Étude des différences de qualité entre la fritillaire du Zhejiang et la fritillaire du Hubei sur la base de l'empreinte digitale HPLC-ELSD et de la quantification multi-composants
Fritillaria thunbergii Miq. est un bulbe séché de la plante Fritillaria thunbergii Miq. de la famille des liliacées, qui figure en tête des "huit arômes du Zhejiang" et a été inclus dans plusieurs éditions de la pharmacopée de la République populaire de Chine (ci-après dénommée "pharmacopée chinoise"). Elle est récoltée, lavée, humidifiée, coupée en tranches épaisses et séchée lorsque la plante se fane au début de l'été ; Xi l'appelait "Zhe Bei Pian". La fritillaire de Zhejiang a pour fonctions d'évacuer la chaleur, de résoudre les mucosités, de soulager la toux, de détoxifier et de disperser les nodules et d'éliminer les escarboucles. Elle est utilisée cliniquement pour traiter la chaleur du vent, la toux de feu des mucosités, les abcès pulmonaires, les abcès mammaires et les plaies.

La fritillaire du Hubei est un bulbe séché de Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C. Hsiao, une plante de la famille des liliacées. Ses principales fonctions sont d'évacuer la chaleur et les mucosités, de soulager la toux et de disperser les nodules. Elle est couramment utilisée dans la pratique clinique pour traiter des symptômes tels que la toux due à la chaleur des poumons et la toux due aux mucosités. La fritillaire du Zhejiang et la fritillaire du Hubei appartiennent toutes deux au genre Fritillaria et peuvent être utilisées en médecine traditionnelle chinoise à des fins médicinales ; les principes actifs des deux sont des alcaloïdes, mais leurs types sont différents. Les principaux principes actifs de la fritillaire du Zhejiang comprennent la fritillaire A, la fritillaire B, l'isofritillaire A, etc. Les principaux principes actifs de la fritillaire du Hubei comprennent la fritillaire A, la fritillaire B, Hubeijia, Hubeiyi, Hubeixin, etc. Il existe donc certaines différences dans les effets pharmacologiques de la fritillaire du Zhejiang et de la fritillaire du Hubei. Dans la pharmacopée chinoise de 2020, dans la catégorie des herbes médicinales, Zhejiang Fritillaria et Hubei Fritillaria sont listées séparément, ce qui indique qu'il existe certaines différences entre les deux herbes médicinales.

En raison de la grande variété et de la différence de prix des espèces de Fritillaria sur le marché, il existe un phénomène de substitution mutuelle ou de substitution de la fausse Fritillaria et de la Fritillaria du Hubei. En raison des limites de l'identification morphologique, microscopique et physicochimique, il n'est pas possible de démontrer efficacement les similitudes et les différences de qualité des deux matières médicinales. Il est donc nécessaire d'établir une méthode plus spécifique et plus précise pour distinguer et différencier efficacement les deux.

L'édition 2020 de la pharmacopée chinoise précise que les indicateurs de détermination de la teneur en Fritillaria thunbergii sont Fritillaria A et Fritillaria B, tandis que l'indicateur de détermination de la teneur en Fritillaria thunbergii dans la province de Hubei sélectionne Fritillaria B, et la teneur limite en Fritillaria thunbergii B dans la province de Hubei est sensiblement plus élevée que la teneur limite totale en Fritillaria thunbergii A et Fritillaria thunbergii B dans la province de Zhejiang, ce qui crée des conditions objectives pour la falsification et l'utilisation de Fritillaria thunbergii. Face à la complexité du système de composition chimique de la médecine chinoise traditionnelle, l'utilisation d'un modèle quantitatif unique n'est plus suffisante pour répondre aux besoins de contrôle de la qualité de la médecine chinoise moderne. À l'heure actuelle, il existe peu de rapports sur la différence de teneur en principes actifs entre les deux types de Fritillaria. Par conséquent, dans cette étude, la méthode HPLC-ELSD a été utilisée pour établir les spectres d'empreintes digitales de Fritillariae Thunbergii Bulbus (FTB) et de Fritillariae Hupehensis Bulbus (FHB) dans Fritillariae thunbergii et Fritillariae Hupehensis Bulbus dans le Hubei, respectivement. Parallèlement, cinq composants alcaloïdes identiques ont été déterminés et une étude comparative complète a été menée sur Fritillariae thunbergii et Hubei, tant du point de vue qualitatif que quantitatif, fournissant des références pour l'identification et l'évaluation de la qualité des deux matières médicinales.

