement présente dans les micro-organismes, les animaux, les plantes et les humains, et est une importante enzyme limitant le taux de synthèse de la mélanine. Son niveau d'expression et son activité déterminent la vitesse et le rendement de la synthèse de la mélanine. L'inhibition de l'activité de la tyrosinase peut améliorer le métabolisme de la tyrosinase des cellules pigmentaires de la peau, prévenir la formation de la pigmentation et jouer un rôle dans la prévention de la formation des taches de rousseur, du mélasma, des taches de vieillesse et du blanchiment. Les inhibiteurs de tyrosinase couramment utilisés, tels que la quercétine et l'hydroquinone, ont de bonnes capacités d'inhibition, mais peuvent provoquer des effets secondaires tels que des dermatites, des allergies cutanées et même des cancers de la peau. Par conséquent, la recherche d'inhibiteurs de tyrosinase sûrs, efficaces et non toxiques est actuellement un sujet de recherche brûlant. À l'heure actuelle, les recherches ont montré que les phénols, les flavonoïdes et leurs dérivés, les polysaccharides, les huiles volatiles, les acides organiques, les coumarines et d'autres composés présents dans de nombreux extraits de plantes sont de bonnes sources d'inhibiteurs de la tyrosinase.
L'oleuropéine est un composé glycoside iridoïde formé par l'hydroxytyrosol et le squelette de l'olive, réparti dans l'ensemble de l'olivier, la teneur la plus élevée se trouvant dans les feuilles d'olivier, suivies par les fruits de l'olivier. Ces dernières années, l'approfondissement continu des recherches sur l'oleuropéine par les chercheurs nationaux et étrangers a permis de découvrir qu'elle possède diverses activités biologiques, telles que les activités antivirales, antitumorales, antibactériennes, antioxydantes, hypoglycémiques, hypotensives, anti-Alzheimer, la protection des plaies cutanées, etc. Cependant, il existe peu de rapports sur l'effet de l'oleuropéine sur l'activité de la tyrosinase. Cet article vise à fournir une base théorique pour le développement et l'utilisation de l'oleuropéine en tant qu'ingrédient blanchissant en étudiant son effet sur l'activité de la tyrosinase et son mécanisme d'action.

Dans les réactions enzymatiques, la vitesse de la réaction enzymatique est exprimée en mesurant l'augmentation des produits par unité de temps. La vitesse initiale correspond à la vitesse pendant une certaine période de temps au début de la réaction enzymatique, à laquelle la pente reste pratiquement inchangée. À une certaine concentration de substrat, elle est obtenue à partir de la pente de la tangente de passage à zéro de la courbe de relation produit-temps. La méthode de mesure du taux initial de la réaction enzymatique est généralement utilisée pour déterminer l'activité enzymatique, avec moins de facteurs d'interférence. Dans cette expérience, la courbe A475nm Time a montré une relation approximativement linéaire de 0 à 5,3 minutes de réaction. Avec l'augmentation du temps, la courbe s'est progressivement aplatie, la pente a diminué et la vitesse de réaction a également diminué. À ce stade, l'activité enzymatique mesurée ne pouvait pas représenter l'activité enzymatique réelle, de sorte que la vitesse de réaction à 5,3 minutes de réaction a été considérée comme la vitesse initiale.
L'expérience d'inhibition de l'activité de la tyrosinase in vitro se divise en expériences cellulaires et expériences biochimiques. Chan et al. estiment que les cellules peuvent simuler des environnements physiologiques réels et que la mesure de l'activité de la tyrosinase par le biais d'expériences cellulaires est plus fiable que la mesure directe de l'activité de la tyrosinase et peut mieux refléter son activité inhibitrice. Dans cette étude, on a constaté des différences dans l'activité inhibitrice de l'oleuropéine sur la tyrosinase des cellules B16 et sur la tyrosinase des champignons. Au niveau cellulaire, l'oleuropéine a mieux inhibé l'activité de la tyrosinase que le contrôle positif, la quercétine. Ces résultats concordent avec ceux de la recherche de Li et al.
Lorsque la peau humaine est exposée aux rayons ultraviolets, elle produit une grande quantité d'espèces réactives de l'oxygène (ERO) et de radicaux libres, qui accélèrent le vieillissement de la peau, la pigmentation et l'aggravation des rides. La recherche a montré qu'une quantité élevée de ROS active la tyrosinase en mobilisant l'hormone alpha de stimulation des mélanocytes dans l'épiderme, ce qui stimule finalement les mélanocytes à produire de la mélanine. Les antioxydants favorisent le métabolisme normal de l'organisme en éliminant les espèces réactives de l'oxygène et les radicaux libres, en améliorant l'état de la peau, en dissipant progressivement les pigments et en jouant ainsi un rôle blanchissant. Wang et al. ont constaté que les antioxydants tels que l'acide glycyrrhizique, le resvératrol, le resvératrol oxydé et le phényl-résorcinol ont un effet synergique entre l'activité antioxydante et l'inhibition de la tyrosinase lorsqu'ils utilisent la L-dopa comme substrat, ce qui inhibe fortement l'activité de la tyrosinase. Le glycoside amer d'olive a une forte activité antioxydante. La question de savoir si son inhibition de l'activité de la tyrosinase est liée à l'activité antioxydante et s'il existe un effet synergique entre le glycoside amer d'olive et les antioxydants mérite d'être étudiée plus avant.
La tyrosinase est une enzyme clé dans la synthèse de la mélanine. En inhibant l'activité de la tyrosinase, la production de mélanine peut être supprimée, ce qui permet d'obtenir un effet de blanchiment. Les résultats de cette étude indiquent que l'oleuropéine a un effet inhibiteur significatif sur la tyrosinase des cellules B16 et sur la tyrosinase des champignons, montrant une bonne relation dose-dépendante. L'analyse cinétique montre que le type d'effet inhibiteur de l'oleuropéine sur la tyrosinase des champignons est une inhibition non compétitive réversible, c'est-à-dire que la liaison de l'oleuropéine à la tyrosinase se fait sur un groupe essentiel en dehors du site de liaison du substrat. L'oleuropéine ne réduit pas l'affinité de la tyrosinase pour le substrat (L-dopa), mais inhibe plutôt l'activité enzymatique en bloquant l'action catalytique de l'enzyme, réduisant ainsi le Vm. Le glycoside amer d'olive possède un large éventail de sources, une grande sécurité et une bonne activité antioxydante. En tant que matière première potentielle pour les produits de blanchiment, il a de vastes perspectives d'application.