Étude de l'effet anti-inflammatoire et du mécanisme de Sophora alopecuroides sur l'inflammation induite par le lipopolysaccharide dans les cellules RAW264.7
L'inflammation est une réponse défensive qui se produit lorsque l'organisme est attaqué ou infecté par des stimuli internes et externes nocifs, tels que des agents pathogènes. Elle déclenche une réponse immunitaire pour protéger l'organisme. Lorsque le système immunitaire est activé de manière excessive ou continue, il peut entraîner une série de maladies liées à l'inflammation, telles que la polyarthrite rhumatoïde, les maladies inflammatoires de l'intestin, les tumeurs, etc. Les macrophages jouent un rôle central dans le déclenchement, le maintien et l'atténuation des réponses inflammatoires, et leur accumulation et leur activation soutenues sont révélatrices d'une inflammation chronique. Le lipopolysaccharide (LPS) peut activer les macrophages et favoriser leur sécrétion de médiateurs inflammatoires tels que le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α), l'interleukine-1 β (IL-1 β), l'interleukine-6 (IL-6), l'oxyde nitrique (NO), etc. La libération excessive de ces médiateurs inflammatoires peut entraîner des lésions organiques et des maladies chroniques. NF - κ B joue un rôle important dans la régulation de processus tels que l'apoptose cellulaire et la réponse inflammatoire, et constitue une cible importante pour la thérapie anti-inflammatoire.

Sophora alopecuroides L, également connu sous le nom de Sophora alopecuroides, est une plante appartenant à la famille des Leguminosae du genre Sophora. Elle est répandue dans diverses provinces du nord-ouest de la Chine et dans les pays d'Asie centrale, et a pour fonctions d'éliminer la chaleur et de désintoxiquer, de soulager la douleur et l'inflammation, d'assécher l'humidité et d'arrêter la dysenterie. Il s'agit d'une plante médicinale importante dans la région nord-ouest de la Chine. Sophora alopecuroides contient principalement des alcaloïdes, des flavonoïdes, des acides organiques, des polysaccharides, des huiles volatiles, des stéroïdes, des phénols et d'autres composants. Les alcaloïdes ont des effets anti-inflammatoires, anticancéreux, antibactériens et régulateurs de l'immunité, les flavonoïdes ont des effets anti-inflammatoires, antiviraux et antioxydants, et les polysaccharides ont des fonctions régulatrices de l'immunité et antitumorales, ce qui peut améliorer efficacement l'immunité du corps et jouer un rôle important dans la lutte contre les tumeurs et la promotion de l'immunité. Les études susmentionnées sont toutes basées sur un certain groupe de composition chimique de Sophora alopecuroides, et la médecine traditionnelle chinoise présente les caractéristiques d'effets combinés multi-composants, multi-cibles et multi-voies, ce qui permet d'obtenir un effet thérapeutique identique, voire meilleur, avec des doses de médicaments plus faibles, y compris une compatibilité efficace entre les parties et les ingrédients. Il est donc nécessaire d'étudier si différents groupes de composition chimique de Sophora alopecuroides peuvent améliorer l'efficacité. Cet article utilise des cellules RAW 264.7 induites par le LPS comme modèle inflammatoire pour le dépistage des médicaments anti-inflammatoires dans Sophora alopecuroides, et explore l'extrait à décoction d'eau conventionnel (WDE), l'extrait ultrasonique d'eau (WUE), l'extrait à reflux d'éthanol 75% (ERE), 75% ethanol ultrasonic extract (EUE), ainsi que l'extrait total d'alcaloïdes (TAE), l'extrait total de flavonoïdes (TFE), l'extrait total de polysaccharides (TPE) de Sophora alopecuroides et leurs neuf combinaisons de différentes parties efficaces. L'effet anti-inflammatoire et le mécanisme d'action de (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2).

Les macrophages participent à la réponse immunitaire de l'organisme. Lorsqu'ils sont stimulés par les LPS, les macrophages déclenchent des voies de signalisation (telles que NF - κ B) pour promouvoir la production de médiateurs pro-inflammatoires tels que le NO, le TNF - α, l'IL-1 β, l'IL-6, etc. Une production excessive de NO est étroitement liée à l'apparition d'une inflammation. Une augmentation des taux de TNF-α et d'IL-6 peut favoriser la sécrétion d'autres cytokines pro-inflammatoires par les cellules. L'IL-6 est une cytokine pro-inflammatoire importante qui peut induire l'activation des cellules B et T et participer à la réponse immunitaire de l'organisme. L'IL-1 β est régulée à la hausse en cas d'inflammation aiguë ou chronique. Les résultats de cette étude ont montré qu'après un traitement au LPS de RAW 264.7, la libération de NO, TNF-α, IL-6 et IL-1 β augmentait de manière significative, ce qui indique l'établissement réussi d'un modèle d'inflammation in vitro. Sophora alopecuroides WDE, WUE, EUE, ERE et leur TAE, TFE, TPE peuvent tous inhiber la production de NO, TNF - α, IL-6, et IL-1 β dans les cellules RAW 264.7 stimulées par LPS, parmi lesquels TFE, EUE, ERE L'effet inhibiteur de TAE est plus significatif Après avoir mélangé TFE et TPE dans différents rapports, il a été constaté qu'ils pouvaient inhiber la libération de TNF - α à des degrés divers. À l'exception des combinaisons 1:1:1 et 1:1:2, les sept autres combinaisons avaient de meilleurs effets inhibiteurs sur la libération de TNF-α que lorsqu'elles agissaient seules. La combinaison 2:1:2 a eu le meilleur effet inhibiteur, démontrant un effet synergique significatif.

