Identification de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées sur la base de la séquence ITS2 et de l'empreinte HPLC
Le Ficus pandurata Hance, également connu sous le nom d'arbre à lait ou de graine de lait, est une plante du genre Ficus de la famille des Moraceae. Elle est principalement répandue dans les provinces de Guangdong, Guangxi, Jiangxi, Hainan, Fujian, Hunan, Hubei, Jiangxi, Anhui, Zhejiang et dans d'autres régions. Selon le "Dictionary of Traditional Chinese Medicine", le "Fujian Medicinal Records" et le "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing", la racine et les feuilles du Ficus microcarpa sont utilisées comme médicaments. Le Ficus microcarpa a un caractère doux, un goût sucré et légèrement frais, et n'est pas toxique. Il a pour effet de dissiper la chaleur, de revigorer la rate, de stimuler l'appétit, de nourrir le qi et de générer des fluides, et de dissiper l'humidité et la stagnation. Il est utilisé pour dissiper le vent et l'humidité, désintoxiquer, traiter la malaria et favoriser la lactation. Par exemple, le "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" indique que des quantités modérées de racines de Ficus microcarpa et de Malan peuvent être utilisées pour traiter la jaunisse lorsqu'elles sont prises par voie orale dans une décoction d'eau claire ; une quantité appropriée de racines de banian, de racines de Brahma, de Stephania tetrandra, de racines d'Acanthopanax senticosus et de tiges d'absinthe peut être utilisée pour traiter les douleurs de la colonne lombaire avec le mélange de Baijiu et d'eau du même volume. Dans le Guangdong, Ficus microcarpa a une longue histoire d'alimentation et de médecine, et une base de masse profonde, qui est devenue une partie importante du régime tonique caractéristique local et des matières premières de la médecine diététique. La recherche moderne a montré que Ficus microcarpa contient des ingrédients actifs tels que des triterpénoïdes, des flavonoïdes, des coumarines et des acides phénoliques. Parmi eux, la bergamote lactone a diverses activités pharmacologiques telles que la lutte contre les tumeurs, la régulation de la glycémie, l'amélioration de l'insomnie, la prévention et le traitement de l'ostéoporose, la lutte contre le vieillissement, les effets anti-inflammatoires et antiallergiques ; le psoralène a des effets pharmacologiques tels que la lutte contre l'ostéoporose, la neuroprotection, la lutte contre les tumeurs, l'effet œstrogène, les effets anti-inflammatoires, etc.
À l'heure actuelle, il existe sur le marché trois principaux types de produits mélangés de plantes médicinales Ficus microcarpa : Ficus microcarpa var. holophylla, Ficus microcarpa var. angustifolia et Ficus microcarpa var. hirta. Le Quanyuan Qinye Ficus et le Tiaoye Ficus sont des variantes du Qinye Ficus, avec des formes de feuilles transitoires entre les trois. En outre, Ficus microcarpa et Ficus microcarpa utilisent leurs racines comme médicaments et ont un arôme laiteux. Elles sont souvent vendues sur le marché sous le nom commercial de "Milk Tree Roots", ce qui entraîne une qualité inégale des matériaux médicinaux. À l'heure actuelle, la recherche moderne sur Ficus microcarpa se concentre principalement sur la pharmacognosie, la composition chimique et l'activité pharmacologique, et il n'existe aucun rapport sur les normes de qualité de Ficus microcarpa. L'identification par code-barres ADN est une méthode d'identification par biologie moléculaire qui utilise une séquence d'ADN standard et relativement courte pour l'identification des espèces. Cette méthode est très importante pour promouvoir le développement et l'utilisation des nouvelles ressources de la médecine chinoise, pallier la pénurie de talents en matière d'identification de la médecine chinoise, gérer la circulation des marchés de la médecine chinoise et résoudre les problèmes cachés des semences que la morphologie a du mal à surmonter. L'empreinte HPLC est une méthode fiable pour identifier l'authenticité, évaluer la qualité, la cohérence et la stabilité des composants chimiques de la médecine chinoise traditionnelle obtenus par des techniques chromatographiques basées sur la compréhension de l'action globale des groupes de substances. Dans cette expérience, les séquences ITS2 ont été utilisées pour l'identification moléculaire de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées. Des spectres d'empreinte HPLC ont été établis pour déterminer les différences de teneur en psoralène et en lactone de bergamote, et pour identifier Ficus microcarpa et ses espèces apparentées de différentes origines. Cette étude fournit une base scientifique pour le contrôle de la qualité et l'évaluation des matériaux médicinaux de Ficus microcarpa.

