Étude sur la relation entre l'effet spectral et la teneur en polyphénols totaux et en anthraquinone totale de la rhubarbe et son activité antioxydante in vitro
En 1956, Harman a proposé la théorie du vieillissement par les radicaux libres, selon laquelle les réactions oxydatives sont la principale cause du vieillissement biologique et de diverses maladies. Les radicaux libres sont principalement générés par la fuite d'électrons des chaînes respiratoires mitochondriales ou catalysés par des réactions enzymatiques, y compris les radicaux libres de l'oxygène et d'autres radicaux libres. Certaines substances actives peuvent agir directement ou indirectement sur les radicaux libres pour inverser leurs attaques oxydatives sur les cellules du corps. Actuellement, les antioxydants synthétiques tels que le butylhydroxyanisole, l'éther hydroxyméthylique de dibutyle et le gallate de propyle présentent tous une certaine cytotoxicité. C'est pourquoi la recherche d'antioxydants efficaces et peu toxiques à partir d'aliments, d'épices et de produits naturels a également suscité beaucoup d'intérêt. La méthode DPPH et la méthode ABTS peuvent être utilisées pour la détermination d'échantillons de grande taille et la détermination de la capacité antioxydante des substances hydrophiles et lipophiles. Il est donc nécessaire de rechercher des antioxydants efficaces et peu toxiques dans les produits naturels. La rhubarbe est une plante médicinale chinoise traditionnelle, issue des Polygonacées Rheum palmatum L. et Rheum tanguticum Maxim. Les racines et rhizomes séchés de l'ex Balf. ou du Rheum officinale Baill. contiennent principalement des dérivés anthraquinoniques libres et liés, des tanins, des glycosides stilbéniques, des polyphénols et d'autres composants, qui ont des effets pharmacologiques tels que la diarrhée, les antibactériens, les hémostatiques et les antioxydants. Des études antérieures ont montré que l'émodine -8-O - β - D-glucoside et les glycosides anthraquinoniques totaux sont positivement corrélés avec l'activité antioxydante in vitro. Huit composants, dont l'acide gallique, les catéchines ou épicatéchines et le 2-O-cinnamoyl-galloyl glucose, ont une forte capacité de piégeage des radicaux libres ABTS.
La méthode traditionnelle de sélection des composés actifs implique souvent la séparation, la purification, etc., ce qui accroît indubitablement l'intensité du travail et s'avère coûteux en temps et en argent. Actuellement, la relation spectrale de l'effet a été largement utilisée dans le dépistage des ingrédients actifs de la médecine traditionnelle chinoise. Elle fait référence à l'établissement de spectres d'empreintes digitales et d'expériences pharmacologiques, en utilisant des logiciels mathématiques et la technologie informatique pour relier les "spectres" et les "effets". Cette méthode est conforme au système théorique de la médecine traditionnelle chinoise et comble les lacunes des spectres d'empreintes chimiques dans le contrôle de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise. La corrélation entre les caractéristiques qualitatives et quantitatives des spectres d'empreintes digitales de la médecine traditionnelle chinoise et les résultats de la recherche sur l'activité biologique des substances médicinales chinoises peut être utilisée pour établir une expression mathématique permettant d'évaluer la qualité des substances médicinales chinoises. Cette étude a donc établi un "spectre" à l'aide de la méthode HPLC et un "effet" antioxydant in vitro à l'aide de la méthode DPPH et de la méthode ABTS. La teneur totale en polyphénols et la teneur totale en anthraquinones de 20 lots de rhubarbe ont été déterminées pour étudier la relation entre la composition chimique de la rhubarbe et son activité antioxydante in vitro, afin d'obtenir le groupe d'ingrédients actifs antioxydants potentiels de la rhubarbe.

