Studie über die Qualität verschiedener primitiver Blutegel und ihrer konfizierten Produkte
In der Ausgabe 2020 des Arzneibuchs der Volksrepublik China, nachstehend "Chinesisches Arzneibuch" genannt, heißt es, dass Blutegel die getrockneten Teile von Tieren aus der Familie der Blutegel sind, wie z. B. der Blutegel Whitman pigra Whitman, der Blutegel Hirudo nipponica Whitman oder der Weidenblattblutegel Whitman acranulata Whitman. Ihr Geschmack ist salzig, bitter und flach; es gibt ein kleines Gift, das zum Lebermeridian gehört. Er hat die Funktion, das Blut zu brechen und die Zirkulation zu fördern, Blutstau zu beseitigen und Stagnation zu beseitigen. Es wird häufig bei Blutstau und Meridianobstruktion, zur Behandlung von Massen, Schlaganfall, Hemiplegie, Stürzen und Verletzungen eingesetzt. Studien haben gezeigt, dass die pharmakologischen Wirkungen des Blutegels vor allem gerinnungshemmende, antithrombotische, antitumorale, hypolipidämische und entzündungshemmende Wirkungen umfassen und eine sehr breite klinische Anwendung finden, einschließlich der Behandlung von Thrombose, Hyperlipidämie, Bluthochdruck, Diabetes, Prostatitis, Krebs, Krampfadern, Unfruchtbarkeit, Zirrhose und anderen Krankheiten. Die Hauptbestandteile des Blutegels sind makromolekulare Verbindungen, die hauptsächlich Proteine und 17 Arten von Aminosäuren enthalten, darunter 8 für den menschlichen Körper essenzielle Aminosäuren. Der Gehalt an hydrolysierten Aminosäuren beträgt bis zu 49,4%; darüber hinaus enthält er verschiedene Substanzen wie Hirudin, Heparin, Histamin, Hirudin, Glykolipide, Sphenoide, Steroide und Carbonsäureester.
Bei der Durchsicht der Literatur wurde festgestellt, dass sich die derzeitige Forschung über Blutegel auf gerinnungshemmende Mechanismen und die Bestimmung von Aminosäuren konzentriert und nur wenige umfassende Studien über die Qualität verschiedener primitiver Blutegel und ihrer Mischungen vorliegen. Studien zur Identifizierung verschiedener primitiver Blutegel und ihrer Mischungen basieren meist auf der Identifizierung von Merkmalen gemäß der Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs. Der Markt für Blutegel ist teuer und chaotisch, und die herkömmliche Bestimmung des Aussehens allein kann die Qualität nicht schnell und effektiv bewerten. Darüber hinaus kann die Bestimmung des Aussehens nicht auf Blutegel-Extrakte und -Zubereitungen angewendet werden, was gewisse Einschränkungen mit sich bringt. Daher ist es von großer Bedeutung, eine schnelle, wissenschaftliche und effektive Bewertungsmethode zu entwickeln. In dieser Studie wurde die HPLC-Methode zur Bestimmung des charakteristischen Spektrums und der Inhaltsstoffe von Blutegeln eingesetzt. Diese Methode bewertet Blutegel und ihre Mischprodukte umfassend und bietet eine wissenschaftliche Grundlage für die Qualitätsbewertung von Blutegeln und ihren Mischprodukten.

Optimierung der chromatographischen Bedingungen. Auf der Grundlage der Erstellung eines charakteristischen Spektrums wurde in dieser Studie dieselbe Methode verwendet, um den Gehalt an zwei charakteristischen Komponenten des Blutegels, dem Carboxylderivat des Blutegelamins C und dem Blutegelamin B, zu bestimmen. Die Ergebnisse zeigten, dass die chromatographischen Peaks der einzelnen Hauptbestandteile eine starke UV-Absorption bei 254 nm Wellenlänge aufwiesen. Daher wurden die gleichen Bedingungen verwendet, um das charakteristische Spektrum und den Gehalt der Blutegelproben zu analysieren.
