Undersøgelse af overførsel af doseringsværdier af Bu Zha Ye-afkogsstykker og standardafkog baseret på UPLC-fingeraftryksspektrum og multikomponentkvantificering
Bu Zha Ye er en karakteristisk lægeurt i Lingnan, der hovedsageligt består af flavonoider, alkaloider, terpener, organiske syrer osv. Den fremmer gastrointestinal peristaltik og udskillelse af mavesaft, sænker blodlipider, reducerer gulfarvning, er antiinflammatorisk, smertestillende, beskytter det kardiovaskulære system, er anti-aging osv. Det er en kinesisk medicin med to formål til både medicin og mad. I de senere år er opmærksomheden på Bu Zha Ye steget, og forskningen i den er også blevet mere og mere omfattende.
Traditionel kinesisk medicin bruger hovedsageligt afkog som den vigtigste form for medicin, som er det materielle grundlag for effekten af kinesisk medicin. Efter tusindvis af års klinisk praksis kan etablering af kvalitetsstandarder for standardafkog af kinesisk medicin give vigtige referencer til etablering af kvalitetsstandarder for moderne kinesiske medicinpræparater som f.eks. formelgranulat. På nuværende tidspunkt er der ingen forskningsrapporter om standardafkoget af Bu Zha Ye. I vores virksomheds forskning i den nationale standard for Bu Zha Ye-formelgranulat har vi undersøgt de vigtigste kvalitetsindikatorer for standardafkoget i henhold til "Tekniske krav til kvalitetskontrol og standardudvikling af formelgranulat til traditionel kinesisk medicin" (i det følgende benævnt de tekniske krav), herunder pastaudbytte, ekstrakt, indhold og overførselshastighed for indikatorkomponenter, fingeraftryksspektrum, for at undersøge overførselsloven for mængdeværdien fra Bu Zha Ye-afkogstykker til standardafkoget, hvilket giver reference til udvikling af kvalitetsstandarder for Bu Zha Ye-formelgranulat og relaterede præparater.

Kvaliteten af Bu Zha Ye er relativt let, men den kemiske sammensætning er kompleks. Under afkogningsprocessen flyder en stor mængde komponenter over, hvilket resulterer i flere urenheder i standardafkogningen, hvilket påvirker den kromatografiske adskillelse og analyse af effektive ingredienser. Når man bruger opløsningsmidler med høj polaritet som methanol og ethanol til at behandle standardafkoget, er baseline for fingeraftryksspektret ustabilt, den kromatografiske topseparation er dårlig, de kromatografiske toppe er uordnede, og der er mange små toppe. Derfor blev separations-, oprensnings- og berigelsesmetoden for ethylacetatekstraktion undersøgt i forbehandlingsmetoden for standardafkogstestprøver for at reducere interferensen af urenheder og sammenlignet med konventionelle behandlingsmetoder. Resultaterne viste, at brug af ethylacetat som ekstraktionsmiddel kunne forbedre påvirkningen af urenhedstoppe betydeligt, sikre renhed og adskillelse af de vigtigste kromatografiske toppe og løse problemerne med ustabil kromatografisk baseline og lille absorption af nogle kromatografiske toppe. I undersøgelsen af kromatografiske forhold blev forskellige mobilfase-elueringssystemer undersøgt, såsom acetonitril-0,1% fosforsyreopløsning, acetonitril-0,1% eddikesyreopløsning, methanol-0,1% myresyreopløsning, methanol-0,1% eddikesyreopløsning osv. Resultaterne viste, at brug af methanol-0,1%-eddikesyreopløsning som elueringssystem resulterede i et højere antal kromatografiske toppe og bedre samlet adskillelse. I betragtning af etableringen af ultrahøjtydende væskekromatografiske fingeraftryksspektre er valget af kromatografiske kolonner afgørende. Derfor undersøgte dette eksperiment kromatografiske kolonner med forskellige partikelstørrelser og mærker og valgte i sidste ende Agilent ZORBAX SB C18-kromatografikolonnen (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μ m) med den bedste topform og opløsning af hver delt fingeraftrykstop.
