Determinación simultánea de cinco componentes flavonoides en diferentes tipos de ramas de morera mediante el método UPLC
Las ramas de morera, también conocidas como tiras de morera, son las plantas Morus alba L. y Morus alba M. de la familia de las moreras Australis Poir. y Huasan M Ramas tiernas secas de cathayana Hemsl. Las ramas de morera tienen un carácter plano, un sabor ligeramente amargo y pertenecen al meridiano del hígado. Son una hierba medicinal tradicional china que tiene los efectos de disipar el viento y la humedad, promover la salud de las articulaciones y se utiliza principalmente para tratar síntomas como el reumatismo, la parálisis y el entumecimiento y dolor articular en brazos y hombros. Los libros antiguos han registrado que las ramas de morera pueden "tratar la boca seca, nutrir los fluidos corporales y el agua de los riñones", y tienen efectos terapéuticos de secado de la humedad, fomento de la circulación sanguínea y de la circulación de los meridianos. Tienen una larga historia de aplicación clínica en la medicina tradicional china. Las ramas de morera contienen diversos principios activos eficaces, como flavonoides, alcaloides, aminoácidos, etc. Según la investigación farmacológica moderna, las ramas de morera tienen múltiples efectos, como antiinflamatorios, antioxidantes, hipoglucemiantes, hipolipemiantes, hipotensores, antibacterianos, antivirales y antitumorales. Los flavonoides de las ramas de morera tienen buenos efectos en la reducción de los lípidos sanguíneos y del azúcar en sangre, así como propiedades antibacterianas y antioxidantes.
En este estudio se utilizaron como muestras experimentales 18 lotes de ramas de morera procedentes de 9 zonas de producción y 3 tipos diferentes de Chongqing. Se realizó una extracción ultrasónica, y se utilizó cromatografía líquida de ultra rendimiento (UPLC) para determinar y analizar el contenido de cinco flavonoides, incluyendo rutina, pigmento de morera, kaempferol, isoquercitrina, y quercetina de morera, en estos 18 lotes de ramas de morera de 9 áreas de producción diferentes y 3 tipos diferentes. Se compararon las diferencias en el contenido de flavonoides entre los 18 lotes de ramas de morera, proporcionando datos de apoyo y referencia para la posterior investigación y desarrollo de ramas de morera.

Selección de las condiciones de extracción. Este estudio investigó el método de extracción por reflujo térmico con metanol, el método de extracción por ultrasonidos con metanol, el método de extracción por reflujo térmico con etanol y el método de extracción por ultrasonidos con etanol. Se observó que el uso de metanol como disolvente de extracción daba mejores resultados. Los efectos de extracción del método de extracción por reflujo térmico y del método de extracción por ultrasonidos no fueron significativamente diferentes. Teniendo en cuenta el funcionamiento sencillo del método de extracción por ultrasonidos, en este estudio se seleccionó el método de extracción por ultrasonidos con metanol. Este estudio consideró simultáneamente los efectos de la temperatura de extracción, el tiempo de extracción y los tiempos de extracción en la eficacia de la extracción. Los resultados experimentales finales mostraron que el efecto global de extracción fue óptimo cuando la temperatura de extracción fue de 25 ℃, el tiempo de extracción fue de 30 minutos, y los tiempos de extracción fueron de 2 veces. Por lo tanto, las condiciones finales de extracción de este experimento se determinaron utilizando solución de metanol y método de extracción ultrasónica, con temperatura de extracción de 25 ℃, tiempo de extracción de 30 minutos, y tiempos de extracción de 2 veces.
Selección de la fase móvil. En este estudio se investigaron las diferencias en los efectos de cuatro composiciones de fase móvil (solución de ácido fórmico 0,2%+metanol, solución de ácido fórmico 0,2%+acetonitrilo, solución de ácido fosfórico 0,2%+metanol, solución de ácido fosfórico 0,2%+acetonitrilo) sobre la formación de picos. Los resultados experimentales mostraron que cuando la fase móvil era 0,2% solución de ácido fórmico+metanol y 0,2% solución de ácido fosfórico+metanol, el tiempo de formación del pico era más tardío y el tiempo de análisis más largo, especialmente para la quercetina. Cuando la fase móvil fue metanol, el tiempo de formación del pico fue más tardío, lo que afectó al tiempo total de análisis. Cuando la fase móvil era 0,2% solución de ácido fosfórico+acetonitrilo, el tiempo de análisis era más corto, la forma del pico y el efecto de separación eran mejores. Por lo tanto, en este estudio se eligió como fase móvil la solución de ácido fosfórico 0,2%+acetonitrilo. Al mismo tiempo, también se investigó la influencia de diferentes temperaturas de la columna (30, 35, 40 ℃) en los resultados experimentales. Los resultados experimentales mostraron que el efecto de separación era óptimo cuando la temperatura de la columna era de 35 ℃.
El contenido de flavonoides en las ramas de morera. Los resultados de la investigación mostraron que la rutina, isoquercitrina, pigmento de morera, kaempferol y kaempferol se detectaron en los 18 lotes de muestras de ramas de morera, pero hubo diferencias significativas en su contenido. El contenido medio de kaempferol con el contenido más alto fue de 135,154 μ g/g, y el contenido medio de kaempferol con el contenido más bajo fue de 6,929 μ g/g. Esto sugiere que las ramas de morera (especialmente Huasang en Huangjueya Town, Distrito de Nan'an) se puede utilizar como material de partida para la extracción de kaempferol y su posterior desarrollo y utilización. El contenido de estos cinco flavonoides en las ramas de morera está influido por diversos factores, como la época de recolección de las ramas, el tipo de morera, las partes de las ramas (anterior, media y posterior), el origen de las ramas, etc. El sangxinsu tiene efectos antivirus y antitumorales. Los pigmentos de la morera y la isoquercitrina tienen actividad antioxidante y pueden eliminar la actividad de los radicales libres DPPH. La rutina puede mejorar la elasticidad de los capilares, proteger diversos tejidos y órganos e inducir la apoptosis celular. El kaempferol tiene un buen efecto inhibidor sobre las células cancerosas. Al igual que la rutina, induce la apoptosis durante el proceso de muerte celular y tiene efectos anticancerígenos. En resumen, el extracto de morera, el pigmento de morera, la isoquercitrina, la rutina y el kaempferol tienen un buen valor medicinal y son de gran importancia para la medicina clínica. Los recursos de morera tienen una amplia área de plantación en la zona del Embalse de las Tres Gargantas, son fáciles de obtener y tienen bajos costes de adquisición de materias primas. El uso de las ramas de morera como materia prima para extraer flavonoides como la quercetina, el pigmento de morera, la isoquercitrina, la rutina y el kaempferol será una nueva tendencia para el desarrollo y la utilización de las ramas de morera.