Bestimmung des Gehalts von vier Cyclohexenether-Terpenen in Morinda officinalis aus verschiedenen Herkünften mit Hilfe der Methode der einmaligen Prüfung und mehrfachen Bewertung
Morinda officinalis, gewonnen aus den getrockneten Wurzeln der Rubiaceae-Pflanze Morinda officinalis How. Dieses traditionelle chinesische Arzneimittel wurde zum ersten Mal im "Shennong Bencao Jing" beschrieben und wird als hochwertiges Kraut eingestuft. Sie wurde im Laufe der Geschichte aufgezeichnet und ist eine berühmte chinesische Gesundheitsmedizin. Es ist auch eines der "Vier großen südlichen Arzneimittel" in China, wobei Guangdong das lokale Produktionsgebiet ist. Sie wirkt gegen Osteoporose, tonisiert das Nieren-Yang, wirkt antioxidativ, antitumorös, entzündungshemmend, gegen Müdigkeit und stärkt die Immunität des Körpers. Zu den Hauptbestandteilen von Morinda officinalis gehören Iridoide, Anthrachinone, Zucker und organische Säuren. Die Iridoid-Verbindungen, die durch die Kristallorchid-Glykoside repräsentiert werden, haben entzündungshemmende, schmerzlindernde, antioxidative, tumorhemmende, alterungshemmende und fettleibigkeitshemmende Wirkungen. Caryophyllin hat außerdem eine knochenschützende Wirkung und reduziert akute Lungenverletzungen.

In den letzten Jahren hat sich das Bewusstsein der Menschen von der medizinischen Versorgung hin zur Gesundheitsvorsorge verschoben, und die Nachfrage nach Morinda officinalis ist weiter gestiegen, was allmählich zu dem Phänomen führt, dass minderwertige Produkte durch gute ersetzt werden. In der Ausgabe 2015 des Chinesischen Arzneibuchs wird eine Komponente, Nissin, als quantitativer Indikator für die Bestimmung des Gehalts von Morinda officinalis verwendet, was gewisse Einschränkungen mit sich bringt. Wenn mehrere Indikatorkomponenten gleichzeitig in den quantitativen Indikator einbezogen werden können, wird dies eine umfassendere Bewertung der Qualität von Morinda officinalis ermöglichen.

Die Ein-Test-Mehrfach-Bewertungs-Methode ist eine Methode, die die intrinsischen Funktionen und proportionalen Beziehungen zwischen den Wirkstoffen der traditionellen chinesischen Medizin nutzt, um eine synchrone Bestimmung mehrerer Inhaltsstoffe (die schwer oder teuer zu beschaffen sind) durch die Messung eines Inhaltsstoffs (Referenzstandards sind leicht zu beschaffen) zu erreichen. Diese Methode wird in der Ausgabe 2015 des chinesischen Arzneibuchs als Schlüsselmethode gefördert und hat sich zur bevorzugten Methode für die Bestimmung des Gehalts an mehreren Indikatoren in der traditionellen chinesischen Medizin entwickelt. Allerdings gibt es derzeit im In- und Ausland keine Berichte über die Anwendung der Methode der Mehrfachbewertung mit einem Test zur Bestimmung des Inhalts.

Mit diesem Versuch wurde eine Methode zur Mehrfachauswertung mit einem Test eingeführt, mit der zum ersten Mal eine synchrone Bestimmung von vier Cyclohexenether-Terpenoid-Komponenten in Morinda officinalis möglich war, darunter Kristallorchid-Glycosid, deacetylierte Cumarinsäure, Cumarinsäure und Cumarin. Außerdem wurde eine Qualitätskontrolle von Morinda officinalis aus verschiedenen Herkunftsländern durchgeführt, die als Referenz für die Überarbeitung der Qualitätsstandards diente.

 

In diesem Versuch wurden die Extraktionslösungsmittel (70%, 80%, 90% Methanol), verschiedene Extraktionsmethoden (Ultraschallextraktion, Extraktion unter Rückfluss) und verschiedene Extraktionszeiten (20, 30, 40 min) untersucht, wobei verschiedene Faktoren wie die einfache Handhabung der Extraktionsmethode, die Betriebskosten und die Extraktionsrate der getesteten Bestandteile berücksichtigt wurden. Schließlich wurde die Zubereitungsmethode der Morinda officinalis-Testlösung unter Verwendung von 80%-Methanol als Extraktionslösungsmittel, zweimaliger Ultraschallextraktion und einer Extraktionszeit von jeweils 30 Minuten festgelegt.

In diesem Experiment wurden Methanol-Phosphorsäure-Wasser und Acetonitril-Phosphorsäure-Wasser als mobile Phasen verwendet. Es wurde festgestellt, dass bei Verwendung von Acetonitril-Phosphorsäure-Wasser als mobile Phase die Peakform und der Trennungsgrad jeder getesteten Komponente gut waren und die theoretische Anzahl der Böden ebenfalls hoch war. Schließlich wurde die mobile Phase als Acetonitril (A)~0,2% Phosphorsäurelösung+0,01 mol/L Dikaliumdihydrogenphosphatpuffersalz (B), Gradientenelution (0-12 min, 1% A; 12-30 min, 1% A → 17% A; 30-40 min, 17% A) bestimmt.

Aufgrund des niedrigen Preises, der leichten Verfügbarkeit und der stabilen Eigenschaften der Referenzsubstanz für deacetylierte Cumarinsäure wird in diesem Versuch deacetylierte Cumarinsäure als interne Referenz für die Mehrfachbewertungsanalyse verwendet.

Die in diesem Experiment etablierte QAMS-Methode ermöglichte zum ersten Mal die gleichzeitige Bestimmung von vier Iridoid-Komponenten in Morinda officinalis, darunter Kristallorchid-Glykosid, deacetylierte Cumarinsäure, Cumarinsäure und Cumarin. Durch methodische Untersuchungen, Experimente zur Haltbarkeit des relativen Korrekturfaktors und den Vergleich der mit der QAMS-Methode berechneten Werte mit den mit der ESM-Methode gemessenen Werten (RSD-Werte) wird gezeigt, dass die in dieser Arbeit entwickelte Methode einfach zu bedienen ist, genaue Ergebnisse liefert und eine gute Wiederholbarkeit aufweist. Die Mängel des traditionellen Multi-Index-Komponenten-Bewertungsmodells, wie z.B. die große Anzahl von Referenzmaterialien, die hohen Nachweiskosten und die Schwierigkeiten bei der Beschaffung einiger Referenzmaterialien, wurden behoben. Dies kann eine Referenz für die umfassende Bewertung der Qualität von Morinda officinalis darstellen.

Der Gehalt an verschiedenen Bestandteilen von Morinda officinalis aus verschiedenen Regionen ist unterschiedlich, wobei der Unterschied beim Gehalt an kristallinen Orchideenglykosiden am größten ist. Der Gehalt an kristallinen Orchideenglykosiden ist in der 9. und 10. Charge niedriger, was damit zusammenhängen könnte, dass Morinda officinalis aus verschiedenen Regionen stammt.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die in diesem Experiment entwickelte QAMS-Methode genau, zuverlässig und gut reproduzierbar ist und eine neue Methode zur Qualitätskontrolle von Morinda officinalis darstellen kann.