Forskning har vist, at bladene fra Bu Zha indeholder mange flavonoider. Xiao et al. identificerede 31 forbindelser fra Bu Zha Ye ved hjælp af UPLC-Q-TOF-MS/MS-teknologi, herunder 28 flavonoider og 3 fenoliske syrer. Farmakologiske undersøgelser har vist, at flavonoider er et vigtigt grundlag for Bu Zha Ye's fordøjelses-, varme- og fugtlindrende virkninger. Repræsentative komponenter som vitexin, isovitexin og narcissin har et højt indhold i Bu Zha Ye og en vis opløselighed i vand. Derfor bruger Bu Zha Ye-standardafkog vitexin, isovitexin og narcissin som indikatorer for indholdsbestemmelse og etablerer en metode til indholdsbestemmelse for Bu Zha Ye-afkog baseret på afkoget for at vejlede undersøgelsen af overførslen af standardafkogværdier.
Bu Zha Ye-medicinske urter er hovedsageligt distribueret i Guangdong, Guangxi og Hainan og hører til de autentiske medicinske urter, der produceres i Guangdong. Der blev indsamlet 15 partier Bu Zha Ye-medicinske urter fra de tre førnævnte produktionsområder, hvilket viser tilstrækkelig repræsentativitet. Ud fra bestemmelsesresultaterne af 15 partier af standardafkogsekstrakt, ekstrakt og 15 partier af Bu Zha Ye-afkogsstykker for tre flavonoider kan det ses, at der er visse forskelle mellem prøverne fra forskellige partier, hvor maksimums- og minimumsværdierne adskiller sig ca. to gange. Denne forskel er relateret til kvaliteten af selve de medicinske materialer og opfylder kravene i de tekniske krav. Der er ingen åbenlyse unormale værdier.
Ud fra resultaterne af bestemmelsen af overførselshastigheden varierede den gennemsnitlige overførselshastighed for de tre flavonoider fra 40% til 60%, hvor vitexin havde den højeste overførselshastighed, efterfulgt af narcissin og isovitexin, og den samlede overførselshastighed var relativt stabil. Forskningsresultaterne for fingeraftryksspektret viste, at der var en vis ændring i andelen af toppe fra Bu Zha Ye-afkogsstykker til standardafkog. OPLS-DA-analysen identificerede fem signifikant forskellige kromatografiske toppe, nemlig top 1, 2, 3, 4 og 6. Bortset fra top 3, som ikke blev identificeret, var alle andre kromatografiske toppe kendte. Blandt dem var top 1, 2 og 4 fenoliske syrekomponenter. Derfor formodes peak 3 at være en fenolsyre. Fenoliske syrekomponenter er en særlig tilstedeværelse i planter, som kan tjene som forstadier til syntese af andre forbindelser og også kan hydrolyseres fra forskellige forbindelser. Derfor anses den betydelige stigning i det relative topområde for fenoliske syrekomponenter i standardafkoget af Bu Zha Ye for at skyldes hydrolyse af andre komponenter under afkogningsprocessen. Strukturen af top 6 isovitexin ligner strukturen af top S isovitexin, med lille forskel i polaritet, men der er en betydelig forskel i overførselshastighed. Det vurderes, at der er en vis grad af interkonvertering mellem isovitexin og isovitexin under afkogningsprocessen af standardafkog, og der er behov for yderligere forskning.
Denne undersøgelse er baseret på de vigtigste kvalitetsindikatorer for standardafkoget af Bu Zha Ye og gennemfører dybdegående forskning og analyse af værdioverførslen af standardafkoget af Bu Zha Ye-afkogsstykker, hvilket giver vigtige referencer til formuleringen af kvalitetsstandarder for Bu Zha Ye-formelgranulat og relaterede præparater.