Effet de la myricétine sur la fonction immunitaire des souris immunodéprimées par le cyclophosphamide
Le système immunitaire peut protéger les organismes contre les infections causées par des agents pathogènes afin de maintenir l'équilibre et la santé générale. L'immunosuppression est un dysfonctionnement immunitaire temporaire ou à long terme. En raison des dommages subis par le système immunitaire, les organismes deviennent plus sensibles aux agents pathogènes et sont moins résistants. Même des agents pathogènes mineurs qui ne sont généralement pas pris au sérieux peuvent facilement provoquer des infections. Actuellement, de nombreux immunomodulateurs utilisés en pratique clinique ont des effets secondaires, tels que le lévamisole et le Bacillus subtilis. Par conséquent, il est toujours nécessaire de rechercher et de développer de nouveaux immunomodulateurs pour aider au traitement des maladies liées à la suppression du système immunitaire.

À la fin du XVIIIe siècle, un cristal jaune clair appelé myricétine (MYR) a été extrait de l'écorce du Yangmei de la famille des Myriaceae (voir figure 1). La myricétine est un composé flavonoïde que l'on trouve dans les fruits, les légumes, le thé et le vin, et qui constitue un ingrédient actif et un additif importants dans de nombreux aliments. La recherche pharmacologique moderne montre que les FMA ont des effets thérapeutiques sur une variété de maladies, y compris différents types de cancer, les maladies inflammatoires, l'athérosclérose, la maladie d'Alzheimer et les infections microbiennes pathogènes. Toutefois, la fonction de ces flavonoïdes n'est pas encore entièrement comprise, notamment en ce qui concerne la régulation du système immunitaire.

Le cyclophosphamide (CTX) est un inducteur immunosuppresseur qui a été largement utilisé comme chimiothérapie et modificateur de la maladie pour combattre certaines tumeurs solides, les lymphomes et certaines maladies auto-immunes. Le CTX peut endommager l'ADN des cellules normales, ce qui est l'une des raisons pour lesquelles il peut exercer une immunosuppression. Actuellement, il est également utilisé comme immunosuppresseur en clinique. Le FJM est également un médicament de modélisation couramment utilisé par divers laboratoires pour construire des modèles animaux idéaux de déficience immunitaire.

Par conséquent, nous avons utilisé le CTX pour injecter des souris par voie intrapéritonéale afin de réduire leur immunité et d'établir un modèle immunosuppresseur. Nous avons traité les souris modèles avec des FJM et évalué les indices de la rate et du thymus, la capacité de prolifération des lymphocytes de la rate, les niveaux d'hémolysine sérique, la capacité des cellules à former des anticorps, ainsi que les niveaux de sécrétion des cytokines sériques interleukine-2 (IL-2), interféron - γ (IFN - γ), interleukine-4 (IL-4), interleukine-6 (IL-6), afin de développer les FJM en tant que nouvel agent immunomodulateur.

 

