Morchella edulis'ten t\u00fcretilen bir peptit olan MIP-16'n\u0131n safla\u015ft\u0131r\u0131lmas\u0131 ve n\u00f6roprotektif aktivitesi
\nParkinson hastal\u0131\u011f\u0131 (PH), 65 ya\u015f ve \u00fczeri bireyler aras\u0131nda 2% ila 3% prevalans oran\u0131yla insanlardaki en b\u00fcy\u00fck ikinci n\u00f6rodejeneratif hastal\u0131kt\u0131r. PH'nin patolojik \u00f6zellikleri, substantia nigra pars compacta'da \u00e7ok say\u0131da dopaminerjik n\u00f6ronun kayb\u0131, substantia nigra ve striatumda dopamin biyosentezinde azalmaya yol a\u00e7mas\u0131 olarak \u00f6zetlenebilir. PH'nin patojenik mekanizmas\u0131 hen\u00fcz net de\u011fildir. \u00c7al\u0131\u015fmalar, \u00e7evresel fakt\u00f6rlerin, genetik fakt\u00f6rlerin, oksidatif stresin ve di\u011fer fakt\u00f6rlerin PH'da dopaminerjik n\u00f6ronlar\u0131n dejenerasyonu ve \u00f6l\u00fcm\u00fcnde rol oynayabilece\u011fini do\u011frulam\u0131\u015ft\u0131r. Bunlar aras\u0131nda oksidatif stres, n\u00f6ronal dejenerasyon ve dejenerasyonun \u00f6nemli bir nedenidir. Bir yandan, beyin insanlar\u0131n normal fizyolojik aktivitelerinde en y\u00fcksek oksijen t\u00fcketimine sahip organd\u0131r, ancak beyindeki antioksidan enzimlerin g\u00f6receli eksikli\u011fi onu oksidatif stres hasar\u0131na kar\u015f\u0131 \u00e7ok hassas hale getirir; \u00d6te yandan, ilk \u00e7al\u0131\u015fmalar substantia nigra pars compacta'daki dopaminerjik n\u00f6ronlarda mitokondriyal oksidatif stresin artmas\u0131n\u0131n, Parkinson hastal\u0131\u011f\u0131n\u0131n iki ana patolojik \u00f6zelli\u011fi olan lizozomal disfonksiyon ve alfa sin\u00fcklein birikimine yol a\u00e7an dopamine ba\u011fl\u0131 bir toksik kaskad\u0131 tetikleyebilece\u011fini g\u00f6stermi\u015ftir. \u015eu anda, PH tedavisinde t\u0131pta \u00e7o\u011funlukla L-3,4-dihidroksifenilalanin (L-DOPA) takviyesi gibi klasik dopamin replasman tedavisi kullan\u0131lmaktad\u0131r. Ancak giderek daha fazla say\u0131da \u00e7al\u0131\u015fma bu klasik tedavinin \u00f6nemli yan etkileri oldu\u011funu ortaya koymu\u015ftur. Klinik g\u00f6zlemler, uzun s\u00fcreli L-DOPA tedavisinin PH hastalar\u0131nda hareket bozukluklar\u0131na neden olma olas\u0131l\u0131\u011f\u0131n\u0131n bulundu\u011funu ortaya koymu\u015ftur. Bu nedenle, oksidatif stresi azaltmaktan ba\u015flamak ve yeni n\u00f6roprotektif ajanlar aramak, PH'yi \u00f6nlemenin ve tedavi etmenin potansiyel yollar\u0131ndan biridir.
