Caracterización de Componentes Activos Inhibidores de Lipasa en Hojas de Gougu por el Método de Cromatografía en Capa Fina Bioautografía MSn
Ilex cornuta Lindl Ex Paxt es una planta del género Ilex de la familia Ilex, ampliamente distribuida en China. Las hojas secas de Gougu, una medicina tradicional china, se han incluido en muchas monografías sobre hierbas desde la dinastía Tang y tienen una historia medicinal de más de mil años. Según la Farmacopea de la República Popular China (edición de 2020, volumen 1), el sabor de las hojas de Ligusticum barbarum es amargo, de naturaleza fresca. Pertenece a los meridianos del hígado y el riñón y tiene las funciones de eliminar el calor y nutrir el yin, beneficiar a los riñones y calmar el hígado. Se utiliza para la hemoptisis tuberculosa, la vaporización ósea y los sofocos, mareos y vértigos, etc. En la cultura popular, debido al efecto despejador del calor de las hojas de Gougu, sus hojas tiernas se preparan y consumen como té Kuding. La investigación moderna ha demostrado que las hojas de Cornus officinalis son ricas en triterpenoides y sus saponinas, que son sus principales ingredientes activos. Además, hay varios componentes como flavonoides, polifenoles, esteroles, etc., que tienen diversas actividades como la reducción de los lípidos sanguíneos, la lucha contra la isquemia miocárdica, la antioxidación, la inmunosupresión y la lucha contra la fertilidad. Debido a la insignificante eficacia y a los importantes efectos secundarios de la mayoría de los medicamentos para adelgazar, la actividad hipolipemiante de las hojas de Ligusticum barbarum ha atraído gradualmente la atención de la gente. Los investigadores nacionales e internacionales han llevado a cabo numerosas investigaciones sobre los componentes químicos de las hojas de Ligusticum barbarum, pero para buscar los principios activos hipolipemiantes se han utilizado los métodos tradicionales de separación química, que presentan inconvenientes como la lentitud, la complejidad de la operación y la pérdida de principios activos.
La bioluminiscencia por cromatografía en capa fina es una técnica de cribado de fármacos que integra la identificación, la separación y la determinación de la actividad. En los últimos 20 años, se ha utilizado ampliamente para el cribado rápido de antioxidantes, inhibidores de la colinesterasa e inhibidores de la lipasa. Al mismo tiempo, este método se caracteriza por su sencillo funcionamiento y su bajo coste experimental. La tecnología de ionización directa se refiere a una novedosa técnica de ionización utilizada para el análisis rápido por espectrometría de masas de muestras de matrices complejas sin pretratamiento a presión atmosférica. La cromatografía en capa fina acoplada a la espectrometría de masas multietapa de ionización por pulverización inducida por campo electrostático (TLC-EFISI-MSn) puede realizar la caracterización estructural in situ de componentes activos en la autorradiografía en capa fina de hojas de Lycium barbarum. Esta tecnología de ionización directa puede extraer compuestos en placas de cromatografía de capa fina a través de la extracción de microgotas sin gas adicional y dispositivos de calentamiento, e ionizarlos directamente bajo la acción de un campo electrostático antes de entrar en el espectrómetro de masas para su análisis; Es un método de ionización que es fácil de desmontar, operar y detectar rápidamente. Por lo tanto, este artículo adopta el método de cromatografía en capa fina y espectrometría de masas con autorradiografía biológica para identificar rápidamente los componentes con actividad hipolipemiante de las hojas de Ligustrum lucidum, proporcionando una base para aclarar la sustancia base del efecto hipolipemiante de las hojas de Ligustrum lucidum.

En este artículo se desarrolló primero la muestra de ensayo de las hojas de Ligustrum lucidum en dos sistemas: cloroformo, acetato de etilo, metanol y agua (1:3:1:0,3, V/V/V/V) y acetato de etilo, metanol y agua (6:2:1, V/V/V) para obtener más manchas. Mediante el examen de bioluminiscencia de inhibición de lipasa por cromatografía en capa fina, se seleccionaron 10 manchas con actividad de inhibición de lipasa en hojas de Ligustrum lucidum y, a continuación, se utilizó la tecnología TLC EFISI MSn para el análisis estructural rápido de las manchas mencionadas. Basándose en datos de espectrometría de masas multietapa combinados con informes de la literatura, se especularon posibles vías de fragmentación de diferentes compuestos, y se caracterizaron preliminarmente 15 posibles estructuras, todas las cuales son saponinas triterpenoides, incluyendo 9 triterpenoides arbutina, 1 triterpenoide oleanano, y 5 triterpenoides de 18,19 anillos. Tras la comparación con la sustancia de referencia, se validaron 12 compuestos. Este método puede detectar y caracterizar rápidamente los componentes con actividad inhibidora de la lipasa de las hojas de Cornus officinalis, proporcionando una base para aclarar la sustancia base de la eficacia hipolipemiante de las hojas de Cornus officinalis.