Lingzhi Ergothionein'in Y\u00fcksek Verimli Tespit Y\u00f6ntemi \u00dczerine Ara\u015ft\u0131rma
\n2-tiyo-Lhistidin trimetil i\u00e7 tuzu olarak da bilinen ergothioneine (EGT), bir\u00e7ok hayvan ve bitkide bol miktarda bulunan do\u011fal bir amino asittir. Sadece baz\u0131 mikroorganizmalarda (aktinomisetler, streptomisetler), mantarlarda ve baz\u0131 siyanobakterilerde sentezlenir ve hayvansal organizmalar\u0131n kendileri taraf\u0131ndan sentezlenemez. \u0130nsan v\u00fccudu EGT'yi yaln\u0131zca g\u0131dalardan alabilir ve son derece spesifik organik katyon ta\u015f\u0131y\u0131c\u0131 yeni tip-1 (OCTN1) arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla \u00e7e\u015fitli h\u00fccre ve dokularda y\u00fcksek konsantrasyonlarda EGT biriktirebilir. EGT g\u00fc\u00e7l\u00fc bir antioksidan olarak kabul edilir ve Servillo ve arkada\u015flar\u0131, benzersiz bir redoks mekanizmas\u0131na sahip oldu\u011funa inanarak antioksidan mekanizmas\u0131n\u0131 ara\u015ft\u0131rm\u0131\u015f ve EGT'nin h\u00fccrelerde benzersiz bir antioksidan etkisi oldu\u011funu \u00f6ne s\u00fcrm\u00fc\u015ft\u00fcr. EGT'nin standart oksidasyon-red\u00fcksiyon potansiyeli -0,06V iken, di\u011fer tiyollerin potansiyeli genellikle -0,32V ile -0,2V aras\u0131ndad\u0131r. Bu nedenle EGT, fizyolojik pH ortamlar\u0131nda di\u011fer antioksidanlara g\u00f6re daha kararl\u0131d\u0131r ve spontane oksidasyona daha az e\u011filimlidir. Ara\u015ft\u0131rmalar, EGT'nin anti-enflamatuar etkiler; DNA'y\u0131 koruyarak elde edilen h\u00fccre koruma i\u015flevi; n\u00f6ronal farkl\u0131la\u015fmay\u0131 ve n\u00f6rogenezi te\u015fvik ederek elde edilen antidepresan i\u015flevi; oksidatif strese direnerek elde edilen g\u00f6z koruma i\u015flevi gibi bir\u00e7ok \u00f6nemli fizyolojik i\u015flevi oldu\u011funu g\u00f6stermi\u015ftir; Ateroskleroz ile ilgili adezyon molek\u00fcllerinin ekspresyonunu keserek elde edilen kardiyovask\u00fcler ve serebrovask\u00fcler koruma i\u015flevi; EGT, toksisiteyi inhibe ederek elde edilen n\u00f6rodejeneratif hastal\u0131klar \u00fczerindeki \u00f6nleyici ve terap\u00f6tik etkileri ve do\u011fal g\u00fcvenli\u011fi nedeniyle t\u0131p, g\u0131da ve kozmetik gibi end\u00fcstrilerde geni\u015f bir uygulama alan\u0131na sahiptir.<\/p>\n
EGT \u00fcretim y\u00f6ntemleri aras\u0131nda kimyasal sentez, yenilebilir mantar ekstraksiyonu ve mikrobiyal fermantasyon yer almaktad\u0131r. \u0130lk ikisinin y\u00fcksek maliyeti ve karma\u015f\u0131k s\u00fcreci nedeniyle, yenilebilir mantar hiflerinin derin fermantasyonu \u015fu anda EGT end\u00fcstriyel \u00fcretiminin ana modudur. Bununla birlikte, do\u011fal su\u015flar d\u00fc\u015f\u00fck EGT \u00fcretimine sahiptir ve \u0131slah teknikleri yoluyla y\u00fcksek verimli end\u00fcstriyel EGT su\u015flar\u0131n\u0131n yeti\u015ftirilmesi gerekmektedir. End\u00fcstriyel yenilebilir mantar t\u00fcrlerini yeti\u015ftirme y\u00f6ntemleri aras\u0131nda mutajenez \u0131slah\u0131, hibridizasyon \u0131slah\u0131, genetik m\u00fchendisli\u011fi \u0131slah\u0131 ve protoplast f\u00fczyon \u0131slah\u0131 yer almaktad\u0131r. Bununla birlikte, her bir \u0131slah y\u00f6ntemi \u00e7ok say\u0131da b\u00fcy\u00fck \u00f6l\u00e7ekli EGT i\u00e7erik testi gerektirir. Islah s\u00fcrecinde EGT i\u00e7erik testinin \u00f6neminin daha \u00e7ok \u00f6rnekler aras\u0131ndaki i\u00e7eri\u011fi kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131rmak oldu\u011fu unutulmamal\u0131d\u0131r. \u015eu anda, EGT i\u00e7in tespit y\u00f6ntemleri aras\u0131nda y\u00fcksek performansl\u0131 s\u0131v\u0131 kromatografisi, y\u00fcksek performansl\u0131 kapiler elektroforez ve ince tabaka elektroforezi bulunmaktad\u0131r. En yayg\u0131n kullan\u0131lan y\u00f6ntem, karma\u015f\u0131k malzeme sistemlerinden EGT i\u00e7eri\u011fini do\u011fru bir \u015fekilde tespit edebilen y\u00fcksek performansl\u0131 s\u0131v\u0131 kromatografisidir. Bununla birlikte, y\u00fcksek performansl\u0131 s\u0131v\u0131 kromatografisinin bariz eksiklikleri vard\u0131r, yani farkl\u0131 numuneler i\u00e7in farkl\u0131 tespit ko\u015fullar\u0131n\u0131 ke\u015ffetmesi gerekir. Ayr\u0131ca, EGT'nin ge\u00e7 pik zaman\u0131 ve pahal\u0131 standart numuneler nedeniyle, \u00fcremede \u00e7ok say\u0131da numuneden y\u00fcksek verimli numunelerin taranmas\u0131, EGT'nin geli\u015ftirilmesini ve uygulama ara\u015ft\u0131rmas\u0131n\u0131 b\u00fcy\u00fck \u00f6l\u00e7\u00fcde engelleyen uzun tespit s\u00fcresine ve y\u00fcksek maliyete yol a\u00e7abilir. Bu nedenle, \u00f6rnekler aras\u0131ndaki EGT konsantrasyonunu do\u011fru bir \u015fekilde belirleyebilen y\u00fcksek verimli h\u0131zl\u0131 bir tespit y\u00f6nteminin olu\u015fturulmas\u0131 acildir.
