Étude de l'effet inhibiteur de l'acétine J8 sur les cibles de la prolifération des cellules endothéliales et les voies de signalisation cellulaire liées à l'apoptose, basée sur l'amarrage moléculaire
L'écorce d'acacia est l'écorce séchée de la légumineuse Albizia julibrissin Durazz. Elle a un goût doux et sucré, et est répertoriée dans la pharmacopée comme ayant pour effet de soulager la dépression, de calmer l'esprit, de favoriser la circulation sanguine et de réduire les gonflements. Elle est principalement utilisée pour traiter des symptômes tels que l'agitation, la dépression, l'insomnie, les abcès pulmonaires, les plaies et les douleurs causées par les chutes. Des études pharmacologiques modernes ont montré que les extraits bruts et les saponines totales de l'écorce d'acacia inhibent la prolifération des cellules tumorales in vivo et in vitro. Des médecins renommés tels que Zhu Liangchun ont obtenu de bons résultats cliniques dans le traitement du cancer du poumon avec des médicaments tels que l'écorce d'acacia. Dans le cadre de l'activité antiangiogenèse tumorale, les travaux préliminaires de ce projet ont permis d'isoler et de purifier des composants efficaces et des ingrédients actifs qui inhibent l'angiogenèse tumorale à partir de l'écorce d'acacia, et d'identifier leur ingrédient actif comme étant le julioside J8 (J8). Les résultats de la recherche ont montré que le J8 a une activité inhibitrice significative sur la prolifération des cellules endothéliales. Il peut également provoquer l'apoptose des cellules. Cependant, on ne sait toujours pas comment il régule la transduction du signal depuis l'extérieur de la cellule et à travers la membrane cellulaire, le cytoplasme jusqu'au noyau pour exercer ses effets, et il n'y a pas de rapports de recherche au niveau national et international. Cette étude a utilisé l'amarrage moléculaire combiné à des expériences cellulaires in vitro pour analyser les cibles de l'effet inhibiteur de J8 sur la prolifération des cellules endothéliales et ses voies de signalisation cellulaire liées à l'apoptose.

J8 est une saponine isolée de l'écorce d'Acacia. Des études antérieures ont suggéré qu'elle avait des effets inhibiteurs sur l'angiogenèse tumorale in vitro et in vivo, et qu'elle pouvait induire l'apoptose des cellules endothéliales. Cependant, la voie par laquelle il induit l'apoptose des cellules n'est pas très claire. Afin d'étudier le mécanisme de l'apoptose des cellules endothéliales induite par le J8, un nouveau lot d'échantillons a été préparé en utilisant les méthodes d'extraction, d'isolement et d'identification décrites dans la littérature, et leur activité a été détectée. Afin d'étudier le mécanisme d'action du J8 sur les cellules, à savoir si le J8 pénètre à l'intérieur des cellules ou interagit avec les protéines de surface sur la membrane cellulaire, la CLHP a été utilisée pour détecter la concentration du J8 à l'intérieur et à l'extérieur de la cellule. Les résultats ont montré que le J8 ne pénètre pas à l'intérieur des cellules endothéliales et n'interagit qu'avec les protéines de surface de la membrane cellulaire. Afin d'étudier plus avant son interaction avec certaines protéines, l'expérience a d'abord utilisé l'ancrage moléculaire pour ancrer les protéines membranaires FAS, FAS et FAS, qui sont associées à l'apoptose DR3、DR4、DR5、TFR-1， Et il a été constaté que le J8 ne se lie bien qu'au FAS et au VEGF, qui sont des protéines liées à la prolifération des cellules.
Le facteur de croissance de l'endothélium vasculaire VEGF est un facteur de croissance pro-endothélial hautement spécifique qui peut favoriser la prolifération des cellules endothéliales, la migration, l'augmentation de la perméabilité vasculaire et l'angiogenèse. L'inhibition de l'activité du VEGF peut empêcher de manière significative la formation de vaisseaux sanguins tumoraux, ce qui permet d'atteindre l'objectif thérapeutique du traitement antitumoral. La littérature rapporte que les saponines totales de l'écorce d'acacia peuvent inhiber de manière significative la formation de vaisseaux sanguins tumoraux et supprimer l'activité du VEGF. J8 est l'une de ces saponines, et l'amarrage moléculaire ainsi que la détection moléculaire in vitro ont montré que J8 peut se lier au VEGF, inhibant ainsi la prolifération des cellules endothéliales.
La recherche moderne en pharmacologie moléculaire et cellulaire suggère que la transduction du signal de l'apoptose cellulaire peut être divisée en deux voies : la voie exogène et la voie endogène (mitochondriale). La voie apoptotique exogène est médiée par des récepteurs d'apoptose tels que TNF-a, TRAIL, FAS-L. Fas-L se lie à FAS en recrutant et en connectant FADD pour initier l'apoptose cellulaire. Les mitochondries sont le centre de régulation de l'apoptose cellulaire endogène, qui peut être divisée en voies de signalisation apoptotique dépendantes et non dépendantes de la caspase en fonction des différentes voies de signalisation. La liaison de FADD à la Caspase-8 peut conduire à la dimérisation de la Caspase-8, c'est-à-dire à son activation. La Caspase-8 activée réactive la Caspase-3/9, induisant l'apoptose cellulaire. La voie de signalisation apoptotique non dépendante de la Caspase est principalement réalisée par la libération d'AIF et d'EnDOG, qui peuvent tous deux induire de grandes quantités de fragmentation de l'ADN et induire l'apoptose cellulaire. Une vérification expérimentale a permis de constater qu'après l'ajout de J8 (2,5 μ g/mL) aux cellules HUVEC, l'expression du VEGF, de JNK et d'autres protéines était significativement réduite, tandis que l'expression des protéines liées à l'apoptose p-JNK, Bax et EnDOG était significativement augmentée. Le J8 n'a pas eu d'effet significatif sur les niveaux d'expression de la Caspase-3, de la Caspase-8 et de la Caspase-9, et a pu promouvoir la phosphorylation de la JNK, une protéine kinase activée par le stress. La voie JNK activée peut réguler l'expression des gènes cibles liés à l'apoptose, induisant ainsi l'apoptose cellulaire. Bax et EnDOG sont des gènes cibles en aval de la voie JNK. Après avoir été traités avec le J8, leurs niveaux d'expression augmentent également, ce qui suggère que le J8 peut provoquer la mort cellulaire en affaiblissant l'activité de la voie VEGF/JNK. Les résultats de cette étude suggèrent que le J8 peut promouvoir l'apoptose des cellules endothéliales vasculaires en régulant la voie de signalisation JNK, fournissant des idées pour de futures recherches par d'autres chercheurs et offrant de nouveaux médicaments de recherche pour la thérapie d'inhibition de l'angiogenèse tumorale. Toutefois, cette étude présente également certaines lacunes, et la détection complète des protéines en amont et en aval de la voie de signalisation JNK est nécessaire dans les recherches futures. Les expériences cellulaires in vitro peuvent présenter certaines déviations, et les résultats expérimentaux doivent être validés par des expériences cliniques et animales.
En résumé, le J8 peut inhiber la prolifération cellulaire en agissant sur le VEGF, tandis que la régulation de la voie de signalisation JNK favorise l'apoptose des cellules endothéliales vasculaires, et le taux d'apoptose augmente de manière significative avec l'augmentation de la concentration.