Glycyrrhiza uralensis polisakkarit GiP-B1, TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B sinyal yolu \u00fczerinden makrofaj RAW264.7'yi aktive eder
\nDo\u011fu\u015ftan gelen ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k sistemi, v\u00fccudun patojen istilas\u0131na kar\u015f\u0131 koymas\u0131 i\u00e7in \u00f6nemli bir savunma hatt\u0131d\u0131r ve Toll benzeri resept\u00f6rler (TLR'ler) ile TLR'leri ifade eden makrofajlar ve dendritik h\u00fccreler gibi antijen sunan h\u00fccreler, do\u011fu\u015ftan gelen ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k sisteminin \u00f6nemli bile\u015fenleridir. TLR'lerin makrofaj imm\u00fcn tan\u0131mas\u0131na, sinyal iletiminin d\u00fczenlenmesine ve imm\u00fcn yan\u0131t\u0131n ba\u015flat\u0131lmas\u0131na kat\u0131l\u0131m\u0131 \u00fczerine yap\u0131lan ara\u015ft\u0131rmalar, TLR3 hari\u00e7 TLR ailesinin t\u00fcm \u00fcyelerinin lipopolisakkaritler (LPS) gibi ligandlar\u0131 tan\u0131yabildi\u011fini g\u00f6stermi\u015ftir, miyeloid farkl\u0131la\u015fma fakt\u00f6r\u00fc 88'e (MyD88) ba\u011flan\u0131r, ilgili kinazlar\u0131 i\u015fe al\u0131r ve NF - \u03ba B'ye ba\u011flanan NF - \u03ba B inhibit\u00f6r\u00fcn\u00fc (I \u03ba B) fosforile eden n\u00fckleer fakt\u00f6r kappa B'nin (IKK) kinaz inhibit\u00f6r\u00fcn\u00fc aktive eder. Ve ayr\u0131\u015f\u0131r, NF - \u03ba B'yi \u00e7ekirde\u011fe aktive eder, hedef genlerin transkripsiyonunu ba\u015flat\u0131r veya inhibe eder, b\u00f6ylece do\u011fu\u015ftan gelen ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k tepkisini d\u00fczenler.
\nEtkili bir biyolojik yan\u0131t d\u00fczenleyici s\u0131n\u0131f\u0131 olarak polisakkaritler, TLR'ler\/NF - \u03ba B sinyal yolu iletimi ile ilgili mekanizmalar yoluyla makrofaj ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k yan\u0131tlar\u0131n\u0131 aktive eder. Ara\u015ft\u0131rmalar, bir\u00e7ok bitki polisakkaritinin makrofajlar\u0131n y\u00fczeyindeki TLR2\/4 gibi resept\u00f6rlere spesifik olarak ba\u011flanabildi\u011fini, NF - \u03ba B sinyal yolunu aktive edebildi\u011fini, fagositik h\u00fccrelerde sitokinlerin transkripsiyonunu ve ortak uyar\u0131c\u0131 molek\u00fcllerin ekspresyonunu d\u00fczenledi\u011fini ve do\u011fu\u015ftan gelen ve edinilmi\u015f ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131\u011f\u0131 aktive etmek i\u00e7in a\u015fa\u011f\u0131 ak\u0131\u015f kaskadlar\u0131n\u0131 ba\u015flatt\u0131\u011f\u0131n\u0131 bulmu\u015ftur.
