Undersøgelse af kvaliteten af forskellige primitive igler og deres forvekslede produkter
I 2020-udgaven af Folkerepublikken Kinas farmakopé, i det følgende benævnt den kinesiske farmakopé, hedder det, at igler er den tørrede helhed af iglefamiliens dyr, såsom iglen Whitman pigra Whitman, iglen Hirudo nipponica Whitman eller pilebladets igle Whitman acranulata Whitman. Dens smag er salt, bitter og flad; der er et lille giftstof, som hører til levermeridianen. Den har den funktion at bryde blod og fremme cirkulation, fjerne blodstasis og eliminere stagnation. Det bruges ofte til blodstasis og meridianobstruktion, behandling af masser, slagtilfælde hemiplegi og fald og skader. Undersøgelser har vist, at de farmakologiske virkninger af igler hovedsageligt omfatter antikoagulation, antitrombotiske, antitumor-, hypolipidemiske og antiinflammatoriske virkninger og har meget brede kliniske anvendelser, herunder behandling af trombose, hyperlipidæmi, hypertension, diabetes, prostatitis, kræft, åreknuder, infertilitet, skrumpelever og andre sygdomme. Hovedkomponenterne i igler er makromolekylære forbindelser, der hovedsageligt indeholder proteiner og 17 typer aminosyrer, herunder 8 essentielle aminosyrer for menneskekroppen. Det hydrolyserede aminosyreindhold er så højt som 49,4%; Derudover indeholder det også forskellige stoffer som hirudin, heparin, histamin, hirudin, glycolipider, sphenoider, steroider og carboxylestere.
En litteraturgennemgang har vist, at den nuværende forskning i igler fokuserer på antikoagulerende mekanismer og bestemmelse af aminosyrer, og at der er begrænsede omfattende undersøgelser af kvaliteten af forskellige primitive igler og deres blandinger. Identifikationsundersøgelser mellem forskellige primitive igler og deres blandinger er for det meste baseret på trækidentifikation i henhold til 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé. Markedet for igler er dyrt og kaotisk, og traditionel udseendeidentifikation alene kan ikke hurtigt og effektivt evaluere deres kvalitet. Desuden kan identifikation af udseende ikke anvendes på igleekstrakter og -præparater, hvilket har visse begrænsninger. Derfor er det af stor betydning at etablere en hurtig, videnskabelig og effektiv evalueringsmetode. Denne undersøgelse brugte HPLC til at etablere det karakteristiske spektrum og metoden til indholdsbestemmelse af igler. Denne metode giver en omfattende evaluering af igler og deres blandingsprodukter og udgør et videnskabeligt grundlag for kvalitetsevalueringen af igler og deres blandingsprodukter.

Optimering af kromatografiske forhold. På grundlag af etableringen af et karakteristisk spektrum anvendte denne undersøgelse den samme metode til at bestemme indholdet af to karakteristiske komponenter af igle, igleamin C-carboxylderivat og igleamin B. En diodearray-detektor blev brugt til at udføre fuld bølgelængdescanning af testopløsningen i bølgelængdeområdet 200-400 nm. Resultaterne viste, at de kromatografiske toppe for hver hovedkomponent havde stærk UV-absorption ved 254 nm bølgelængde. Derfor blev de samme betingelser brugt til at analysere det karakteristiske spektrum og indholdet af igleprøver.
