Étude sur la séparation et la préparation des anthocyanes du mûrier vert par chromatographie à contre-courant à grande vitesse et leur activité antioxydante
La mûre, en tant que fruit du mûrier de la famille des mûriers, est riche en nutriments et a divers effets tels que l'anticancéreux, l'antioxydant, l'analgésique et l'anti-inflammatoire, ainsi que la beauté des cheveux noirs. Les mûres vertes, également connues sous le nom de mûres jaunes, sont des mûres immatures. En médecine traditionnelle chinoise, les mûres vertes sont plus faciles à cueillir, à transporter et à stocker que les mûres matures, et leur teneur en anthocyanes, catéchines et épicatéchines est beaucoup plus élevée que celle des mûres matures. Des études nationales et internationales ont été menées sur l'extraction et l'isolement des anthocyanes de diverses plantes telles que les pépins de raisin, les roses, les soies de maïs, les canneberges, les fèves de cacao, etc. Liu et al. ont utilisé la résine LSA-10 pour enrichir et purifier les anthocyanes de l'aubépine ; Chen Wenliang et al. ont utilisé la séparation par membrane et la filtration pour séparer les anthocyanes oligomériques des pépins de raisin, ce qui a permis d'obtenir un contenu de 65% d'anthocyanes oligomériques, mais n'ont pas obtenu de composants de séparation des monomères ; Glavnik et al. ont analysé les anthocyanes de la canne tigrée japonaise en utilisant la chromatographie sur couche mince à haute performance et ont identifié des monomères, des décamères et des anthocyanes de type B à partir de son extrait brut. Cependant, cette méthode est difficile à préparer ; Sun et al. ont utilisé la chromatographie liquide à haute performance semi-préparative pour séparer les anthocyanes des pépins de raisin, mais le prétraitement était complexe et le rendement de séparation était faible ; cet article choisit la chromatographie à contre-courant à grande vitesse (HSCCC), qui a une grande capacité de séparation, peut être utilisée pour la préparation et la séparation par lots, est facile à utiliser, et a une grande efficacité de séparation.
Les procyanidines (PC), un type de composé polyphénolique, sont largement présentes dans les plantes. Elles sont principalement composées de catéchines, d'épicatéchines (EC), d'épigallocatéchines (EGC) et de gallates d'épicatéchine (ECG), et ont une forte activité antioxydante. Ce travail vise à utiliser la chromatographie à contre-courant à haute vitesse pour séparer et purifier les anthocyanes des mûres vertes. La chromatographie liquide à haute performance (HPLC) sera utilisée pour identifier les composants chimiques de chaque composant et analyser leur pureté. En examinant la capacité de piégeage des radicaux DPPH, des radicaux ABTS+ et des radicaux hydroxyles dans chaque composant, la force de leur capacité antioxydante peut être reflétée. Ce travail élargit le champ de la transformation et de l'utilisation en profondeur des mûres, fournit une orientation pour la production industrielle d'anthocyanes dans les mûres vertes et a une certaine valeur de référence pour le développement et l'utilisation des mûres en tant que ressources médicinales.
En utilisant le mûrier vert comme matière première, l'extrait brut a été obtenu par extraction, dégraissage, élimination des impuretés et enrichissement par extraction dans les conditions expérimentales. Le système de solvants optimal pour la séparation et la purification de l'HSCCC était le n-hexane, l'acétate d'éthyle et l'eau (1:20:20, V/V/V). 200 mg d'extrait brut d'anthocyanes de mûrier vert ont été séparés en cinq composants par HSCCC, à savoir F1 (28,5 mg), F2 (10,43 mg), F3 (6,85 mg), F4 (10,65 mg) et F5 (13,65 mg). Chaque composant contenait des catéchines, de l'anthocyane B2, de l'anthocyane A1, etc. Parmi eux, F4 contient de l'épigallocatéchine gallate, d'une pureté de 95,05% ; F5 contient des catéchines d'une pureté de 73,75%. Les composants séparés ont tous une certaine activité antioxydante. En utilisant Vc comme contrôle, la capacité de piégeage du radical libre DPPH est la suivante : Vc>F5>F4>F2>F3>F1>extrait brut de mûrier vert ; capacité de piégeage du radical libre ABTS : Vc>F5>F4>F2>F3>F1> extrait brut de mûrier vert ; capacité de piégeage du radical hydroxyle : F1>F5>Vc>F4>F2>extrait brut de mûrier vert>F3. Le HSCCC a une grande capacité de préparation et ne contient pas de matériau d'emballage dans la colonne chromatographique. Dans cette expérience, l'extrait brut peut être séparé une fois pour obtenir cinq composants, et certains composants ont des substances monomères de haute pureté et une forte activité antioxydante. Le contenu de la recherche de cet article a ouvert de nouvelles idées pour la production d'anthocyanes et a fourni un soutien théorique pour l'étude de l'efficacité médicinale des anthocyanes dans les mûres vertes.