Recherche sur l'inhibition du cancer du col de l'utérus par le resvératrol en induisant la mort cellulaire autophagique
Le resvératrol (RES), un composé polyphénolique non flavonoïde, est largement présent dans les raisins, les arachides et d'autres plantes, ainsi que dans la médecine traditionnelle chinoise, comme le Polygonum cuspidatum. En tant que médicament naturel à faible toxicité, il a des effets anti-inflammatoires, antioxydants, antiagrégants plaquettaires, antiathérosclérose et autres. En outre, le resvératrol est également un médicament anti-tumoral prometteur. Il a un large éventail de cibles, telles que mTOR JAK、β-amyloïde、Adenylyl cyclase、IKKβ、DNA polymérase， C'est également un activateur spécifique de SIRT1 et un inhibiteur efficace du récepteur de la prégnane X (PXR). Des études récentes ont montré que le RES a une activité inhibitrice in vitro et in vivo contre diverses tumeurs, mais les essais cliniques du RES en tant que médicament anticancéreux sont encore limités. Les résultats des tests effectués sur des modèles animaux de tumeurs indiquent que le RES joue principalement un rôle préventif dans les tumeurs gastro-intestinales. Dans le modèle animal du cancer du sein, le RES peut devenir un agent thérapeutique contre le cancer. Toutefois, cet effet bénéfique dépend de l'animal et du type de cellule. Il existe relativement peu de rapports sur le rôle des RES dans le modèle de cancer du col de l'utérus dû à l'infection par le virus HPV humain. Cette étude a principalement utilisé des cellules HeLa pour générer des tumeurs sous-cutanées chez des souris nude, et a examiné l'effet anticancéreux des RES in vivo. En détectant le rôle du RES dans l'autophagie des cellules cancéreuses du col de l'utérus, le mécanisme d'inhibition du cancer du col de l'utérus par le RES en favorisant la mort cellulaire autophagique a été exploré à la fois du point de vue in vivo et in vitro.

Le traitement du cancer du col de l'utérus est principalement chirurgical, avec une combinaison postopératoire de chimiothérapie et de radiothérapie. En raison des effets indésirables importants et de la sensibilité à la résistance de la plupart des médicaments de chimiothérapie, le traitement clinique et le pronostic du cancer du col de l'utérus sont limités. Il est donc urgent de trouver des médicaments ayant de bons effets antitumoraux et une faible toxicité pour le traitement clinique. Ces dernières années, un grand nombre d'études ont confirmé que le RES a une bonne capacité anti-tumorale et qu'il est efficace à la fois dans l'apparition et le développement des tumeurs. La recherche a montré que la protéase tissulaire L est le médiateur de la mort cellulaire autophagique et apoptotique induite par le resvératrol dans les cellules cancéreuses du col de l'utérus. Le resvératrol induit une diminution du potentiel de la membrane mitochondriale dans les lignées cellulaires du cancer du col de l'utérus, favorisant l'apoptose et augmentant la perméabilité lysosomale. Cette étude a permis de valider l'effet inhibiteur du resvératrol sur le cancer du col de l'utérus par la voie de l'autophagie grâce à des expériences in vitro et in vivo. Tout d'abord, les expériences in vivo ont confirmé que le RES inhibe de manière significative la progression du cancer du col de l'utérus. De plus, la détection au niveau des tissus a révélé que l'expression des protéines liées à l'autophagie est régulée par le RES. Par conséquent, on suppose que le mécanisme d'inhibition du cancer du col de l'utérus par le RES peut être lié à l'apparition de la mort cellulaire autophagique (MCA) induite par le RES. La mort cellulaire autophagique est le résultat d'une autophagie excessive dans les cellules. Il s'agit également d'une mort cellulaire programmée de type II, indépendante des caspases, qui diffère de l'apoptose. Sa principale caractéristique est la présence d'un grand nombre d'autophagosomes et d'autolysosomes dans le cytoplasme, où la majorité des substances du cytoplasme sont dégradées, mais le noyau reste intact. En cas de stress prolongé et d'autophagie continue, les cellules meurent en raison d'un épuisement excessif. La mort de ces cellules présente souvent des caractéristiques autophagiques, qui se manifestent principalement par la surexpression de Beclin1 et la production d'un grand nombre d'autophagosomes et d'autolysosomes dans les cellules. La protéine 1 de la membrane vacuolaire (VMP1) est une protéine autophagique reconnue, et son niveau d'expression est négativement corrélé à la malignité de la tumeur. Avec Beclin-1, elle sert de commutateur moléculaire pour activer l'autophagie. L'expression et le rôle de la VMP1 dans le cancer du col de l'utérus n'ont pas encore été rapportés.