La teneur totale en anthraquinone des 20 lots de morceaux de décoction de rhubarbe est de 1,06 ± 0,08~4,82 ± 0,12 mg/g, et la teneur totale en polyphénols est de 4,92 ± 0,21~10,12 ± 0,11 mg/g. Les 20 lots de tranches de rhubarbe peuvent être divisés en quatre catégories, à savoir le comté de Longxi et le comté de Lintao, le comté de Dangchang et le comté de Li, le comté de Min et le comté de Zhang, et le comté de Weiyuan. Les pics 7 (8-O-glucoside d'aloe émodine), 1, 10 (rhéine), 2 et 9 (aloe émodine) ont une activité de piégeage des radicaux libres DPPH, tandis que les pics 7, 2, 9, 10, 3, 8, 12 (émodine) et 14 (éther méthylique d'émodine) ont une activité de piégeage des radicaux libres ABTS. Ces résultats concordent avec les modifications de la surface des pics de la chromatographie antioxydante in vitro, ce qui indique que l'effet antioxydant de la rhubarbe est le résultat de l'action combinée de plusieurs composants. Le pic 10 (rhéine) a montré une corrélation positive avec le piégeage des radicaux libres ABTS, tandis que le pic 7 (aloe emodin 8-O-glucoside) a montré une corrélation négative. Cela peut être dû au fait que le pic commun 10 (rhéine) peut former un grand système π - conjugué complet. Dans une solution d'éthanol, les complexes de rhéine peuvent être instables et susceptibles de former des radicaux libres intermédiaires, ce qui entraîne un taux d'inhibition élevé et une corrélation positive. Le pic 7 (aloe emodin 8-O-glucoside) est relativement stable dans une solution d'éthanol et est moins susceptible de former des intermédiaires de radicaux libres, ce qui se traduit par un taux d'inhibition plus faible et une corrélation négative. Il existe une corrélation négative entre les pics 2 et 11 en termes d'activité de piégeage des radicaux libres ABTS. Il est très probable que ces deux composés ne contiennent pas ou peu de groupes hydroxyles qui fournissent de l'hydrogène actif. L'activité de piégeage des radicaux libres ABTS dépend de la structure de la molécule du composé, et le nombre et la position des groupes hydroxyles phénoliques sont les principaux facteurs influençant son activité antioxydante. Plus il y a d'hydrogène actif, plus la capacité antioxydante est forte. Par conséquent, ce projet permettra d'améliorer l'identification et la caractérisation des pics communs inconnus mentionnés ci-dessus, afin de clarifier davantage la base pharmacologique de l'effet antioxydant en dehors du corps jaune.
Cette expérience tient compte de l'instabilité des composants polyphénoliques et choisit l'extraction par ultrasons pour éviter la perte de composants dans des conditions de température élevée. En comparant les composants présentant des changements significatifs dans la zone de pic chromatographique, une vérification ultérieure de l'antioxydant a été effectuée en préparant la séparation des monomères en phase liquide. Les techniques de LC-MS et de résonance magnétique nucléaire ont été utilisées pour identifier les produits séparés et clarifier les composants uniques qui jouent un rôle, ce qui constitue également une orientation pour les recherches futures. La corrélation entre les caractéristiques de qualité et de quantité des spectres d'empreintes digitales de la médecine traditionnelle chinoise et les résultats des recherches sur l'activité biologique des substances médicinales peut être utilisée pour établir une expression mathématique permettant d'évaluer la qualité de la médecine traditionnelle chinoise. Sur la base de l'établissement d'une carte d'empreintes digitales de la rhubarbe et de la détermination de la qualité et de la quantité d'anthraquinone totale et de polyphénols totaux dans les morceaux de décoction de rhubarbe, cet article établit la relation spectre-effet de l'activité antioxydante en dehors du corps jaune, clarifie les groupes efficaces de la rhubarbe pour piéger les radicaux libres DPPH et ABTS, et identifie les composants de la rhubarbe qui exercent des effets antioxydants, tels que l'acide gallique, l'émodine et l'éther méthylique de l'émodine. Cette étude fournit une base théorique pour le dépistage et la distinction des principes actifs des substances antioxydantes de la rhubarbe provenant de différentes régions de la rhubarbe.