 

En ce qui concerne l'établissement et l'application des spectres d'empreintes digitales, les spectres d'empreintes digitales HPLC-ELSD de Fritillaria thunbergii et de Fritillaria thunbergii ont été établis sur la base des caractéristiques des composants alcaloïdes de Fritillaria thunbergii et de Fritillaria thunbergii. Les résultats de l'évaluation de la similarité ont montré que les spectres d'empreintes digitales de la même Fritillaria thunbergii étaient très similaires. Par conséquent, les spectres d'empreintes digitales peuvent être utilisés comme caractéristiques communes pour la recherche sur le contrôle de la qualité de Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii. En comparant les différences entre les spectres d'empreintes digitales des deux types de Fritillaria, on constate que le spectre d'empreintes digitales de Fritillaria thunbergii ne présente manifestement pas le pic du spectre du pigment de Hubeijia ou que la teneur en pigment de Hubeijia est extrêmement faible, ce qui le rend difficile à détecter dans Fritillaria thunbergii. Par conséquent, le Hubeijia peut servir de biomarqueur différentiel pour distinguer et différencier deux types de Fritillaria, le Zhejiang Fritillaria et le Hubei Fritillaria.

En utilisant la surface du pic commun comme variable, les analyses HCA, PCA et OPLS-DA ont été menées séparément. Les résultats des analyses HCA et PCA ont permis de distinguer et de différencier efficacement Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii, ce qui indique que la combinaison de l'empreinte digitale, de l'analyse HCA ou de l'analyse PCA est une méthode efficace pour identifier Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii. Pour clarifier davantage les différences de composition chimique entre les deux types de Fritillaria thunbergii, l'analyse OPLS-DA a été utilisée pour identifier quatre biomarqueurs différentiels. En fonction de l'importance des différences, ils ont été classés comme suit : Fritillaria thunbergii>Peak 4>Berberine A>Berberine B, ce qui indique qu'il existe des différences significatives dans la teneur des composants susmentionnés entre les deux types de Fritillaria thunbergii. Cette différence est en partie due aux différences entre les matières médicinales elles-mêmes. Les différentes origines peuvent également être étroitement liées à des facteurs tels que l'environnement de plantation et le cycle de croissance des plantes médicinales.

En ce qui concerne la sélection des indicateurs de détermination de la teneur, les alcaloïdes contenus dans Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii sont principalement divisés en alcaloïdes stéroïdiens et alcaloïdes stéroïdiens. Les recherches ont révélé que les alcaloïdes ont diverses activités pharmacologiques telles que les effets expectorants, antitussifs, antiasthmatiques, anti-inflammatoires et antitumoraux, qui correspondent aux indications fonctionnelles de Zhejiang Fritillaria et de Hubei Fritillaria. Cinq alcaloïdes identiques ont été identifiés à partir des spectres d'empreintes HPLC-ELSD de Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii. Les résultats de la détermination de la teneur ont montré que, à l'exception de la différence de teneur en ibuprofène, les quatre autres composants de Fritillaria thunbergii, la berbérine A, la berbérine B et l'isoberbérine A présentaient des différences de teneur significatives. Parmi eux, la teneur en berbérine A de Fritillaria thunbergii était significativement plus élevée que celle de Fritillaria thunbergii, tandis que la teneur en berbérine A, berbérine B et isoberbérine A était significativement plus faible que celle de Fritillaria thunbergii. Par conséquent, en mesurant la teneur en berbérine A, berbérine A, berbérine B et isoberbérine A, il est possible de faire la distinction entre Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii. Les résultats de la recherche obtenus sont fondamentalement cohérents avec les résultats de l'analyse OPLS-DA. La littérature indique que les différences dans la teneur et la proportion d'alcaloïdes peuvent être un facteur important à l'origine des différences entre les deux types de Fritillaria thunbergii en ce qui concerne la toux, les mucosités, les effets antibactériens et anti-inflammatoires. La détermination simultanée de plusieurs alcaloïdes est d'une grande importance pour le contrôle de la qualité et l'évaluation des médicaments traditionnels chinois à orientation clinique, Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii. Il est donc recommandé d'augmenter la détermination de la berbérine et de l'isoberbérine dans le contrôle de la qualité des matériaux médicinaux de Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii.

En résumé, cette étude a établi des méthodes d'empreinte HPLC-ELSD pour Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii, et a déterminé simultanément la teneur en cinq alcaloïdes, ce qui peut fournir des références importantes pour l'identification et le contrôle de qualité des matières médicinales de Fritillaria thunbergii et Fritillaria thunbergii.