La néphropathie diabétique (DN) est la complication microvasculaire la plus courante du diabète et la cause la plus fréquente d'insuffisance rénale terminale (IRT). La pathogenèse actuelle de la néphropathie diabétique est complexe, impliquant des changements dans l'hémodynamique rénale, l'ischémie, le stress oxydatif, l'activation inflammatoire et l'activation du système rénine angiotensine aldostérone (SRAA), conduisant à la fibrose rénale et affectant finalement la fonction rénale. Le blocage opportun de la fibrose rénale peut prévenir efficacement l'évolution de la DN vers l'IRT.

La suractivation de la voie de signalisation RhoA/ROCK est à l'origine des processus de fibrose dans diverses maladies, dont la néphropathie diabétique, et les inhibiteurs de ROCK, représentés par le fasudil, ont montré de bons effets anti-fibrose rénale DN. La naringénine (NRG) est une sorte de composé flavonoïde purifié à partir de plantes d'agrumes, qui a une variété d'effets, tels que la lutte contre l'arythmie, l'athérosclérose, l'anti-inflammation, la lutte contre la fibrose, la lutte contre les virus, la lutte contre les tumeurs, etc. Il est largement utilisé dans la recherche in vivo et in vitro. Toutefois, les recherches sur le rôle de la naringine dans la néphropathie diabétique (DN) sont actuellement limitées. Par conséquent, dans cette étude, un modèle de souris DN a été reproduit et traité avec de la naringine pour observer la progression de la fibrose rénale DN. En même temps, nous avons mis en place le fasudil comme groupe de contrôle positif pour explorer davantage l'effet de la naringine sur la voie de signalisation RhoA/ROCK.

32 souris C57BL/6 ont été divisées au hasard en un groupe normal, un groupe modèle, un groupe naringine et un groupe fasudil. Après avoir reproduit avec succès le modèle de DN, les souris ont été traitées avec de la naringine et du fasudil, tandis que le groupe normal et le groupe modèle ont été traités avec une solution saline physiologique. Les souris ont été euthanasiées pendant 12 semaines consécutives pour observer les changements dans la créatinine sérique (Scr), la quantification des protéines urinaires sur 24 heures (Upro 24 heures), la glycémie et le poids corporel ; les colorations HE et Masson ont été utilisées pour observer les changements morphologiques dans les reins ; L'immunohistochimie a été utilisée pour observer les niveaux de RhoA, ROCK1, ROCK2, le collagène de type I (Col1), et le collagène de type III (Col3) dans les reins ; l'analyse Western blot du RhoA rénal ROCK1、ROCK2、p-MYPT1、 Les niveaux de laminine (LN) et de fibronectine (FN).

Les premiers changements pathologiques de la néphropathie DN sont principalement la glomérulosclérose, les lésions de l'artériole rénale et la dégénérescence tubulaire, conduisant progressivement à une fibrose rénale. À un stade avancé, on observe une forte protéinurie et une insuffisance rénale. La naringine est l'un des médicaments représentatifs des flavonoïdes. Wenli et al. ont découvert que la naringine pouvait atténuer la fibrose rénale et protéger la fonction rénale chez les rats DN en régulant la voie de signalisation TGF-β 1/smad. D'autres recherches menées par Ning et al. ont montré que la naringine augmente l'expression de let-7a, qui régule négativement le récepteur 1 du facteur de croissance transformant β 1 (TGFBR1), inhibant ainsi la voie de signalisation TGF - β 1/smad et traitant la néphropathie diabétique. En outre, la naringine peut également ralentir la progression de la néphropathie diabétique et protéger la fonction rénale en réduisant les niveaux de stress oxydatif, en inhibant l'expression des facteurs inflammatoires et en favorisant l'apoptose cellulaire. Dans cette étude, un modèle de souris diabétique de type 1 a été établi par injection intrapéritonéale de STZ, puis a continué à être nourri pendant 4 semaines, et l'Upro de 24 h était deux fois plus importante qu'avant la modélisation, ce qui a été considéré comme une réplication réussie du modèle DN. Après la modélisation, l'expression de la naringénine 50 mg/(kg - d FN) a été réduite, la fibrose rénale a été réduite, la protéinurie et la fonction rénale ont été améliorées, et la glycémie et le poids corporel n'ont pas eu de changement significatif par rapport au groupe modèle, ce qui indique que la naringénine et le fasudil pourraient améliorer la fibrose rénale DN sans affecter le poids corporel et la glycémie.