\nGlycyrrhiza inflata Bat. Xinjiang'da karakteristik bir t\u0131bbi bitki kayna\u011f\u0131d\u0131r. Kurutulmu\u015f k\u00f6kleri ve rizomlar\u0131 \u00c7in Farmakopesi'ne \u015fifal\u0131 bitkiler olarak dahil edilmi\u015ftir. Ham polisakkarit GiP ve safla\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015f bile\u015fenlerinin makrofaj ve lenfositlerin \u00e7o\u011falmas\u0131n\u0131 te\u015fvik etti\u011fi ara\u015ft\u0131rma grubumuz taraf\u0131ndan do\u011frulanm\u0131\u015ft\u0131r. Y\u00fcksek bir i\u00e7eri\u011fe sahip olan safla\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015f bile\u015fen GiP-B1, poli Rha GalA ana zincirine sahip, nispi molek\u00fcler a\u011f\u0131rl\u0131\u011f\u0131 2.0 \u00d7 106Da'dan b\u00fcy\u00fck ve \u00fcronik asit i\u00e7eri\u011fi 16.8% olan asidik bir polisakkarittir. RAW264.7 makrofajlar\u0131n\u0131n \u00e7o\u011falmas\u0131n\u0131 ve fagositozunu \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde te\u015fvik edebilir, makrofajlar taraf\u0131ndan IL-1 \u03b2 ve TNF - \u03b1 salg\u0131lanmas\u0131n\u0131 art\u0131rabilir ve NO ve NOS \u00fcretimini te\u015fvik edebilir. Ara\u015ft\u0131rma ekibi ayr\u0131ca makrofajlara m\u00fcdahale etmek i\u00e7in monoklonal antikor anti-TLR4 kulland\u0131 ve GiP-B1 taraf\u0131ndan ind\u00fcklenen TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, 1L-6 ve NO salg\u0131lanmas\u0131n\u0131n yan\u0131 s\u0131ra iNOS, 1L-1 \u03b2, TNF - \u03b1 ve 1L-6 mRNA ekspresyonunun de\u011fi\u015fen derecelerde inhibe edildi\u011fini buldu, bu da makrofajlar\u0131n GiP-B1 aktivasyonunun TLR4 ve ilgili sinyal yollar\u0131yla ili\u015fkili olabilece\u011fini d\u00fc\u015f\u00fcnd\u00fcrd\u00fc. GiP-B1 ile aktive edilen makrofajlar ile TLR4\/NF - \u03ba B sinyal yolu aras\u0131ndaki ili\u015fkiyi ara\u015ft\u0131rmak amac\u0131yla bu \u00e7al\u0131\u015fmada, GiP-B1 m\u00fcdahalesinin makrofajlar\u0131 TLR4 arac\u0131l\u0131 NF - \u03ba B sinyal yolu \u00fczerinden aktive edip edemeyece\u011fini ara\u015ft\u0131rmak i\u00e7in RAW264.7 makrofajlar\u0131na in vitro olarak TLR4 interferans RNA (TLR4 siRNA) transfekte edilmi\u015f ve GiP-B1 ile aktive edilen makrofajlar\u0131n molek\u00fcler mekanizmas\u0131 ayd\u0131nlat\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r.<\/p>\n
Makrofajlar v\u00fccutta do\u011fu\u015ftan gelen ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131\u011f\u0131n \u00f6nemli y\u00fcr\u00fct\u00fcc\u00fcleridir. \u00d6zelle\u015fmi\u015f doku fagositik h\u00fccreleri olarak, y\u00fczeylerinde ifade edilen TLR'ler gibi kal\u0131p tan\u0131ma resept\u00f6rleri (PRR'ler) arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla patojenik mikroorganizmalar\u0131n y\u00fczeyindeki korunmu\u015f patojen ili\u015fkili molek\u00fcler kal\u0131plar\u0131 (PAMP'ler) tan\u0131yabilirler. A\u015fa\u011f\u0131 ak\u0131\u015f sinyal yolaklar\u0131 arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla, patojenleri temizlemek i\u00e7in \u00e7e\u015fitli ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k yan\u0131t genlerinin ifadesini d\u00fczenlerler. Ara\u015ft\u0131rmalar, bir\u00e7ok do\u011fal bitki polisakkaritinin TLR4 i\u00e7in ligand g\u00f6revi g\u00f6rebilece\u011fini, hem MyD88 ba\u011f\u0131ml\u0131 hem de ba\u011f\u0131ml\u0131 olmayan yollar arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla makrofaj sinyalini kolayla\u015ft\u0131rd\u0131\u011f\u0131n\u0131, NF - \u03ba B'nin \u00e7ekirde\u011fe giri\u015fini te\u015fvik etti\u011fini ve DNA promot\u00f6rleri \u00fczerindeki spesifik tan\u0131ma dizilerine ba\u011flanarak IL-1, IL-6, TNF - \u03b1 gibi sitokinlerin ekspresyonuna arac\u0131l\u0131k etti\u011fini g\u00f6stermi\u015ftir. Bu sitokinler ayn\u0131 zamanda NF - \u03ba B'nin uyar\u0131c\u0131lar\u0131 olarak hareket eder, NF - \u03ba B'yi daha da aktive ederek s\u00fcrekli enflamatuar yan\u0131tlara neden olur ve adaptif imm\u00fcn yan\u0131tlar\u0131 aktive eder.
