Étude du mécanisme d'action des polysaccharides issus de légumes de foie de chien dans l'atténuation de la fibrose hépatique basée sur la voie de signalisation LIN28A/NF - κ B
La fibrose hépatique (FH) est causée par divers stimuli nocifs, notamment les infections virales, la toxicité des médicaments, l'alcool et les réactions de cicatrisation soutenues des maladies auto-immunes du foie, ce qui entraîne des lésions hépatiques. Il s'agit d'un marqueur pathologique important des maladies chroniques du foie, d'un événement clé dans l'apparition de la cirrhose et d'une cause majeure du carcinome hépatocellulaire en phase terminale et de la cirrhose avancée. En tant que médicament clinique contre la fibrose hépatique et la cirrhose, la colchicine inhibe principalement l'activation précoce et la prolifération des cellules stellaires hépatiques, favorise l'apoptose des cellules stellaires hépatiques, interfère avec le métabolisme du collagène et a des effets thérapeutiques variables sur l'HF causée par différentes étiologies. La colchicine peut également provoquer de nombreux effets secondaires, tels que des douleurs abdominales, des nausées, une perte d'appétit, etc. Des doses élevées de colchicine peuvent également entraîner une insuffisance hépatique et rénale. C'est pourquoi de nouveaux médicaments thérapeutiques sûrs et efficaces doivent encore faire l'objet de recherches et être mis au point. Dicliptera cinensis (L.) Juss, une plante médicinale traditionnelle chinoise, a un goût sucré et une nature fraîche. Elle a pour effet de dissiper la chaleur, de refroidir le sang, de favoriser la diurèse, la désintoxication et de calmer le foie. Elle a un effet de soulagement sur divers types de modèles de lésions hépatiques tels que le CCl4, le chlorhydrate de D-galactosamine et le lipopolysaccharide. Des études antérieures ont montré que les polysaccharides végétaux du foie de chien (DCP) ont un bon effet inhibiteur sur les troubles du métabolisme des lipides du foie, principalement liés à l'atténuation des réactions inflammatoires et à l'inhibition du stress oxydatif. LIN28A est une protéine de liaison à l'ARN hautement conservée qui joue un rôle important dans l'induction des cellules souches pluripotentes, la régulation du développement, la croissance cellulaire et le métabolisme. La surexpression de LIN28A a été constatée dans diverses cellules cancéreuses telles que le cancer de l'œsophage et le cancer de l'ovaire. Des études ont montré que la suppression de LIN28A dans le foie pouvait atténuer le carcinome hépatocellulaire de la souris et prolonger efficacement la durée de vie des souris atteintes du cancer, ce qui suggère que LIN28A pourrait devenir une cible potentielle pour le traitement du carcinome hépatocellulaire ou des maladies du foie. Cependant, il n'existe actuellement aucune littérature faisant état de son association avec l'HF. Cette étude vise à explorer l'association entre LIN28A et l'insuffisance hépatique et à déterminer si le DCP peut protéger le foie en inhibant LIN28A.

La fibrose hépatique est une lésion pathologique caractérisée par l'accumulation progressive de la matrice extracellulaire (MEC) dans l'espace périhépatique, et constitue le principal problème des maladies chroniques du foie. En raison de sa cause ultime, la cirrhose, elle est devenue la principale cause de morbidité et de mortalité dans le monde, avec une estimation de 2% de la population mondiale touchée par la cirrhose. L'étude de l'effet protecteur du DCP sur le foie revêt donc une grande importance.
L'expérience a utilisé le CCl4 pour induire une fibrose du foie, ce qui a provoqué des changements pathologiques très similaires à l'HF clinique humaine. HA, LN, PCIII et IV-C sont les principaux composants de la matrice extracellulaire des cellules hépatiques. Dans la fibrose hépatique, en raison d'une synthèse accrue et d'une dégradation insuffisante de la matrice extracellulaire, le degré d'élévation de leurs niveaux indicateurs est positivement corrélé avec le degré de fibrose hépatique. Dans l'étude, les niveaux de HA, LN, PC Ⅲ, et Ⅳ - C dans les rats du groupe modèle ont augmenté de manière significative. Les résultats de la coloration H&E et de la coloration de Masson ont montré que le tissu hépatique des rats du groupe modèle présentait une dégénérescence lipidique et un dépôt de collagène significatifs, indiquant une modélisation réussie. Après l'administration de DCP, les niveaux de HA, LN, PC Ⅲ et Ⅳ dans le sérum de rat ont diminué de manière significative, et les changements pathologiques de la coloration H&E ont été atténués, ce qui indique que le DCP a un effet protecteur sur le foie et les cellules hépatiques.