Analyse der Ergebnisse der Merkmalskarte. Der Blutegel ist der getrocknete ganze Körper des Blutegels Whitmania pigra Whitman. Seine medizinischen Eigenschaften sind flach spindelförmig. In der Ausgabe 2020 des Chinesischen Arzneibuchs wird seine Qualität nur anhand des Feuchtigkeitsgehalts, des Gesamtaschegehalts, des Säure- und Alkalinitätstests und der Antithrombinaktivität kontrolliert, und es wurde noch keine differenzierte Charakterisierung zwischen verschiedenen Substraten vorgenommen. In dieser Studie wurden HPLC-Charakteristika von Hirudo unterschiedlicher Herkunft und seiner Verfälschungen erstellt. Durch den Vergleich von Referenzsubstanzen wurde bestätigt, dass Hirudo fünf Komponenten enthält: Uracil, Hypoxanthin, Xanthin, Hirudin-C-Carboxyl-Derivate und Hirudin B. Laut Literaturberichten haben die oben genannten Pteridin-Verbindungen ähnliche Strukturen wie Thrombozytenaggregationshemmer wie Clopidogrel, und es wird angenommen, dass diese Komponenten die aktiven Bestandteile von Hirudo sein könnten, um die Thrombozytenaggregation zu hemmen. Bei den pharmakologischen Wirkungen von Hirudo handelt es sich hauptsächlich um gerinnungshemmende, antithrombotische und antiatherosklerotische Wirkungen. Darüber hinaus gibt es Anti-Tumor-, Anti-Entzündungs-, Anti-Fibrose- und Lipid-Aktivitäten, die darauf hindeuten, dass die ausgewählten charakteristischen Peaks in dieser Studie sind im Zusammenhang mit Es ist von großer Bedeutung, um die funktionellen Substanzen von Blutegeln, die pharmakologische Aktivitäten spielen zu klären und fördern die sekundäre Forschung und Entwicklung von Medikamenten. Gleichzeitig kann die etablierte Methode verschiedene primitive Blutegel und ihre Mischprodukte identifizieren. Der nächste Schritt besteht darin, die Anwendungsforschung dieser Methode bei Extrakten und Zubereitungen fortzusetzen, um eine Referenz für die Entwicklung und Nutzung von Blutegelarzneimitteln zu schaffen.
Analyse der Ergebnisse der Inhaltsstoffbestimmung. Auf der Grundlage der Untersuchung charakteristischer Karten wurden in dieser Studie fünf Komponenten in Blutegeln quantitativ bestimmt, darunter drei Nukleosidverbindungen, Uracil und Hypoxanthin, sowie zwei Sphenoidverbindungen, Blutegelamin-C-Carboxyl-Derivate und Blutegelamin B. Nach den vorhandenen Literaturberichten können Nukleosidverbindungen und Sphenoidverbindungen als Qualitätsindikatoren für Blutegel verwendet werden. Die Versuchsergebnisse zeigten, dass es gewisse Unterschiede im Uracil- und Hypoxanthingehalt zwischen verschiedenen primitiven Blutegeln und ihren Mischungen gab. Der durchschnittliche Uracil- und Hypoxanthingehalt war in folgender Reihenfolge: Egel>Blutegel>Willow-Egel>Philippinischer Egel; der durchschnittliche Xanthingehalt ist wie folgt: Blutegel>Blutegel>Philippinischer Blutegel>Willowblatt-Blutegel; der durchschnittliche Gehalt an C-Carboxyl-Derivaten des Blutegel-Amins ist wie folgt: Blutegel>Blutegel>Blutegel>Philippinischer Blutegel; der durchschnittliche Gehalt an Blutegelamin B ist wie folgt: Blutegel>Blutegel>Blutegel>Philippinischer Blutegel. Der philippinische Blutegel enthält kein Blutegelamin B und der Gehalt an Hypoxanthin ist deutlich niedriger als bei den anderen drei Substraten. Daher kann die Bestimmung des Gehalts der oben genannten Komponenten zur Unterscheidung zwischen Wasseregeln (einschließlich Blutegel, Blutegel und Blattsauger) und medizinischen Blutegeln (Philippinischer Blutegel) verwendet werden. Darüber hinaus verwendet die PLS-DA-Analyse die Peakflächen von 8 charakteristischen Peaks in der Probe als Variablen, und die Peakflächen der charakteristischen Peaks stehen in engem Zusammenhang mit dem Gehalt der entsprechenden Indikatorkomponenten. In Verbindung mit den Ergebnissen der PLS-DA-Analyse in "2.4.5" sind die VIP-Werte der charakteristischen Peaks, die Hypoxanthin und Xanthin entsprechen, größer als 1, und der Weidenblatt-Blutegel enthält kein Xanthin. Der durchschnittliche Gehalt der anderen drei primitiven Xanthine weist ebenfalls signifikante Unterschiede auf, was ein weiterer Hinweis darauf ist, dass die Auswahl dieser fünf Komponenten als Indikatoren für die Gehaltsbestimmung eine gewisse wissenschaftliche Gültigkeit hat.
Die von unserem Forschungsinstitut entwickelte Methode ist genau, empfindlich und hat eine gute Spezifität. Sie kann gleichzeitig die charakteristischen Spektren analysieren und den Gehalt an medizinischen Blutegelmaterialien bewerten. Sie kann als Qualitätsbewertungsmethode für verschiedene primitive Blutegel und deren Mischungen verwendet werden und stellt eine Referenz für die Qualitätsbewertung von Blutegel-Heilmitteln dar.