Forskning i UHPLC-fingeraftryk og kemisk mønstergenkendelse af Gouteng
2020-udgaven af den kinesiske farmakopé omfatter Uncaria rhynchhophylla (Miq.) Miq.ex Havil Uncaria macrophylla Wall, Uncaria hirsuta Havil Tørrede krogede stængler og grene af Uncaria sinensis (Oliv.) Havil. eller Uncaria sessilifructus Roxb. På nuværende tidspunkt er de vigtigste medicinske vinstokke på det farmaceutiske marked Uncaria rhynchhophylla (Miq.) Miq.ex Havil. Gouteng har den virkning, at den fjerner varme og beroliger leveren, beroliger vinden og dulmer forskrækkelsen. Det kan bruges til indre bevægelse af levervind, epileptiske anfald, feberkramper, kuldechok, gråd hos børn, eklampsi under graviditet, hovedpine og svimmelhed osv. Det bruges ofte i klinisk praksis til behandling af sygdomme som hypertension, arytmi, angst, epilepsi osv. Gouteng indeholder mange kemiske komponenter, primært alkaloider, flavonoider, triterpenoider osv. Blandt dem betragtes alkaloider som de vigtigste farmakologiske komponenter i Gouteng til at sænke blodtrykket.

Fingeraftrykket af traditionel kinesisk medicin er et omfattende og kvantificerbart kromatogram, der giver karakteristika for den kemiske sammensætning. Hvad angår lægeurten Gouteng, har mange forskere forsket i fingeraftryksspektret for Gouteng. Huang et al. etablerede for eksempel HPLC-kromatografiske fingeraftryksspektre af Uncaria fra forskellige regioner ved hjælp af Uncaria-alkaloider og Isocrocea-alkaloider som indikatorkomponenter, mens Tan et al. etablerede HPLC-fingeraftryksspektre af Uncaria-alkaloider fra forskellige regioner. Disse undersøgelser har været nyttige for den dybdegående evaluering af kvaliteten af Gouteng, men på grund af fokus på nogle få alkaloidkomponenter som Gouteng-alkaloider og IsoGouteng-alkaloider og kun brug af en enkelt lighedsevaluering er der stadig plads til forbedringer i en nøjagtig og omfattende afspejling af den interne kvalitet af Gouteng uden dybere udvinding og udforskning af fingeraftryksdata.

For objektivt, omfattende og effektivt at kunne evaluere kvaliteten af Gouteng-medicinske materialer etablerede dette eksperiment fingeraftryksspektre af 30 partier af Gouteng fra forskellige kilder ved hjælp af UHPLC. Femten almindelige toppe blev kalibreret ved hjælp af "Chinese Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation Software". Efter sammenligning med referencestandarder blev syv almindelige toppe identificeret, herunder chlorogensyre, isocaprylsyre, isocaprylsyre, Gouteng-alkaloid, syfrømethylether, dehydreret Gouteng-alkaloid og Gouteng-alkaloid. Baseret på lighedsevalueringen af fingeraftryksspektre kombineres fingeraftryksdataene med kemometriske metoder, og multivariate statistiske metoder såsom klyngeanalyse (CA), hovedkomponentanalyse (PCA) og ortogonal partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse (OPLS-DA) baseret på kemometri anvendes til at analysere og evaluere kvaliteten af Gouteng-medicinske materialer for at screene og identificere karakteristiske forbindelser af Gouteng-kvalitetsforskelle og give reference til effektiv kvalitetskontrol af Gouteng.

Denne undersøgelse undersøgte virkningerne af ekstraktionstid (ultralyd 20, 40, 60 min), ekstraktionsmidler (100%, 75%, 50% methanol og 100%, 75%, 50% ethanol), kromatografiske kolonner (ACQUITY UPLC HSS T3, Cortecs UPLC T3, Cortecs UPLC C18 og ACQUITY UPLC BEH C18) og forskellige mobile fasesystemer (methanol-0.1% vandig myresyreopløsning og acetonitril-0,1% vandig myresyreopløsning) på antallet og adskillelsen af kromatografiske toppe. Endelig blev 75% methanol ultralydsekstraktion i 40 minutter bestemt som forberedelsesmetode til testprøven, og ACQUITY UPLC HSS T3 blev valgt som den kromatografiske søjle, elueret med acetonitril-0,1% myresyre vandig opløsning på en gradient måde. Samtidig blev forskellige detektionsbølgelængder som 254, 274 og 366 nm undersøgt, og det blev konstateret, at der var mange toppe i kromatogrammet ved 254 nm med god adskillelse.