NF kB est un facteur de transcription nucléaire qui régule un grand nombre de gènes jouant un rôle important dans la régulation de l'apoptose cellulaire et de l'inflammation. Lorsque le foie subit une réponse inflammatoire, NF kB est activé et libère des facteurs inflammatoires tels que le TNF-α, l'IL-6 et l'IL-1 β, ce qui entraîne une exacerbation de l'inflammation des tissus hépatiques. L'expression des enzymes COX-2 et iNOS sur le site de l'inflammation augmente également. Une réponse inflammatoire excessive sert également de marqueur de l'inflammation. Les résultats expérimentaux ont montré que la teneur relative en ARNm et les niveaux d'expression protéique de NF-kBp65/\ COX-2 et iN-OS dans le tissu hépatique des rats du groupe modèle ont augmenté de manière significative, et que la teneur relative en ARNm de TNF-α, IL-6 et IL-1 β a également augmenté de manière significative ; Par rapport au groupe modèle, la teneur relative en ARNm et les niveaux d'expression protéique de NF-2kBp65, COX-2 et iNOS dans le tissu hépatique des rats des groupes recevant des doses faibles, moyennes et élevées de DCP ont été réduits de manière significative. La teneur relative en ARNm des facteurs inflammatoires TNF-α, IL-6 et IL-1 β a également diminué à des degrés divers. Ce résultat indique que le DCP peut exercer des effets anti-inflammatoires en inhibant l'expression de la protéine NF-kBp65 et en réduisant la libération des facteurs inflammatoires en aval.
Le TGF - β 1 est une cytokine multifonctionnelle (facteur pro-fibrotique et inflammatoire) impliquée dans la réponse immunitaire et le développement de la fibrose hépatique. Le TGF-β 1 peut entraîner l'activation, la prolifération et la fibrose des cellules stellaires hépatiques (CSH). L'alpha SMA peut refléter l'état d'activation des CSH et servir de protéine marqueur de l'activation des CSH. Elle peut également être utilisée pour évaluer le degré de fibrose hépatique. Les métalloprotéinases matricielles (MMP) sont des facteurs clés dans la dégradation et le remodelage de la matrice extracellulaire. La MMP9 est l'une des MMP les plus importantes pour la dégradation de la matrice hépatique normale, ce qui peut favoriser le développement de la fibrose hépatique. L'analyse par Western blot a montré que les niveaux d'expression protéique du TGF-β 1, de l'α-SMA et de la MMP9 dans le tissu hépatique des rats du groupe modèle ont augmenté de manière significative. Par rapport au groupe modèle, les niveaux d'expression protéique du TGF-21, de l'a-SMA et de la MMP9 dans les tissus hépatiques des rats des groupes ayant reçu des doses faibles, moyennes et élevées de DCP ont été réduits de manière significative. Ce résultat indique que le DCP peut atténuer l'HF en réduisant l'expression des protéines TGF - β 1 et MMP9 dans les tissus hépatiques induits par le CCl4, ralentissant ainsi le taux de dépôt de collagène dans le foie.
Le gène LIN28A peut être reconnu grâce à son domaine de choc froid (CSD) unique et à l'appariement des domaines de cystéine, de cystéine, d'histidine et de cystéine à doigt de zinc, jouant un rôle important dans la liaison de l'ARNm spécifique à la séquence, la liaison du miNNA, le prétraitement du miNNA et le silençage des gènes régulé par le miNNA. Des études antérieures ont montré que LIN28A participe aux réponses inflammatoires par le biais de la voie de signalisation NF-kBp65, et que la réduction de l'expression de NF-kBp65 permet d'atténuer l'HF. Dans l'expérience, par rapport au groupe normal, les niveaux d'expression des protéines et les teneurs relatives en ARNm de LIN28A et NF-kBp65 dans le foie des rats du groupe modèle ont augmenté de manière significative, et les niveaux d'expression des protéines et les teneurs relatives en ARNm de LIN28A et NF-kBp65 dans les tissus hépatiques des rats des groupes ayant reçu des doses faibles, moyennes et élevées de DCP ont été réduits de manière significative et ont montré une dépendance par rapport à la concentration. Les résultats ci-dessus indiquent que le processus d'inflammation de l'HF peut être lié à l'activation de LIN28A. La combinaison avec le DCP peut inhiber l'expression de LIN28A et de NF-kBp65, ainsi que l'expression des facteurs inflammatoires en aval tels que COX-2, iNOS, TNF-α, IL-6 et IL-1 β dans NF-kBp65. On suppose que les mécanismes anti-inflammatoires et thérapeutiques du DCP pour l'HF peuvent être liés à l'inhibition de la voie de signalisation LIN28A/NF kB.
En résumé, le DCP a un effet d'amélioration significatif sur l'HF du rat, et son mécanisme pharmacologique peut être réalisé en régulant la voie de signalisation LIN28A/NF kB pour prévenir la réponse inflammatoire.