Analyse de la qualité des roses basée sur l'empreinte UPLC et la détermination de deux composants chimiques
La fleur de rose est la fleur séchée de Rosa chinensis Jacq, une plante de la famille des Rosacées. Elle est également connue sous les noms de rose rouge, neige victorieuse, invité élancé, rouge neige de combat, fleur des quatre saisons, fleur de lune précieuse et flocon de neige brillant, et est connue comme la reine des fleurs. Les fleurs de rose ont été mentionnées pour la première fois dans le Compendium of Materia Medica. Elles ont un goût sucré, une nature chaude et appartiennent au méridien du foie. Elles favorisent la circulation sanguine, régulent la menstruation, apaisent le foie et soulagent la dépression. Elles peuvent être utilisées pour traiter les troubles menstruels, la dysménorrhée et l'aménorrhée, la stase sanguine, les gonflements et les douleurs, les brûlures, les blessures dues aux chutes, les abcès et les scrofules. Il est planté dans tout le pays, principalement dans le Yunnan, le Hubei, le Sichuan et le Gansu, et peut être récolté tout au long de l'année. La composition chimique des roses est riche et variée, comprenant des flavonoïdes, des tanins, des acides phénoliques, des huiles volatiles, des pigments et des composés glycosidiques.
Ces dernières années, la recherche sur les roses a fait des progrès. Wu et al. ont utilisé la technologie UPLC-Q-Tof-MS pour étudier les différences de composants chimiques non volatils entre les roses et les rosiers. Les résultats ont montré que 43 composés ont été détectés dans les roses et 25 dans les rosiers. Toutefois, les principaux composants détectés dans les roses sont les glycosides phénoliques, les tanins et les phospholipides, et le seul composant flavonoïde détecté est le glucoside de kaempférol. D'après la littérature, les flavonoïdes sont les principaux composants actifs des fleurs de roses. Shangguan et al. ont étudié des fleurs de roses à différentes périodes de récolte, ont mesuré la teneur totale en flavonoïdes des fleurs de roses à différentes périodes de récolte et ont évalué leur activité antioxydante sur la base de leur capacité à piéger les radicaux DPPH et hydroxyle. Ils ont étudié la corrélation entre la teneur totale en flavonoïdes et l'activité antioxydante, mais n'ont pas étudié les flavonoïdes totaux des fleurs de roses de différentes origines. À l'heure actuelle, il existe de nombreuses études sur les roses, mais peu de rapports sur les normes de qualité des roses. La recherche pharmacologique moderne a révélé que l'hyperoside et l'isoquercitrine ont des effets antioxydants sur le stress et l'apoptose cellulaire, des effets anti-lésion hépatique aiguë, des effets anti-inflammatoires, des effets antidépresseurs, des effets de protection vasculaire et d'autres effets, qui correspondent à l'effet d'apaisement du foie et de soulagement de la dépression dans les roses. Cela indique que l'hyperoside et l'isoquercitrine sont l'un des principaux ingrédients actifs des roses. Dans le cadre de la détermination de la teneur en fleurs de roses dans l'édition 2020 de la pharmacopée chinoise, seule la méthode d'élution isocratique est utilisée pour limiter la quantité totale d'hyperoside et d'isoquercitrine. Dans ces conditions chromatographiques, seules les informations relatives à l'hyperoside et à l'isoquercitrine sont reflétées, mais elles ne peuvent pas refléter pleinement la qualité des fleurs de rose. Les informations relatives à d'autres composants caractéristiques tels que les flavonoïdes et les acides phénoliques ne peuvent pas être reflétées de manière exhaustive. Le spectre d'empreintes digitales peut refléter de manière exhaustive les composants chimiques contenus dans la médecine traditionnelle chinoise et est devenu un moyen important de contrôle global de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise. Sur cette base, cette expérience a établi une méthode d'empreinte UPLC pour les fleurs de rose et a mesuré simultanément la quantité totale de ses composants flavonoïdes, l'hyperoside et l'isoquercitrine, dans les conditions de l'empreinte, afin de réaliser un contrôle qualitatif et quantitatif des fleurs de rose uniquement par le biais des méthodes d'empreinte. L'analyse en grappes et l'analyse en composantes principales ont été combinées pour évaluer les fleurs de roses de différentes origines, jetant ainsi les bases de la recherche sur le contrôle de la qualité des fleurs de roses. En outre, cette méthode est également applicable aux normes de qualité des roses de la même famille et du même genre, et peut être appliquée à la recherche sur l'identification des roses et des rosiers.