\nSon y\u0131llarda, do\u011fal \u00fcr\u00fcnlerden antioksidan aktiviteye sahip n\u00f6roprotektif ajanlar\u0131n \u00e7\u0131kar\u0131lmas\u0131 ve safla\u015ft\u0131r\u0131lmas\u0131 yayg\u0131n ilgi g\u00f6rm\u00fc\u015f ve \u00f6nemli ilerlemeler kaydedilmi\u015ftir. Sedaceae familyas\u0131ndan bir bitki olan Rhodiola rosea L.'nin k\u00f6klerinden elde edilen salidrosid, apoptotik PC12 h\u00fccrelerini korumak i\u00e7in oksidatif stresi ve enflamasyonu inhibe edebilir. Paeoniflorin, NF - \u03ba B aktivasyonunu inhibe ederek PC12 h\u00fccrelerinde 6-hidroksidopamin kaynakl\u0131 apoptozu hafifletir. Bununla birlikte, bitkilerle kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131ld\u0131\u011f\u0131nda, mantar n\u00f6roprotektif ajanlar\u0131 hakk\u0131nda nispeten daha az ara\u015ft\u0131rma vard\u0131r. Baz\u0131 fungal polisakkaritler iyi serbest radikal temizleme aktivitesi sergileyebilir ve n\u00f6roprotektif etkiler g\u00f6sterebilir. Bununla birlikte, mantar polisakkaritlerinin b\u00fcy\u00fck bir molek\u00fcler a\u011f\u0131rl\u0131\u011fa, karma\u015f\u0131k bir yap\u0131ya sahip olmas\u0131 ve kan-beyin bariyerine n\u00fcfuz etmelerinin zor olmas\u0131, n\u00f6roprotektif ajanlar olarak uygulamalar\u0131n\u0131 s\u0131n\u0131rlamaktad\u0131r. Baz\u0131 mantarlar\u0131n etanol veya su \u00f6z\u00fctleri n\u00f6roprotektif fakt\u00f6rler i\u00e7erir, ancak \u00f6z\u00fctlerin bile\u015fimi hala belirsizdir ve fonksiyonel maddelerin yap\u0131s\u0131n\u0131n tan\u0131mlanmas\u0131 gerekir.
\nMorchella spp. de\u011ferli bir yenilebilir ve t\u0131bbi mantard\u0131r ve Compendium of Materia Medica'da \"tatl\u0131 ve so\u011fuk, toksik olmayan, balgam \u00e7\u00f6z\u00fcc\u00fc ve qi d\u00fczenleyici ve gastrointestinal sisteme faydal\u0131\" olarak kaydedilmi\u015ftir. Morchella importuna M. Kuo. \u00c7in'de yayg\u0131n olarak yeti\u015ftirilen bir \u00e7e\u015fittir. \u00d6nceki ara\u015ft\u0131rmam\u0131zda, Morchella importuna'n\u0131n su \u00f6z\u00fct\u00fcn\u00fcn, PC12 h\u00fccrelerinin farkl\u0131la\u015fmas\u0131n\u0131 ve sinir a\u011flar\u0131 olu\u015fturmas\u0131n\u0131 te\u015fvik edebilen sinir b\u00fcy\u00fcme fakt\u00f6r\u00fcne (NGF) benzeyen bir madde i\u00e7erdi\u011fi do\u011frulanm\u0131\u015ft\u0131r. Buna dayanarak, bu \u00e7al\u0131\u015fma Morchella prolifera'n\u0131n meyve g\u00f6vdesindeki fonksiyonel bile\u015fenleri daha da safla\u015ft\u0131rd\u0131 ve tan\u0131mlad\u0131, 6-OHDA ile hasar g\u00f6rm\u00fc\u015f bir PC12 h\u00fccre modeli olu\u015fturdu, Morchella prolifera'n\u0131n meyve g\u00f6vdesindeki fonksiyonel bile\u015fenlerin n\u00f6roprotektif aktivitesini do\u011frulad\u0131, yapay olarak yeti\u015ftirilen Morchella prolifera'n\u0131n sa\u011fl\u0131k yararlar\u0131n\u0131n geli\u015ftirilmesi i\u00e7in veri sa\u011flad\u0131 ve mantar kaynakl\u0131 n\u00f6roprotektif ajanlar\u0131n taranmas\u0131 i\u00e7in alternatif kaynaklar sa\u011flad\u0131.<\/p>\n