Kvalitetskontrollen af Gouteng-medicinske materialer i 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé identificeres kvalitativt ved hjælp af TLC-metoden med isorhynchophylline som indikatorkomponent. Denne metode er besværlig at bruge og har lav følsomhed, hvilket gør det vanskeligt at kontrollere kvaliteten af de krogede vinstokke på en omfattende måde. Denne undersøgelse etablerede først fingeraftryksspektre af 30 partier krogvin fra forskellige kommercielle kilder til lighedsevaluering og udførte derefter kemisk mønstergenkendelsesforskning på dem. Ifølge lighedsevalueringssoftwaren viste resultaterne, at ligheden mellem 30 partier af Gouteng-lægemidler varierede fra 0,850 til 0,995; I alt 15 almindelige toppe blev identificeret i fingeraftryksspektret, og 7 kemiske komponenter blev identificeret gennem sammenligning med referencestandarder, nemlig klorogensyre, isophenanthrolin, isorhynchophyllin, rhynchophyllin, selegilinmethylether, dehydrorhynchophyllin og rhynchophyllin. Klorogensyre har en bred vifte af farmakologiske virkninger såsom antibakterielle, antivirale, antitumorale, lipidsænkende og blodtrykssænkende; Isocamptothecin har antiproliferative virkninger på humane lymfocytiske leukæmi T-celler; Isorhynchophylline og rhynchophylline er de vigtigste aktive ingredienser i rhynchophylline til behandling af hypertension; Cesare methylether er en effektiv 5-HT1A-receptoragonist og hovedkomponenten i traditionel japansk medicin Yigan San; Dehydrohydroquercetin er en effektiv komponent i neurobeskyttende virkning på nerveceller; Uncaria alkaloid har anticancereffekt, som kan hæmme levedygtigheden af humane brystkræft MCF-7-celler in vitro og inducere DNA-skaderespons og oxidativ stressrespons. Uovervåget klyngeanalyse og hovedkomponentanalyse blev brugt til yderligere at opdele de 30 partier af prøver i forskellige grupper, og differentieret evaluering blev udført under evaluering af konsistensen af kvaliteten af Gouteng-medicinske materialer; Og brug ortogonal partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse til at screene kromatografiske toppe, der har en betydelig indvirkning på prøvegruppering. Ved at kombinere evaluering af fingeraftrykslighed og mønstergenkendelsesmetoder fandt vi ud af, at de vigtigste faktorer, der forårsager batchforskelle, var 1, 3 (chlorogensyre), 7 (isocaprylsyre), 9 og 12 (selegilinmethylether). Det tyder på, at disse differentierede komponenter bør have særlig opmærksomhed, når man vurderer kvaliteten af Gouteng-medicinske materialer. Det er nødvendigt at kombinere massespektrometri, kernemagnetisk resonans og andre teknikker eller bruge relevante referencestandarder for yderligere at identificere top 1 og 9.

Brugen af kemisk mønstergenkendelsesteknologi kombineret med dataanalyse af fingeraftryk kan give en mere objektiv og komplet evaluering af ægtheden og kvaliteten af traditionel kinesisk medicin. Dette eksperiment brugte en kombination af evaluering af fingeraftrykslighed og kemisk mønstergenkendelsesteknologi til at studere forskellige kilder til Gouteng. Sammenlignet med eksisterende kvalitetsevaluerings- og kvalitetskontrolmetoder, der kun er afhængige af indholdsbestemmelse eller fingeraftryksanalyse, evaluerer det ikke kun effektivt konsistensen af Gouteng-medicinsk materialekvalitet, men tydeliggør også de vigtigste faktorer, der bidrager til kvalitetsforskellene i Gouteng-medicinsk materiale. Derfor giver det rigere information til kvalitetsevaluering og kvalitetskontrol af Gouteng og giver en vis reference til kvalitetskontrol og efterfølgende udvikling af Gouteng.