La RT-PCR, le Western blot et les tests d'autophagie ont permis de confirmer que RES favorise l'apparition de l'ACD dans les cellules cancéreuses du col de l'utérus. Les résultats ont montré que Beclin-1, VMP1 et LC3B, situés sur la membrane interne des autophagosomes et des autolysosomes, peuvent être fortement exprimés par RES dans les cellules cancéreuses du col de l'utérus, avec un effet similaire à celui de Rapa. Rapa est un inhibiteur de la kinase mammalienne TOR (mTOR), qui se lie à FKBP12 pour inhiber l'activation de l'autophagie par mTORC1, exerçant ainsi des effets suppressifs sur les tumeurs. Un examen plus approfondi des autophagosomes et du flux autophagique a révélé que RES et Rapa peuvent tous deux favoriser la formation d'autophagosomes et d'autolysosomes. Après utilisation combinée, les autophagosomes et les autolysosomes ont augmenté, accompagnés d'une diminution de P62 et des mitochondries, mais le noyau est resté intact ; En même temps, nous avons observé que BAFA1 peut bloquer le flux autophagique des cellules cancéreuses du col de l'utérus causé par RES. La combinaison de BAFA1 et de RES a entraîné l'accumulation d'autophagosomes et de P62, accompagnée d'une diminution significative des mitochondries et d'anomalies évidentes dans le noyau par rapport aux autres groupes. Le BAFA1 est un antibiotique macrolide isolé de l'espèce Streptomyces et un inhibiteur spécifique de la H+ATPase (V-ATPase) de type vacuolaire. Le BAFA1 peut cibler les mitochondries, induire le transfert des facteurs induisant l'apoptose des mitochondries vers le noyau et promouvoir l'apoptose indépendante des caspases. En outre, BAFA1 induit la liaison de Beclin-1 à Bcl-2, ce qui inhibe davantage l'autophagie et favorise l'apoptose cellulaire. Nos résultats expérimentaux ont également confirmé ce point. En détectant le potentiel de membrane mitochondriale et le taux de positivité TUNEL, nous avons constaté que RES peut induire une diminution du potentiel de membrane mitochondriale pour promouvoir l'apoptose cellulaire, et produire des réponses différentes aux cellules cancéreuses du col de l'utérus en cas d'activation et d'inhibition de l'autophagie. Il a été rapporté dans la littérature que RES empêche la dégradation de P62 induite par Rapa, de sorte que la combinaison de Rapa et de RES peut empêcher la régulation à la hausse de l'autophagie et induire l'apoptose des cellules cancéreuses du sein. Cependant, dans cette étude, nous avons constaté que la combinaison de RES et de Rapa peut promouvoir une autophagie excessive dans les cellules cancéreuses du col de l'utérus, et la formation extensive d'autophagosomes conduit à l'apparition de l'ACD ; Lorsque le flux d'autophagie des cellules cancéreuses du col de l'utérus est bloqué, RES peut induire l'apoptose des cellules endogènes en réduisant le potentiel de membrane mitochondriale.

En outre, lorsqu'il est utilisé en combinaison avec l'activateur de l'autophagie Rapa ou l'inhibiteur de l'autophagie BAFA1, il peut jouer un rôle anticancéreux plus positif en favorisant la mort autophagique ou l'apoptose des cellules.