L'immunosuppression est une manifestation d'un dysfonctionnement immunitaire dans le corps humain. Sous l'influence combinée d'un ou de plusieurs facteurs, les dommages immunitaires dans le corps humain peuvent le rendre plus sensible aux infections et entraîner des lésions liées à l'immunité. Le FJM est une substance flavonoïde que l'on trouve dans de nombreux aliments et qui a des effets tels que la protection du foie, la lutte contre les tumeurs, l'anti-inflammation, l'antithrombose, l'antioxydation, etc. De nombreux rapports ont également été publiés sur sa régulation immunitaire préclinique. La FJM peut améliorer les symptômes des lésions cutanées induites par le calcitriol chez les souris atteintes de dermatite atopique, réguler l'équilibre Th1/Th2 local et réparer les barrières cutanées endommagées. Lors d'expériences in vitro, Hou et al. ont constaté que les FJM ont un effet inhibiteur sur les facteurs inflammatoires dans les kératinocytes immortalisés humains induits par le facteur de nécrose tumorale α (TNF-α)/IFN-γ, et peuvent bloquer les voies de signalisation STAT1 et NF- κ B. MYR a augmenté de manière significative la proportion de cellules Treg et a favorisé la restauration de l'équilibre immunitaire chez les souris atteintes de colite.
Le CTX est un type d'agent alkylant doté de vastes propriétés antitumorales. Il a d'abord été qualifié de médicament anticancéreux "latent" à large spectre, sélectif vis-à-vis des cellules T et capable d'induire des dommages à l'ADN et de le réparer in vivo. En raison de sa capacité à traiter les maladies auto-immunes et à réguler l'immunité excessive, ainsi que de sa grande facilité de modélisation et de ses exigences matérielles simples, le CTX est actuellement un inducteur couramment utilisé pour les modèles animaux immunodéprimés dans les laboratoires. Cette expérience utilise la modélisation CTX pour évaluer le niveau immunitaire des FJM. Par rapport au groupe de contrôle normal, les indicateurs liés à la réponse immunitaire, tels que la rate, l'indice du thymus et le niveau de sécrétion des cytokines, ont été réduits de manière significative dans le groupe traité par Mod, ce qui indique que l'établissement du modèle de souris immunodéficientes a été couronné de succès. La fonction immunitaire de l'organisme est étroitement liée et mutuellement influencée par l'état fonctionnel des organes immunitaires tels que la rate et le thymus. Lorsque la capacité immunitaire de l'organisme est supprimée, la rate et le thymus diminuent. Dans cette étude, on a constaté que le FJM atténuait l'atrophie des organes immunitaires de la rate et du thymus chez les souris causée par le FJM, entraînant une augmentation du poids et de l'indice des organes immunitaires. Cela indique que le FJM peut renforcer le niveau immunitaire des souris dans une certaine mesure. Par rapport aux données du groupe Mod, les trois groupes traités par FJM ont augmenté de manière significative les indices de la rate et du thymus, et le degré d'augmentation de cette tendance indique une certaine dépendance de l'efficacité du traitement par rapport à la dose de médicament. Il convient de noter qu'après l'application de doses élevées de FJM, les deux valeurs étaient proches du niveau du groupe témoin. Les résultats indiquent que le FJM peut atténuer les lésions des organes immunitaires causées par le CTX et qu'il a un effet de renforcement immunitaire sur les organes immunitaires.
Le système immunitaire adaptatif, qui comprend les réponses immunitaires cellulaires et humorales, peut protéger l'organisme contre l'invasion de pathogènes spécifiques. La prolifération des lymphocytes joue un rôle crucial dans l'activation de l'immunité adaptative et est souvent utilisée pour évaluer la capacité de réponse immunitaire des animaux. La ConA et le LPS peuvent stimuler la prolifération des lymphocytes T et B, respectivement. Pour confirmer davantage l'effet immunitaire du FJM, nous avons détecté les niveaux de sécrétion des lymphocytes sous l'action de la ConA et du LPS. Les résultats expérimentaux indiquent que l'application de FJM peut atténuer de manière significative l'inhibition de la CTX sur les lymphocytes, et que les changements observés suite à l'application de différentes concentrations de FJM dépendent quelque peu du dosage du médicament. La recherche a montré qu'un déséquilibre dans le rapport entre les lymphocytes CD4+T et les lymphocytes CD8+T a un impact sur la fonction immunitaire. L'analyse par cytométrie de flux a révélé que les sous-groupes CD4+ et CD8+ des souris traitées par CTX étaient significativement réduits et que le rapport CD4+/CD8+ diminuait (P<0,05 ou P<0,01), ce qui indique que les souris se trouvaient dans un état d'immunosuppression. Par rapport au groupe du modèle Mod, chaque groupe de dose de FJM peut augmenter le nombre de sous-ensembles de cellules T CD4+ et CD8+, ainsi que le rapport sous-ensemble CD4+/CD8+ (P<0,05 ou P<0,01), le groupe à forte dose montrant un effet dose-dépendant significatif. Le FJM peut être impliqué dans l'influence des niveaux de cellules CD4+ et CD8+, dans la régulation de leur déséquilibre immunitaire et dans leur rétablissement à des niveaux normaux. Par conséquent, cela indique que le FJM peut renforcer l'immunité cellulaire et humorale, ce qui est cohérent avec la conclusion tirée de ses effets sur les indices de la rate et du thymus.