Baz\u0131 b\u00fcy\u00fck mantarlar son derece y\u00fcksek g\u0131da ve t\u0131bbi de\u011fere sahiptir ve protein a\u00e7\u0131s\u0131ndan zengindir, bu da onlar\u0131 do\u011fal peptitler elde etmek i\u00e7in ideal hammaddeler haline getirir. Cordymin, Cordyceps sinensis'ten ekstrakte edilen bir peptittir ve inflamasyonu inhibe edebilir ve s\u0131\u00e7anlarda iskemi ve hipoksinin neden oldu\u011fu beyin hasar\u0131n\u0131 hafifletebilir. Pleurotus eryngii miselyumundan izole edilen PEMP peptidi antioksidan, anti-t\u00fcm\u00f6r ve ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k artt\u0131r\u0131c\u0131 i\u015flevlere sahiptir. \u015eu anda, mantarlar\u0131n aktif bile\u015fenleri esas olarak polisakkaritlerin ara\u015ft\u0131r\u0131lmas\u0131na odaklanm\u0131\u015ft\u0131r. Mantar polisakkaritleriyle kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131ld\u0131\u011f\u0131nda, peptitler basit bir yap\u0131ya, d\u00fc\u015f\u00fck imm\u00fcnojeniteye sahiptir ve yapay olarak sentezlenmeleri kolayd\u0131r, bu da onlar\u0131 modern ila\u00e7 geli\u015ftirmenin olduk\u00e7a umut verici bir par\u00e7as\u0131 haline getirir. G\u00fcn\u00fcm\u00fczde, polipeptitleri protein hidrolizatlar\u0131ndan ay\u0131rmak ve safla\u015ft\u0131rmak i\u00e7in genellikle iyon de\u011fi\u015fim kromatografisi ve\/veya jel filtrasyon kromatografisi dahil olmak \u00fczere kromatografik kolon y\u00f6ntemleri kullan\u0131lmaktad\u0131r. Birincisi iyonlar\u0131n ve polar molek\u00fcllerin y\u00fck\u00fcne g\u00f6re ayr\u0131labilirken, ikincisi molek\u00fcler boyuta g\u00f6re ayr\u0131labilir. Bununla birlikte, \u015fu anda mantar peptitlerinin ekstraksiyonu i\u00e7in standart y\u00f6ntemler hakk\u0131nda herhangi bir rapor bulunmamaktad\u0131r ve ekstraksiyon tamponunun pH de\u011feri ve ekstraksiyon i\u015flemi s\u0131ras\u0131nda proteaz hidrolizinin gerekli olup olmad\u0131\u011f\u0131 ara\u015ft\u0131r\u0131lmam\u0131\u015ft\u0131r. Buna ek olarak, farkl\u0131 mantar t\u00fcrlerinden peptitlerin \u00e7\u0131kar\u0131lmas\u0131 genellikle farkl\u0131 ekstraksiyon y\u00f6ntemlerine kar\u015f\u0131l\u0131k gelir ve bu da mantar peptitlerinin tan\u0131t\u0131m\u0131na ve uygulanmas\u0131na elveri\u015fli de\u011fildir. Fungal polisakkarit olgunlu\u011fu i\u00e7in standart ekstraksiyon y\u00f6ntemiyle kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131ld\u0131\u011f\u0131nda, fungal peptitlerin ekstraksiyon y\u00f6ntemi i\u00e7in daha fazla ara\u015ft\u0131rmaya ihtiya\u00e7 vard\u0131r. Bu \u00e7al\u0131\u015fmada, MIP-16, molek\u00fcler d\u0131\u015flama kromatografisi ve ters y\u00fcksek performansl\u0131 s\u0131v\u0131 kromatografisinin bir kombinasyonu kullan\u0131larak safla\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Y\u00f6ntem \u00f6nce molek\u00fclleri boyutlar\u0131na g\u00f6re kabaca ay\u0131rd\u0131 ve ard\u0131ndan polaritelerine g\u00f6re alt b\u00f6l\u00fcmlere ay\u0131rd\u0131. Deney, bu y\u00f6ntemin iyi bir ay\u0131rt edilebilirli\u011fe sahip oldu\u011funu kan\u0131tlam\u0131\u015ft\u0131r, ancak gereken deney s\u00fcresi nispeten uzundur ve daha fazla iyile\u015ftirmeye ihtiya\u00e7 vard\u0131r.