\nGeleneksel \u00c7in t\u0131bb\u0131 meyan k\u00f6k\u00fcn\u00fcn kaynak bitkisi olarak, \u015fi\u015fmi\u015f meyve meyan k\u00f6k\u00fcn\u00fcn ana t\u0131bbi maddeleri sadece antikanser aktivitesi olan kalkonlar\u0131 de\u011fil, ayn\u0131 zamanda antioksidan, alfa glukozidaz inhibit\u00f6r aktivitesi ve ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k d\u00fczenleyici aktivitesi olan polisakkaritleri de i\u00e7erir. Ara\u015ft\u0131rma grubumuzun \u00f6n ara\u015ft\u0131rmas\u0131nda, Glycyrrhiza uralensis'in ham polisakkarit GiP ve safla\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015f bile\u015fenlerinin makrofaj ve lenfosit proliferasyonunu te\u015fvik etme etkisine sahip oldu\u011fu bulunmu\u015ftur. Bunlar aras\u0131nda, daha y\u00fcksek i\u00e7eri\u011fe sahip safla\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015f bile\u015fen GiP-B1, RAW264.7 makrofajlar\u0131n\u0131n proliferasyonu, fagositozu ve sitokin salg\u0131lanmas\u0131 \u00fczerinde \u00f6nemli bir te\u015fvik edici etkiye sahiptir. \u00d6n ara\u015ft\u0131rma grubu, h\u00fccreleri tedavi etmek i\u00e7in anti-TLR4 kullanm\u0131\u015f ve etki mekanizmas\u0131n\u0131n, \u00f6rnek m\u00fcdahaleden sonra TLR4\/NF - \u03ba B sinyal yolunun aktivasyonuyla ilgili oldu\u011funu bulmu\u015ftur. Bu makale, TLR4 genini TLR4 siRNA arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla susturmak i\u00e7in siRNA teknolojisini kullan\u0131r ve GiP-B1'in RAW264.7 makrofajlar\u0131n\u0131n \u00e7o\u011falmas\u0131n\u0131 te\u015fvik etti\u011fini ve TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2 ve IL-6 sitokinlerinin salg\u0131lanmas\u0131n\u0131 engelledi\u011fini bulur. Bu, TLR4'\u00fcn GiP-B1'in RAW264.7 makrofaj proliferasyonu ve sitokin salg\u0131lanmas\u0131 \u00fczerindeki etkisine dahil oldu\u011funu, yani makrofajlar\u0131n GiP-B1 aktivasyonunun TLR4 ile ili\u015fkili oldu\u011funu g\u00f6sterir ki bu da \u00f6nceki antikor blokaj deneylerinin sonu\u00e7lar\u0131yla tutarl\u0131d\u0131r. Buna ek olarak, GiP-B1 taraf\u0131ndan TLR4 arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla aktive edilen makrofajlar taraf\u0131ndan salg\u0131lanan TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, IL-6 gibi sitokin t\u00fcrlerine dayanarak, makrofajlar\u0131n GiP-B1 aktivasyonunun M1 tipine do\u011fru polarizasyona neden olabilece\u011fini d\u00fc\u015f\u00fcnd\u00fcrmektedir. M1 tipi makrofajlar yaln\u0131zca enflamatuar yan\u0131tlar\u0131 te\u015fvik etmekle kalmaz, ayn\u0131 zamanda T h\u00fccrelerinin adaptif imm\u00fcn yan\u0131tlar\u0131n\u0131 aktive edebilen, Th1 h\u00fccre imm\u00fcn yan\u0131tlar\u0131n\u0131 ind\u00fckleyebilen ve patojenlere ve t\u00fcm\u00f6r h\u00fccrelerine kar\u015f\u0131 konak\u00e7\u0131 imm\u00fcn temizleme i\u015flevleri uygulayabilen antijen sunum yeteneklerine de sahiptir. \u00d6nceki \u00e7al\u0131\u015fmalarda GiP-B1'in baz\u0131 in vitro anti-t\u00fcm\u00f6r etkileri oldu\u011fu da bulunmu\u015ftur. Etki mekanizmas\u0131n\u0131n makrofaj polarizasyonunu te\u015fvik eden GiP-B1 ile ili\u015fkili olup olmad\u0131\u011f\u0131 ve t\u00fcm\u00f6r mikro\u00e7evresindeki makrofajlar\u0131 d\u00fczenleyerek v\u00fccudun anti-t\u00fcm\u00f6r ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k fonksiyonunu destekleyip destekleyemeyece\u011fi hala daha derinlemesine ara\u015ft\u0131rma gerektirmektedir.