Pour explorer le mécanisme moléculaire de l'activité anti-inflammatoire de Sophora alopecuroides, cette étude a utilisé le WB pour détecter l'expression des protéines clés IkB α, NF - κ B p65, et p-IkB α, p-NF - κ B p65 dans la voie de signalisation NF - κ B. NF - κ B est un facteur de régulation clé dans l'inflammation, qui peut réguler la transcription de nombreux médiateurs inflammatoires clés, tels que IL-1 β, IL-6, TNF - α, etc. Le LPS se lie aux récepteurs TLR4 pour activer la voie de signalisation NF - κ B, qui joue un rôle important dans la libération des médiateurs inflammatoires par les macrophages. Lorsque les cellules sont stimulées, la protéine inhibitrice IkBa qui se lie à NF - κ B est rapidement phosphorylée en p-IkB α sous l'action de l'IkB α kinase, libérant la p-NF - κ B p65 active dans le noyau, favorisant ainsi la synthèse et la sécrétion de facteurs liés à l'inflammation. Ces dernières années, les effets anti-inflammatoires des alcaloïdes, des flavonoïdes et des polysaccharides ont fait l'objet de nombreux rapports. Par exemple, des études ont montré que les alcaloïdes de Sophora flavescens peuvent atténuer l'inflammation induite par le LPS dans les macrophages RAW 264.7 en inhibant la phosphorylation de l'IkB α et la translocation nucléaire de p-NF - κ B p65. Zhao et al. ont découvert que les alcaloïdes totaux de Sophora flavescens pouvaient atténuer la colite induite par le sulfate de dextran en inhibant l'activation de NF - κ B. Des études ont montré que les flavonoïdes de la médecine traditionnelle chinoise peuvent réduire les niveaux de phosphorylation des protéines IkB α et p65 dans la voie de signalisation NF - κ B pour exercer des effets anti-inflammatoires. Li et al. ont découvert que les flavonoïdes totaux de Sophora flavescens peuvent exercer des effets immunomodulateurs sur la colite ulcéreuse en inhibant l'activation de la voie de signalisation JAK2/STAT3, et que les polysaccharides de Cistanche peuvent inhiber l'activation de la voie de signalisation JAK2/STAT3. L'activation de NF - κ B MAPK et de STAT3 est utilisée pour inhiber l'inflammation induite par les LPS dans les macrophages RAW 264.7, tandis que l'étude de Qu et al. a montré que les polysaccharides de Pinus koraiensis peuvent inhiber l'inflammation induite par les LPS en régulant la voie de signalisation Nrf2/HO-1. À l'heure actuelle, les effets de la combinaison d'alcaloïdes, de flavonoïdes et de polysaccharides sur l'inflammation ont fait l'objet de relativement peu de recherches. Cette étude a révélé que la combinaison de TAE, TFE et TPE dans Sophora alopecuroides a permis de réduire de manière significative la phosphorylation des protéines NF - κ B p65 et IkB α et d'inhiber l'expression des protéines p-IkB α et p-NF - κ B p65. Cela indique que la combinaison de la biomasse totale, des flavonoïdes totaux et des polysaccharides totaux de Sophora alopecuroides peut atténuer l'inflammation induite par le LPS dans les macrophages RAW 264.7 en inhibant l'activation de la voie NF - κ B.

En résumé, cette étude a principalement comparé l'activité anti-inflammatoire des WDE, WUE, EUE, ERE conventionnels et de leurs différentes parties efficaces TAE, TFE, TPE et de neuf combinaisons (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2) de Sophora alopecuroides in vitro. Il a été constaté que la combinaison de TAE, TFE, TPE (2:1:2) avait le meilleur effet inhibiteur sur l'inflammation induite par le LPS dans les cellules RAW 264.7, et qu'elle exerçait des effets anti-inflammatoires in vitro en inhibant l'activation de la voie inflammatoire NF - κ B. Cette expérience n'a fait qu'achever le criblage des médicaments anti-inflammatoires au niveau cellulaire et n'a fait que cribler les combinaisons de compatibilité des différentes parties pharmacologiques de Sophora alopecuroides. Cependant, il reste des problèmes tels que la composition chimique complexe, les composants pharmacologiques peu clairs et la base matérielle de leurs effets, qui nécessitent des recherches plus approfondies.