\nSubstantia nigra striatumdaki dopaminerjik n\u00f6ronlar\u0131n dejenerasyonu ve h\u00fccre \u00f6l\u00fcm\u00fc, Parkinson hastal\u0131\u011f\u0131n\u0131n ana nedeni olan dopamin eksikli\u011fine yol a\u00e7ar. Bu nedenle, dopamin replasman tedavisi (L-DOPA takviyesi gibi) \u015fu anda idiyopatik Parkinson hastal\u0131\u011f\u0131n\u0131 tedavi etmek i\u00e7in en iyi y\u00f6ntemlerden biridir ve eksojen dopamin takviyesi yoluyla semptomlar\u0131 hafifletir. Bununla birlikte, ilk optimal tedavi yan\u0131t d\u00f6neminden sonra, uzun s\u00fcreli L-DOPA tedavisi genellikle motor fonksiyon kayb\u0131 gibi yan etkilere e\u015flik eder. Buna ek olarak, ara\u015ft\u0131rmac\u0131lar uzun s\u00fcredir L-DOPA alan Parkinson hastalar\u0131n\u0131n idrar\u0131nda 6-OHDA tespit etmi\u015flerdir. Bu nedenle, bu \u00e7al\u0131\u015fmada, PH'nin erken olu\u015fumunu sim\u00fcle etmek ve yeni n\u00f6roprotektif ajanlar aramak i\u00e7in PC12 h\u00fccrelerini 6-OHDA ile tedavi ettik. \u00c7al\u0131\u015fmam\u0131zda, 6-OHDA ile tedavinin PC12 h\u00fccrelerinde ROS seviyesini art\u0131rd\u0131\u011f\u0131n\u0131 ve bunun da h\u00fccre apoptozunu tetikledi\u011fini bulduk. Uzun s\u00fcreli L-DOPA tedavisinin daha fazla 6-OHDA \u00fcretebilece\u011fini ve bunun da PH tedavisi \u00fczerinde olumsuz bir geri bildirim d\u00fczenleyici etkiye sahip olabilece\u011fini d\u00fc\u015f\u00fcn\u00fcyoruz. Yukar\u0131daki analize dayanarak, oksidatif bas\u0131nc\u0131 azaltmaktan ve oksidatif hasar\u0131 en aza indirmekten ba\u015flayarak, etkili ve g\u00fcvenli n\u00f6roprotektif ajanlar\u0131n taranmas\u0131 beklenmektedir. Y\u00fcksek mantarlarda bulunan polisakkaritler, peptitler, triterpenler ve di\u011fer bile\u015fenler iyi antioksidan aktiviteye sahiptir. Bu nedenle, PH'da ila\u00e7 taramas\u0131 i\u00e7in kaynak sa\u011flamak \u00fczere mantarlardan n\u00f6roprotektif ajanlar ara\u015ft\u0131r\u0131yoruz.