Analyse af funktionskortets resultater. Blodiglen er den tørrede hele krop af et dyr i iglefamilien, iglen Whitmania pigra Whitman. Dens medicinske egenskaber er flade, spindelformede. 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé kontrollerer kun dens kvalitet gennem fugt, totalt askeindhold, surheds- og alkalinitetstest og antitrombinaktivitet og har endnu ikke foretaget differentieret karakterisering mellem forskellige substrater. I denne undersøgelse blev HPLC-karakteristika for hirudo med forskellig oprindelse og dens forfalskninger etableret. Gennem sammenligning af referencestoffer blev det bekræftet, at hirudo indeholder fem komponenter: uracil, hypoxanthin, xanthin, hirudin C-carboxylderivater, hirudin B. Ifølge litteraturrapporter har de ovennævnte pteridinforbindelser lignende strukturer med lægemidler mod blodpladeaggregering såsom clopidogrel, og det antages, at disse komponenter kan være de aktive komponenter i hirudo for at spille antiplatelet-aggregering. De farmakologiske virkninger af hirudo, der er rapporteret mere om, er hovedsageligt antikoagulerende, antitrombotiske og antiaterosklerotiske virkninger. Derudover er der antitumor-, antiinflammatoriske, antifibrose- og lipidemiske aktiviteter, som indikerer, at de udvalgte karakteristiske toppe i denne undersøgelse er relateret til Det er af stor betydning at afklare de funktionelle stoffer i igler, der spiller farmakologiske aktiviteter og fremmer den sekundære forskning og udvikling af lægemidler. Samtidig kan den etablerede metode identificere forskellige primitive igler og deres blandingsprodukter. Det næste skridt er at fortsætte forskningen i anvendelsen af denne metode i ekstrakter og præparater, hvilket giver reference til udvikling og anvendelse af medicinske materialer fra igler.
Analyse af resultater af indholdsbestemmelse. Baseret på undersøgelsen af karakteristiske kort bestemte denne undersøgelse kvantitativt fem komponenter i igler, herunder tre nukleosidforbindelser, uracil, hypoxanthin og to sphenoidforbindelser, leechamin C-carboxylderivater og leechamin B. Ifølge eksisterende litteraturrapporter kan nukleosidforbindelser og sphenoidforbindelser bruges som indikatorer for kvalitetsevaluering af igler. Forsøgsresultaterne viste, at der var visse forskelle i indholdet af uracil og hypoxanthin blandt forskellige primitive igler og deres blandinger. Det gennemsnitlige indhold af uracil og hypoxanthin var i følgende rækkefølge: igle > blodigle > pileblad > philippinsk igle; det gennemsnitlige indhold af xanthin er som følger: igle>leech>filippinsk igle>pilblad igle; Det gennemsnitlige indhold af C-carboxylderivater af igleamin er som følger: blad igle>leech>leech>filippinsk igle; Det gennemsnitlige indhold af igleamin B er som følger: blad igle>leech>leech>filippinsk igle. Den filippinske igle indeholder ikke igleamin B, og indholdet af hypoxanthin er betydeligt lavere end de tre andre substrater. Derfor kan bestemmelse af indholdet af ovennævnte komponenter bruges til at skelne mellem vandblodigler (inklusive igler, igler og bladblodigler) og medicinske igler (filippinske igler); Derudover bruger PLS-DA-analyse topområderne af 8 karakteristiske toppe i prøven som variabler, og topområderne af karakteristiske toppe er tæt forbundet med indholdet af deres tilsvarende indikatorkomponenter. Kombineret med PLS-DA-analyseresultaterne i "2.4.5" er VIP-værdierne for de karakteristiske toppe, der svarer til hypoxanthin og xanthin, større end 1, og pilebladet igle indeholder ikke xanthin. Det gennemsnitlige indhold af de tre andre primitive xanthiner viser også betydelige forskelle, hvilket yderligere indikerer, at valget af disse fem komponenter som indikatorer for indholdsbestemmelse har en vis videnskabelig validitet.
Den metode, som vores forskningsinstitut har etableret, er nøjagtig, følsom og har god specificitet. Den kan samtidig analysere de karakteristiske spektre og evaluere indholdet af medicinske iglematerialer. Den kan bruges som en kvalitetsevalueringsmetode for forskellige primitive igler og deres blandinger, hvilket giver en reference til kvalitetsevalueringen af medicinske iglematerialer.