Zhejiang Fritillaria ve Hubei Fritillaria Arasındaki Kalite Farklılıklarının HPLC-ELSD Parmak İzi ve Çok Bileşenli Miktar Tayinine Dayalı Olarak İncelenmesi
Zambakgillerden Fritillaria thunbergii Miq. bitkisinin kurutulmuş soğanı olan Fritillaria thunbergii Miq. "Zhejiang'ın Sekiz Aroması "nın başında yer alır ve Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nin (bundan böyle "Çin Farmakopesi" olarak anılacaktır) çeşitli baskılarına dahil edilmiştir. Bitki yaz başında solduğunda hasat edilir, yıkanır, nemlendirilir, kalın dilimler halinde kesilir ve kurutulur; Xi buna "Zhe Bei Pian" adını vermiştir. Zhejiang Fritillaria'nın ısıyı temizleme, balgamı çözme, öksürüğü hafifletme, nodülleri detoksifiye etme ve dağıtma ve karbonkülleri ortadan kaldırma işlevleri vardır. Klinik olarak rüzgar ısısı, balgam ateşi öksürüğü, akciğer apsesi, göğüs apsesi ve yaraları tedavi etmek için kullanılır.

Hubei Fritillaria, zambakgiller familyasından bir bitki olan Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C. Hsiao'nun kurutulmuş soğanıdır. Başlıca işlevleri ısı ve balgamı temizlemek, öksürüğü hafifletmek ve nodülleri dağıtmaktır. Klinik uygulamada akciğer ısı öksürüğü ve balgam öksürüğü gibi semptomları tedavi etmek için yaygın olarak kullanılır. Hem Zhejiang Fritillaria hem de Hubei Fritillaria, Fritillaria cinsine aittir ve tıbbi amaçlar için geleneksel Çin tıbbı olarak kullanılabilir; Her ikisinin de aktif bileşenleri alkaloidlerdir, ancak türleri farklıdır. Zhejiang Fritillaria'nın ana aktif bileşenleri arasında Fritillaria A, Fritillaria B, IsoFritillaria A vb. bulunur. Hubei Fritillaria'nın ana aktif bileşenleri arasında Fritillaria A, Fritillaria B, Hubeijia, Hubeiyi, Hubeixin vb. bulunur; Bu nedenle, Zhejiang Fritillaria ve Hubei Fritillaria arasındaki farmakolojik etkilerde belirli farklılıklar vardır. 2020 Çin Farmakopesi'nde, şifalı bitkiler kategorisi altında, Zhejiang Fritillaria ve Hubei Fritillaria ayrı ayrı listelenmiştir, bu da iki şifalı bitki arasında belirli farklılıklar olduğunu göstermektedir.

Piyasadaki Fritillaria türlerinin geniş çeşitliliği ve fiyat farkı nedeniyle, sahte Fritillaria ve Hubei Fritillaria'nın karşılıklı ikamesi veya yer değiştirmesi olgusu vardır. Morfolojik, mikroskobik ve fizikokimyasal tanımlamadaki sınırlamalar nedeniyle, iki tıbbi malzemenin kalitesindeki benzerlik ve farklılıkları etkili bir şekilde göstermek mümkün değildir. Bu nedenle, ikisini etkili bir şekilde ayırt etmek ve birbirinden ayırmak için daha spesifik ve doğru bir yöntem oluşturulması gerekmektedir.

Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısı, Fritillaria thunbergii için içerik belirleme göstergelerinin Fritillaria A ve Fritillaria B olduğunu belirtirken, Hubei Eyaletindeki Fritillaria thunbergii için içerik belirleme göstergesi Fritillaria B'yi seçmektedir, Hubei Eyaletindeki Fritillaria thunbergii B'nin içerik sınırı, Zhejiang Eyaletindeki Fritillaria thunbergii A ve Fritillaria thunbergii B'nin toplam sınırından önemli ölçüde daha yüksektir ve Fritillaria thunbergii'nin tağşişi ve kullanımı için nesnel koşullar sağlamaktadır. Geleneksel Çin tıbbının karmaşık kimyasal bileşim sistemi karşısında, tek bir nicel model kullanmak artık modern Çin tıbbının kalite kontrol ihtiyaçlarını karşılamak için yeterli değildir. Şu anda, iki Fritillaria türü arasındaki aktif bileşen içeriğindeki farka ilişkin çok az rapor bulunmaktadır. Bu nedenle, bu çalışmada, Hubei'deki Fritillariae thunbergii ve Fritillariae Hupehensis Bulbus'ta sırasıyla Fritillariae Thunbergii Bulbus (FTB) ve Fritillariae Hupehensis Bulbus (FHB) parmak izi spektrumlarını oluşturmak için HPLC-ELSD yöntemi kullanılmıştır. Aynı zamanda, beş özdeş alkaloid bileşeni belirlenmiş ve Fritillariae thunbergii ve Hubei üzerinde hem kalitatif hem de kantitatif yönlerden kapsamlı bir karşılaştırmalı çalışma yapılarak iki tıbbi malzemenin tanımlanması ve kalite değerlendirmesi için referans sağlanmıştır.