\nOksidasyon reaksiyonlar\u0131 insan ya\u015fam aktiviteleri i\u00e7in enerji sa\u011flayabilir, ancak reaksiyon s\u0131ras\u0131nda \u00fcretilen s\u00fcperoksit anyon radikalleri ve hidroksil radikalleri oksidatif hasara neden olabilir. Endojen antioksidan enzimlerin ve di\u011fer antioksidanlar\u0131n varl\u0131\u011f\u0131, normal ko\u015fullar alt\u0131nda sabit bir durumu koruyarak ROS \u00fcretimini ve t\u00fcketimini dengeleme e\u011filimindedir. Ancak yap\u0131lan \u00e7al\u0131\u015fmalar, ya\u015f artt\u0131k\u00e7a antioksidan sistemin etkinli\u011finin giderek azald\u0131\u011f\u0131n\u0131 ortaya koymu\u015ftur. Ya\u015fl\u0131 pop\u00fclasyonda, reaktif oksijen t\u00fcrlerindeki art\u0131\u015f antioksidan sistemin temizleme kapasitesini a\u015farak oksidatif strese yol a\u00e7ar ve potansiyel olarak Parkinson hastal\u0131\u011f\u0131 gibi n\u00f6rodejeneratif hastal\u0131klara neden olur. S\u00fcperoksit dismutaz (SOD), katalaz (CAT), glutatyon peroksidaz (GSH Px) gibi endojen antioksidan enzimler v\u00fccudun oksidatif strese kar\u015f\u0131 do\u011fal savunma sistemidir. 6-OHDA ile muameleden sonra, h\u00fccre i\u00e7i antioksidan enzim aktivitesi \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde azalm\u0131\u015ft\u0131r. Bu zamanda, h\u00fccre i\u00e7i antioksidan enzim sisteminin normal y\u00fck\u00fc \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde a\u015ft\u0131\u011f\u0131 sonucuna var\u0131labilir. 6 saat boyunca MIP-16 \u00f6n muamelesi PC12 h\u00fccrelerinde endojen antioksidan enzim aktivitesini \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde art\u0131rm\u0131\u015ft\u0131r. SOD seviyeleri h\u00fccre i\u00e7i antioksidan enzim sisteminin y\u00fck\u00fcn\u00fc ve dolayl\u0131 olarak h\u00fccre i\u00e7i serbest radikallerin seviyesini yans\u0131t\u0131r. Bu sonu\u00e7, MIP-16 \u00f6n muamelesinden sonra anyonik s\u00fcperoksit olu\u015fumunun azald\u0131\u011f\u0131n\u0131 g\u00f6sterebilir. Ayr\u0131ca, GSH Px h\u00fccresel antioksidan savunman\u0131n temel bir bile\u015feni ve ROS i\u00e7in bir elektron don\u00f6r\u00fcd\u00fcr, bu da MIP-16'n\u0131n ba\u015fka bir detoksifikasyon sistemi olarak GSH metabolizmas\u0131n\u0131 etkileyebilece\u011fini ve 6-OHDA kaynakl\u0131 h\u00fccre \u00f6l\u00fcm\u00fcn\u00fc \u00f6nleyebilece\u011fini d\u00fc\u015f\u00fcnd\u00fcrmektedir.