Les variations de l'hémolysine sérique peuvent refléter la quantité d'anticorps produits dans l'organisme au niveau moléculaire, et une augmentation de l'hémolysine sérique peut renforcer la réponse spécifique des anticorps aux antigènes cellulaires dépendants du thymus. Sur la base des résultats de l'expérience de contrôle, nous avons constaté que, par rapport au groupe témoin, la teneur en hémolysine dans le groupe de souris immunosuppressives induites par CTX a diminué, de même que le nombre de cellules productrices d'anticorps. Différentes doses de FJM ont augmenté de manière significative la formation d'hémolysine sérique chez les souris immunodépressives induites par CTX, et ont également eu un certain effet d'amélioration sur le nombre de cellules produisant des anticorps spécifiques, ce qui indique que le FJM peut améliorer la fonction immunitaire cellulaire des souris. Afin d'étudier les mécanismes associés à cette amélioration, nous avons mené une étude in vivo plus approfondie sur les effets du FJM sur les lymphocytes et les facteurs inflammatoires.
Les cytokines, l'un des éléments du système immunitaire, servent de ponts et de liens entre les cellules dans les réponses immunitaires, jouant un rôle crucial dans la coordination des réponses immunitaires et inflammatoires. Par exemple, l'augmentation de la sécrétion de la cytokine anti-inflammatoire IL-4 par les sous-ensembles de cellules TH2 peut contrôler l'inflammation et améliorer les symptômes de la rhinite allergique. L'IFN - γ joue un rôle important dans la régulation des réponses immunitaires, en induisant la génération de cellules T, en activant les macrophages et en assurant la régulation croisée des cellules TH1 et TH2. L'IL-2 peut réguler les Treg pour exercer des effets immunosuppresseurs ou immunostimulants, jouant ainsi un rôle crucial dans l'homéostasie immunitaire. L'IL-4 a de multiples effets immunomodulateurs, à la fois stimulants et inhibiteurs, et peut stimuler la prolifération des cellules B. Elle est un facteur important dans la promotion de l'hémoglobine. C'est un facteur important dans la promotion du développement et de la différenciation des cellules hématopoïétiques, ainsi que dans la formation des immunoglobulines IgG et IgE. L'expression cellulaire spécifique de l'IL-6 peut entraîner diverses réactions biologiques, jouant un rôle médiateur important dans les réponses inflammatoires aiguës, et peut inhiber les réponses des cellules CD8+T effectrices en réduisant la production d'IFN-γ. Les résultats expérimentaux ont montré que les niveaux d'expression des cytokines IL-2 et IL-4, IL-6 et IFN-γ chez les souris injectées avec CTX présentaient une tendance significative à la baisse par rapport au groupe témoin, et que les différences entre les données des trois autres groupes, à l'exception de l'IL-4, étaient extrêmement significatives. Le FJM peut inverser ce phénomène en ramenant de manière dose-dépendante les niveaux de sécrétion des cytokines IL-2 et IL-4, IL-6 et IFN - γ proches de la plage normale du groupe témoin, et a un bon effet régulateur sur la déficience immunitaire induite par le CTX chez les souris. Parmi eux, les concentrations d'IL-6 et de TNF-γ dans le groupe ayant reçu la dose élevée de médicament ont été rétablies aux niveaux du groupe témoin. Ce résultat indique que le FJM rétablit l'équilibre du système immunitaire de l'organisme et améliore les symptômes du déficit immunitaire en régulant les interactions entre les cellules immunitaires et les cytokines. Dans l'ensemble, le FJM a un effet plus important sur la production de cytokines IFN - γ sécrétées par les sous-ensembles de cellules Th1 que sur les cytokines IL-4 et IL-6 sécrétées par les sous-ensembles de cellules Th2, ce qui indique que le FJM améliore principalement la fonction immunitaire des souris modèles immunodéprimées en renforçant la fonction immunitaire cellulaire.
En résumé, l'impact de la FJM sur le système immunitaire est complexe, car elle peut induire des changements dans l'expression de divers lymphocytes et facteurs inflammatoires, et réguler les interactions entre ces facteurs. Sur la base des résultats de cette étude, nous concluons que la FJM joue un rôle positif dans la fonction immunitaire, en particulier dans des conditions de forte dose. Nous avons démontré que le FJM peut inverser la suppression immunitaire induite par le CTX. Par conséquent, nos résultats expérimentaux fournissent des preuves de l'effet de renforcement immunitaire du FJM et une base scientifique pour son développement ultérieur et ses applications cliniques potentielles. Dans nos recherches futures, nous espérons continuer à explorer l'impact du FJM sur certaines maladies causées par une faible immunité ou des troubles immunitaires.