 

Détermination de la méthode de préparation et des conditions chromatographiques pour l'échantillon test. Cette expérience a porté sur le solvant d'extraction, la méthode d'extraction, le temps d'extraction et le rapport solide-liquide. La méthode chromatographique a été utilisée pour maximiser la teneur en informations, atteindre la meilleure efficacité d'extraction et garantir la stabilité de la méthode. Enfin, le méthanol 50% a été utilisé comme solvant d'extraction, suivi d'un traitement aux ultrasons de 30 minutes et d'un rapport solide-liquide de 1,0g : 50mL comme méthode de préparation des échantillons. En ce qui concerne les conditions chromatographiques, différentes colonnes chromatographiques, systèmes de phase mobile, températures de colonne, débits et longueurs d'onde de détection ont été étudiés. Après comparaison, il a été constaté qu'en choisissant Agilent SB C18 comme colonne chromatographique, acétonitrile 0,2% acide phosphorique comme phase mobile, température de colonne de 35 ℃, débit de 0,4mL/min, la forme des pics et le degré de séparation des pics chromatographiques étaient bons ; La solution d'essai a été scannée à pleine longueur d'onde sous lumière UV visible à 190-400nm, et les résultats ont montré que les pics communs du spectre d'empreintes digitales à 254nm avaient des valeurs de réponse élevées et de bonnes formes de pics. En outre, l'absorption maximale de l'hyperoside et de l'isoquercitrine a été observée à 254 nm, de sorte que 254 nm a été choisi comme longueur d'onde de détection.
Analyse du spectre d'empreintes digitales et des résultats de la détermination de la teneur. Cette étude a utilisé le "Chinese Herbal Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation Software" (version 2012) pour effectuer une analyse de similarité sur les spectres d'empreintes digitales de 15 lots de fleurs de rose. Au total, 30 pics communs ont été détectés et la similarité des spectres d'empreintes digitales des 15 lots d'échantillons était supérieure à 0,95, ce qui indique une cohérence dans la composition chimique des fleurs de rose de différents lots. Au total, 10 pics caractéristiques ont été identifiés par comparaison avec des étalons de référence, dont 8 étaient des flavonoïdes. En utilisant l'analyse en grappes et l'analyse en composantes principales pour analyser les spectres d'empreintes digitales de roses de différentes origines, lorsque la distance de regroupement est de 10, les roses de différents lots peuvent être divisées en 5 catégories, ce qui indique que les roses de différentes origines présentent certaines différences. L'analyse PCA montre qu'il existe certaines différences dans la qualité des roses provenant de différentes régions. En mesurant la teneur en hyperoside et en isoquercitrine dans 15 lots de fleurs de roses, la teneur totale en hyperoside et en isoquercitrine était comprise entre 3,88 et 8,67 mg/g, ce qui était supérieur à la valeur de 0,38% de la pharmacopée. Cela indique que les 15 lots de fleurs de rose sont des matières médicinales qualifiées, avec la teneur totale la plus élevée en hyperoside et isoquercitrine dans la ville de Zhoukou, province du Henan.
La méthode d'empreinte digitale établie peut être appliquée à l'évaluation de la qualité des roses. Les spectres d'empreintes digitales de 15 lots de produits médicinaux à base de rose ont été analysés à l'aide du "Chinese Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation Software" (version 2012), et un total de 22 pics communs ont été identifiés. La similarité des spectres d'empreintes digitales de 15 lots de produits médicinaux à base de rose était supérieure à 0,95. Le rosier et la rose sont tous deux membres de la famille des Rosaceae et peuvent être distingués en termes de caractéristiques morphologiques, microscopiques et physicochimiques. Cependant, aucun rapport n'a été publié sur l'identification par empreinte digitale. L'empreinte digitale UPLC établie dans cette étude peut être utilisée pour l'identification du rosier et de la rose. La comparaison des spectres d'empreintes digitales montre que les deux espèces ont 15 composants communs, le rosier ayant 10 composants exclusifs et la rose 5 composants exclusifs.
Sur la base de l'établissement de l'empreinte UPLC des fleurs de roses, cette étude a identifié de multiples composants flavonoïdes et les a évalués à l'aide de la méthode de reconnaissance des motifs chimiques ; établir une méthode pour déterminer la teneur en hyperoside et isoquercitrine dans les roses, fournissant ainsi une base pour le contrôle de la qualité des roses. Cette méthode est simple, précise et peut servir de référence pour les recherches ultérieures sur les roses.