\nEndojen antioksidan enzim sistemi ROS'u zaman\u0131nda temizleyemedi\u011finde, ROS biyomolek\u00fcllere kolayca zarar verebilir ve sonu\u00e7ta h\u00fccre apoptozuna yol a\u00e7abilir. Bcl-2 ve Bax, s\u0131ras\u0131yla Bcl-2 protein ailesindeki en temsili apoptoz inhibe edici genler ve apoptoz te\u015fvik edici genlerdir. Bax geni taraf\u0131ndan kodlanan Bax proteini, Bcl-2 ile heterodimerler olu\u015fturarak Bcl-2'nin ifadesini engelleyebilir. Ara\u015ft\u0131rmalar, Bax\/Bcl-2 proteinlerinin oran\u0131n\u0131n h\u00fccre apoptoz inhibisyonunun g\u00fcc\u00fcn\u00fc belirleyen \u00f6nemli bir fakt\u00f6r oldu\u011funu ve Bax\/Bcl-2'nin apoptoz i\u00e7in molek\u00fcler bir anahtar olarak da d\u00fc\u015f\u00fcn\u00fclebilece\u011fini ortaya koymu\u015ftur. Bax'\u0131n ind\u00fckledi\u011fi h\u00fccre apoptozunun mekanizmas\u0131, Bax'\u0131n tBid'in etkisi alt\u0131nda mitokondriye girmesi, mitokondriyal membran\u0131n ge\u00e7irgenli\u011fini artt\u0131rmas\u0131 ve ard\u0131ndan sitokrom C'yi serbest b\u0131rakmas\u0131d\u0131r. Sitokrom C'nin serbest b\u0131rak\u0131lmas\u0131, Caspase-9'u hedefleyerek ve aktive ederek efekt\u00f6r kaspazlar\u0131n (Caspase-3 gibi) aktivasyonuna yol a\u00e7an endojen h\u00fccre apoptozu yolunda \u00f6nemli bir ad\u0131md\u0131r. Bu nedenle, bu \u00e7al\u0131\u015fmada MIP-16'n\u0131n 6-OHDA ile ind\u00fcklenen h\u00fccre apoptozu \u00fczerindeki koruyucu etkisi, Bcl-2 ve Bax ekspresyon seviyelerinin yan\u0131 s\u0131ra Kaspaz (Kaspaz-3 ve Kaspaz-9) aktivitesini tespit ederek ara\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Ara\u015ft\u0131rmam\u0131zdan, 6-OHDA'n\u0131n MIP-16 ile \u00f6n muamelesinin Bcl-2 seviyelerini \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde art\u0131rd\u0131\u011f\u0131n\u0131 ve Bax seviyelerini d\u00fc\u015f\u00fcrd\u00fc\u011f\u00fcn\u00fc, Caspase-3 ve Caspase-9 aktivitesini ise engelledi\u011fini g\u00f6zlemledik. Bu sonu\u00e7lar, MIP-16'n\u0131n Bcl-2\/Bax oran\u0131n\u0131 d\u00fczenleyerek ve Caspase-3\/-9 aktivitesini inhibe ederek anti apoptotik etkiler g\u00f6sterebilece\u011fini d\u00fc\u015f\u00fcnd\u00fcrmektedir.
\nAra\u015ft\u0131rma sonu\u00e7lar\u0131, MIP-16'n\u0131n PC12 h\u00fccrelerinde 6-OHDA ile ind\u00fcklenen apoptoz \u00fczerinde \u00f6nemli bir inhibit\u00f6r etkiye sahip oldu\u011funu g\u00f6stermektedir: SOD, CAT ve GSH Px dahil olmak \u00fczere endojen antioksidan enzim aktivitesini endojen bir antioksidan promot\u00f6r olarak yeniden \u015fekillendirmek. ROS seviyelerini ve MDA \u00fcretimini azaltmak, b\u00f6ylece h\u00fccresel oksidasyon seviyelerini d\u00fc\u015f\u00fcrmek ve apoptozun ba\u015flamas\u0131n\u0131 engellemek. Bax\/BCl-2 oran\u0131n\u0131 d\u00fczenler, Caspase-9 ve Caspase-3 ekspresyonunu inhibe eder, b\u00f6ylece h\u00fccrelerde mitokondriyal apoptoz yolunu bloke eder. MIP-16 basit bir yap\u0131ya sahiptir ve yapay olarak sentezlenmesi kolayd\u0131r, bu nedenle PH tedavisini hafifletmek ve yard\u0131mc\u0131 olmak i\u00e7in bir ila\u00e7 olarak geli\u015ftirilmesi ve kullan\u0131lmas\u0131 beklenmektedir.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Purification and neuroprotective activity of MIP-16, a peptide derived from Morchella edulis Parkinson’s disease (PD) is the second largest neurodegenerative disease in humans, with a prevalence rate of 2% to 3% among individuals aged 65 and above. The pathological characteristics of PD can be summarized as the loss of a large number of dopaminergic neurons […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n