L'expérience a analysé la séquence ITS2, la distance génétique K2P, l'analyse de regroupement d'arbres NJ et la structure secondaire de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées. L'analyse de regroupement d'arbres NJ et la structure secondaire permettent toutes deux de distinguer efficacement Ficus microcarpa et les espèces qui lui sont apparentées. Cependant, la distance génétique à l'intérieur des espèces K2P et entre elles présente certaines limites dans l'identification de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées, et nécessite la combinaison de l'analyse de regroupement d'arbres NJ et de la structure secondaire pour l'identification.

L'expérience a étudié les conditions chromatographiques telles que les différents solvants d'extraction, les longueurs d'onde de détection, les températures de colonne, les systèmes de phase mobile et les colonnes chromatographiques. Les résultats ont montré qu'en utilisant l'extraction à l'éthanol 95%, la colonne chromatographique XBridge Peptide BEH C18 (5 μ m, 4,6 mm × 250 mm), la longueur d'onde de détection 330 nm, la température de la colonne 30 ℃, le débit 1,0 ml/min et la phase mobile méthanol-solution tampon phosphate pH8, les formes des pics et le degré de séparation de chaque spectre de couleur étaient bons. Nous avons établi les spectres d'empreinte CLHP de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées, comblant ainsi une lacune dans l'étude des spectres caractéristiques CLHP de Ficus microcarpa. Les spectres d'empreintes digitales de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées présentent des différences significatives dans le nombre de pics caractéristiques et le temps de rétention relatif, ce qui permet de distinguer intuitivement Ficus microcarpa de ses espèces apparentées et peut être appliqué à l'évaluation de la qualité de Ficus microcarpa. Il y a au total 10 pics chromatographiques dans Ficus microcarpa de différentes origines, dont la plupart n'ont pas été détectés dans Ficus microcarpa et Ficus microcarpa. La similarité entre les espèces étroitement apparentées et Ficus microcarpa est inférieure à 0,807 ; il existe une différence significative dans la teneur en psoralène et en lactone de bergamote entre Ficus microcarpa et ses espèces apparentées. La teneur de Ficus microcarpa et de Ficus microcarpa est significativement inférieure à celle de Ficus microcarpa, ce qui indique une différence de qualité entre Ficus microcarpa et ses espèces apparentées. Cela a une valeur d'orientation pratique importante pour l'utilisation de la teneur en psoralène et en lactone de bergamote en tant qu'indicateurs de contrôle de la qualité de Ficus microcarpa. Par conséquent, les spectres d'empreintes digitales, la similarité et la détermination de la teneur peuvent distinguer objectivement et précisément l'authenticité des matières médicinales de Ficus microcarpa, ce qui peut être utilisé efficacement pour le contrôle de la qualité et l'identification de l'authenticité des matières médicinales de Ficus microcarpa.

En résumé, le code-barres ADN et l'empreinte HPLC de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées ont été établis. La méthode est simple, fiable, stable et présente une bonne répétabilité. Elle peut être utilisée pour la recherche sur les empreintes digitales et l'identification de l'authenticité de Ficus microcarpa et de ses espèces apparentées. En même temps, elle fournit une base scientifique pour l'amélioration de la qualité de Ficus microcarpa.
Dans le réseau PPI, 42 cibles importantes ont été sélectionnées sur la base du classement par degré, principalement divisées en 5 catégories : les protéines tyrosine phosphatases (PTPN1, PTPN2, PTPN6, PTPN11, etc.), les phosphatidylinositol 3-kinases (PIK3R1, PIK3CB, PIK3CA, etc.), les protéines kinases activées par les mitogènes (MAPK1, MAPK3, MAPK8, MAPK14, etc.), les kinases dépendantes des cyclines (CDK1, CDK2, CDK4, etc.) et d'autres cibles importantes (VEGFA, HSP90AA1, LCK, etc.). Ces cibles importantes peuvent servir de référence pour la thérapie ciblée de la RCH.