RhoA est un membre de la superfamille Ras des protéines de liaison à la guanosine triphosphate (GTP) à petites molécules. Les tyrosines kinases et les récepteurs couplés aux protéines G peuvent recruter et activer les facteurs d'échange de nucléotides de guanine (GEF) de RhoA, convertissant ainsi RhoA de l'état inactif de liaison au PIB à l'état actif de liaison au GTP. RhoA joue le rôle d'un interrupteur moléculaire pour réaliser la transition entre les deux états, agissant sur les molécules de signalisation en aval pour produire des effets biologiques. La protéine kinase associée à Rho (ROCK) est la première molécule effectrice en aval de RhoA découverte et actuellement la plus étudiée sur le plan fonctionnel. Le poids moléculaire relatif de ROCK est d'environ 160 kDa, et il appartient à la famille des sérines/thréonines protéines kinases. Il existe deux sous-types de ROCK : ROCK1 et ROCK2, qui possèdent tous deux trois domaines structurels principaux : un domaine kinase catalytique à l'extrémité N-terminale, un domaine en hélice enroulée contenant un domaine de liaison Rho (RBD) au milieu, et un domaine pH riche en cystéine (CRD) à l'extrémité C-terminale. Les séquences d'acides aminés de 65% de ROCK1 et ROCK2 sont identiques, et l'homologie des domaines kinases peut atteindre 92%. ROCK est exprimé dans la plupart des tissus, mais il existe une hétérogénéité entre les différents tissus. ROCK1 est principalement exprimé dans le foie, les testicules, la rate, les reins, les poumons, etc., tandis que ROCK2 est principalement exprimé dans le cerveau, les muscles squelettiques, le cœur, etc. La voie de signalisation composée de RhoA/ROCK participe à la régulation d'activités physiologiques telles que la prolifération cellulaire, l'adhésion, la migration et l'apoptose par le biais d'interactions avec des substrats en aval tels que la chaîne légère de myosine (MLC), MYPT-1, CPI-17, ERM, etc. Dans des conditions pathologiques, la voie de signalisation RhoA/ROCK augmente la sécrétion de divers facteurs pro-fibrotiques, tels que le facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF), l'angiotensine II (AngII), l'endothéline-1 (ET-1), le facteur chimioattractant des monocytes (MCP-1), l'interleukine-6 (IL-6), le facteur de croissance transformant - β 1 (TGF - β 1), le facteur de croissance du tissu conjonctif (CTGF), etc. ROCK peut également induire l'activation du facteur nucléaire kappa B (NF - κ B), qui à son tour augmente la sécrétion de facteurs pro-fibrotiques tels que le facteur de nécrose tumorale (TNF - α) et l'IL-1 β. Fasudil est actuellement le premier et le seul inhibiteur de ROCK approuvé pour une utilisation clinique. En raison de son puissant effet vasodilatateur, il est largement utilisé dans les maladies de spasme vasculaire telles que l'hémorragie sous-arachnoïdienne et la cardiopathie ischémique. Il peut se lier efficacement aux domaines kinases dépendants de l'ATP pour bloquer ROCK et inhiber la transduction du signal de la voie de signalisation RhoA/ROCK. Dans le domaine de la néphropathie diabétique, le fasudil a également été largement étudié et améliore la DN en affectant de multiples voies, y compris : (1) l'inhibition de l'activation de NF - κ B, FN et TGF - β, la réduction de la réponse inflammatoire et l'atténuation de la glomérulosclérose ; (2) la promotion de la formation des cellules podocytaires, la restauration du mouvement de contraction anormal, la réduction de la perméabilité de la membrane de filtration glomérulaire et la formation de la protéinurie ; (3) Inhiber le processus de transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) des cellules épithéliales tubulaires rénales et affaiblir la fibrose interstitielle rénale ; (4) Étendre le réseau vasculaire rénal, améliorer l'hémodynamique rénale et réduire les lésions rénales. Dans cette étude, par rapport au groupe normal, l'expression de RhoA, ROCK1 et ROCK2 dans le tissu rénal des souris du groupe modèle a augmenté de manière significative, le niveau de phosphorylation de MYPT1 Thr853 a augmenté et l'activité de ROCK a augmenté ; Par rapport au groupe modèle, l'expression de RhoA, ROCK1 et ROCK2 dans le tissu rénal a été significativement réduite dans le groupe Fasudil, le niveau de phosphorylation de MYPT1 Thr853 a été réduit, l'activité de ROCK a été affaiblie, et il y a eu une diminution des protéines urinaires et une amélioration de la fonction rénale ; Comme dans le groupe fasudil, le groupe naringine a montré une diminution significative de l'expression de RhoA, ROCK1 et ROCK2 dans le tissu rénal par rapport au groupe modèle. Le niveau de phosphorylation de MYPT1 Thr853 a été réduit et l'activité de ROCK a été affaiblie, ce qui s'est accompagné d'une diminution des protéines urinaires et d'une amélioration de la fonction rénale. Cependant, il n'y avait pas de différence statistiquement significative entre le groupe fasudil et le groupe naringine en ce qui concerne les différents indicateurs. Ce résultat expérimental suggère que la voie de signalisation RhoA/ROCK1 est impliquée dans la formation de la fibrose rénale chez les souris DN, et que l'amélioration de la fibrose rénale chez les souris DN par la naringine peut être liée à la régulation de la voie de signalisation RhoA/ROCK1.

En résumé, les études expérimentales sur les animaux suggèrent que la naringine peut réduire de manière significative le degré de fibrose rénale chez les souris DN, et que son mécanisme peut être lié à la régulation de la voie de signalisation RhoA/ROCK. Toutefois, son mécanisme spécifique et son site d'action nécessitent des recherches plus approfondies aux niveaux cellulaire et moléculaire.