\nMakrofajlar\u0131n GiP-B1 aktivasyonu ile TLR4\/NF - \u03ba B yolu aras\u0131ndaki ili\u015fkiyi daha fazla g\u00f6stermek i\u00e7in, bu deneyde ayr\u0131ca TLR4 siRNA m\u00fcdahalesi alt\u0131nda GiP-B1 taraf\u0131ndan d\u00fczenlenen makrofajlarda yukar\u0131 ak\u0131\u015f d\u00fczenleyici genler TLR4, ba\u011f\u0131ml\u0131 molek\u00fcl MyD88, a\u015fa\u011f\u0131 ak\u0131\u015f resept\u00f6r genleri NF \u03ba Bp65, I \u03ba B \u03b1, vb. mRNA ve protein ekspresyon de\u011fi\u015fiklikleri incelenmi\u015ftir. Sonu\u00e7lar, TLR4 geninin susturulmas\u0131 nedeniyle TLR4 mRNA'n\u0131n ifade seviyesinin azald\u0131\u011f\u0131n\u0131, \u00e7ekirdekteki serbest NF - \u03ba Bp65 i\u00e7eri\u011finin \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde azald\u0131\u011f\u0131n\u0131 ve NF - \u03ba B yolunun aktivasyonunun da buna ba\u011fl\u0131 olarak azald\u0131\u011f\u0131n\u0131 g\u00f6stermi\u015ftir; GiP-B1, normal ko\u015fullar alt\u0131nda makrofajlarda TLR4 geninin ekspresyonunu art\u0131rmakla kalmaz, TLR4 sinyaline ba\u011fl\u0131 molek\u00fcl MyD88 ve a\u015fa\u011f\u0131 ak\u0131\u015f genleri NF - \u03ba Bp65 ve p-I \u03ba B \u03b1'n\u0131n mRNA ve protein ekspresyonunu da d\u00fczenler, ve RNA interferans\u0131n\u0131n neden oldu\u011fu p-I \u03ba B \u03b1, GiP-B1'in TLR4 ligandlar\u0131ndan biri olarak hareket edebilece\u011fini, MyD88'e ba\u011fl\u0131 TLR4\/NF - \u03ba B sinyal yolunu aktive edebilece\u011fini, NF - \u03ba B ailesindeki n\u00fckleer transkripsiyon fakt\u00f6r\u00fc p65'i aktive edebilece\u011fini, I \u03ba B'nin fosforilasyon degradasyonuna ve NF - \u03ba B'den ayr\u0131lmas\u0131na yol a\u00e7abilece\u011fini ve NF - \u03ba B'yi te\u015fvik edebilece\u011fini kan\u0131tlamaktad\u0131r. Sitoplazmadan \u00e7ekirde\u011fe aktar\u0131l\u0131r, spesifik DNA dizilerine ba\u011flan\u0131r, inflamatuar sitokinlerin, h\u00fccre proliferasyonunun (anti apoptoz) ve di\u011fer genlerin transkripsiyonunu d\u00fczenler, inflamatuar yan\u0131tlara, imm\u00fcn yan\u0131tlara vb. kat\u0131l\u0131r. GiP-B1, makrofajlar\u0131 TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B sinyal yolu \u00fczerinden aktive eder; bu yol, yukar\u0131da bahsedilen \u00e7al\u0131\u015fmalarda polisakkaritlerin etki yolu ile neredeyse ayn\u0131d\u0131r.
\n\u00d6zetle, GiP-B1, TLR4\/NF - \u03ba B sinyal yolu arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla RAW264.7 makrofajlar\u0131n\u0131n ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k fonksiyonunu d\u00fczenleyebilir ve d\u00fczenleyici etkisi esas olarak MyD88 ba\u011f\u0131ml\u0131 yol arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla elde edilir. Bu deney, makrofajlar\u0131n Glycyrrhiza uralensis polisakkaritleri taraf\u0131ndan aktivasyonu i\u00e7in deneysel kan\u0131tlar sunmakta ve bu da Glycyrrhiza uralensis polisakkaritlerinin enflamatuar yan\u0131t, ba\u011f\u0131\u015f\u0131kl\u0131k yan\u0131t\u0131 ve di\u011fer y\u00f6nlerdeki etki mekanizmas\u0131n\u0131n ayd\u0131nlat\u0131lmas\u0131na yard\u0131mc\u0131 olmaktad\u0131r.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Glycyrrhiza uralensis polysaccharide GiP-B1 activates macrophage RAW264.7 via TLR4\/MyD88\/NF – \u03ba B signaling pathway The innate immune system is an important defense line for the body to resist pathogen invasion, and Toll like receptors (TLRs), as well as antigen-presenting cells such as macrophages and dendritic cells expressing TLRs, are important components of the innate immune […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n