 

Parmak izi spektrumlarının oluşturulması ve uygulanmasında, Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'deki alkaloid bileşenlerinin özelliklerine dayanarak Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'nin HPLC-ELSD parmak izi spektrumları oluşturulmuştur. Benzerlik değerlendirme sonuçları, aynı Fritillaria thunbergii'nin parmak izi spektrumlarının oldukça benzer olduğunu göstermiştir. Bu nedenle, parmak izi spektrumları Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'nin kalite kontrol araştırmaları için ortak özellikler olarak kullanılabilir. İki Fritillaria türünün parmak izi spektrumları arasındaki farklar karşılaştırıldığında, Fritillaria thunbergii'nin parmak izi spektrumunun Hubeijia pigment spektrumunun tepe noktasından açıkça yoksun olduğu veya Hubeijia pigment içeriğinin son derece düşük olduğu ve Fritillaria thunbergii'de tespit edilmesini zorlaştırdığı görülebilir. Bu nedenle Hubeijia, iki Fritillaria türü olan Zhejiang Fritillaria ve Hubei Fritillaria'yı birbirinden ayırmak ve farklılaştırmak için ayırıcı bir biyobelirteç olarak hizmet edebilir.

Ortak pikin pik alanı değişken olarak kullanılarak HCA, PCA ve OPLS-DA analizleri ayrı ayrı gerçekleştirilmiştir. HCA ve PCA sonuçları Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'yi etkili bir şekilde ayırt edebilmiş ve parmak izi, HCA veya PCA kombinasyonunun Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'yi tanımlamak için etkili bir yöntem olduğunu göstermiştir. İki Fritillaria thunbergii türü arasındaki kimyasal bileşim farklılıklarını daha da netleştirmek için, dört farklı biyobelirteç belirlemek üzere OPLS-DA analizi kullanılmıştır. Farklılıkların önemine göre, bunlar Fritillaria thunbergii>Peak 4>Berberine A>Berberine B şeklinde sıralanmıştır, bu da iki Fritillaria thunbergii türü arasında yukarıdaki bileşenlerin içeriğinde önemli farklılıklar olduğunu göstermektedir. Bu farklılık kısmen tıbbi malzemelerin kendilerindeki farklılıklardan kaynaklanmaktadır. Farklı kökenler, dikim ortamı ve şifalı bitkilerin büyüme döngüsü gibi faktörlerle de yakından ilişkili olabilir.

İçerik belirleme göstergelerinin seçimi açısından, Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'de bulunan alkaloidler esas olarak steroid alkaloidler ve steroid alkaloidler olarak ikiye ayrılır. Araştırmalar, alkaloidlerin balgam söktürücü, öksürük kesici, astım rahatlatıcı, anti-enflamatuar ve anti-tümör etkileri gibi çeşitli farmakolojik aktivitelere sahip olduğunu ve bunların Zhejiang Fritillaria ve Hubei Fritillaria'nın fonksiyonel endikasyonları ile tutarlı olduğunu ortaya koymuştur. Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'nin HPLC-ELSD parmak izi spektrumlarından beş özdeş alkaloid tanımlanmıştır. İçerik belirleme sonuçları, ibuprofen içerik farkı dışında, Fritillaria thunbergii'nin diğer dört bileşeni Berberine A, Berberine B ve IsoBerberine A'nın içerik bakımından önemli farklılıklara sahip olduğunu göstermiştir. Bunlar arasında, Fritillaria thunbergii'deki Berberine A içeriği Fritillaria thunbergii'dekinden önemli ölçüde daha yüksekken, Berberine A, Berberine B ve IsoBerberine A içeriği Fritillaria thunbergii'dekinden önemli ölçüde daha düşüktü. Bu nedenle, Berberine A, Berberine A, Berberine B ve IsoBerberine A içeriğini ölçerek, Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii arasında ayrım yapmak mümkündür. Elde edilen araştırma sonuçları temel olarak OPLS-DA analiz sonuçları ile tutarlıdır. Alkaloidlerin içeriği ve oranındaki farklılıkların, iki Fritillaria thunbergii türü arasındaki öksürük, balgam, antibakteriyel ve anti-enflamatuar etkilerdeki farklılıklara yol açan önemli bir faktör olabileceğine dair literatür raporları bulunmaktadır. Çoklu alkaloidlerin eş zamanlı olarak belirlenmesi, klinik odaklı geleneksel Çin ilaçları olan Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii'nin kalite kontrolü ve değerlendirilmesi için büyük önem taşımaktadır. Bu nedenle, Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii tıbbi malzemelerinin kalite kontrolünde berberin ve izoberberin tayinlerinin artırılması önerilmektedir.

Özet olarak, bu çalışma Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii için HPLC-ELSD parmak izi yöntemlerini oluşturmuş ve eş zamanlı olarak Fritillaria thunbergii ve Fritillaria thunbergii tıbbi malzemelerinin tanımlanması ve kalite kontrolü için önemli referanslar sağlayabilecek beş alkaloidin içeriğini belirlemiştir.