\nG\u00fc\u00e7l\u00fc antioksidan \u00f6zellikleri ve iki de\u011ferlikli demir iyonlar\u0131na orta derecede indirgenebilirli\u011fi (havadaki oksijenle temastan etkilenmez veya zay\u0131f indirgenebilirlik nedeniyle indirgenmez) nedeniyle EGT iki de\u011ferlikli demir iyonlar\u0131yla reaksiyona girerek renksiz \u015felatlar olu\u015fturabilirken tiyosiyanat iyonlar\u0131 iki de\u011ferlikli demir iyonlar\u0131yla reaksiyona girerek k\u0131rm\u0131z\u0131 kompleksler olu\u015fturur. Bu \u00f6zelliklere dayanarak, demir tiyosiyanat bu \u00e7al\u0131\u015fmada indirgeyici ajan olarak se\u00e7ilmi\u015f ve ergotamin standard\u0131 ergotamin i\u00e7in y\u00fcksek verimli bir tespit sistemi kurmak \u00fczere demir tiyosiyanatla reaksiyona girmek i\u00e7in kullan\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Ayn\u0131 zamanda, y\u00fcksek verimli tespit sistemi farkl\u0131 Ganoderma lucidum su\u015flar\u0131n\u0131n EGT verimleri de\u011fi\u015ftirilerek do\u011frulanm\u0131\u015ft\u0131r. Bu \u00e7al\u0131\u015fman\u0131n sonu\u00e7lar\u0131 y\u00fcksek verimli EGT mikroorganizmalar\u0131n\u0131n taranmas\u0131 ve yeni y\u00fcksek verimli EGT su\u015flar\u0131n\u0131n \u0131slah\u0131 i\u00e7in yeni y\u00f6ntemler ve fikirler sa\u011flayacakt\u0131r.<\/p>\n
Ergothionein'in g\u00fc\u00e7l\u00fc indirgeyici fizikokimyasal \u00f6zelliklerine dayanarak, EGT tiyosiyanat demir sistemini olu\u015fturmadan \u00f6nce, alkali potasyum permanganat sistemi, bromokresol ye\u015fili sistemi, mavi \u015fi\u015fe metilen mavisi sistemi, guaiacol sistemi ve ferrik klor\u00fcr EGT sistemi olu\u015fturmak i\u00e7in deneyler yap\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Sonu\u00e7lar, alkali potasyum permanganat sisteminin d\u00fc\u015f\u00fck stabilite nedeniyle ba\u015far\u0131s\u0131z oldu\u011funu; bromokresol ye\u015fili sisteminin renk geli\u015fiminin pH ba\u011f\u0131ml\u0131l\u0131\u011f\u0131 nedeniyle ba\u015far\u0131s\u0131z oldu\u011funu; mavi \u015fi\u015fe metilen mavisi sisteminde, indirgenmi\u015f haldeki metilen mavisinin g\u00fc\u00e7l\u00fc indirgenebilirli\u011fi nedeniyle, havadaki oksijenle temas etti\u011finde kolayca metilen mavisine oksitlendi\u011fini ve bunun da herhangi bir fenomen olmaks\u0131z\u0131n deneyin ba\u015far\u0131s\u0131z olmas\u0131na neden oldu\u011funu; guaiacol sisteminin de g\u00fc\u00e7l\u00fc indirgenebilirlik ve oksijen temas\u0131ndan kaynaklanan parazit nedeniyle ba\u015far\u0131s\u0131z oldu\u011funu; ferrik klor\u00fcr sisteminin d\u00fc\u015f\u00fck renk olu\u015fturma nedeniyle ba\u015far\u0131s\u0131z oldu\u011funu g\u00f6stermi\u015ftir. EGT demir tiyosiyanat sistemi, EGT i\u00e7in y\u00fcksek verimli tespit y\u00f6ntemlerinin incelenmesi i\u00e7in kullan\u0131labilir.<\/p>\n
EGT tiyosiyanat demir tespit sisteminin yap\u0131m\u0131 s\u0131ras\u0131nda, test edilen numune s\u0131radan EGT ham ekstraksiyon y\u00f6ntemi, yani alkol \u00e7\u00f6keltme azot \u00fcfleme sabit hacim ekstraksiyonu kullan\u0131larak ekstrakte edildi\u011finde, ekstraksiyon \u00e7\u00f6zeltisindeki kal\u0131nt\u0131 fenolik maddelerin sistemin renk reaksiyonunu etkileyece\u011fi ve hassasiyetini azaltaca\u011f\u0131 bulunmu\u015ftur. Bu nedenle, azot \u00fcflemeli sabit hacim ekstraksiyonundan sonra, ham ekstraksiyon \u00e7\u00f6zeltisine bir kloroform fenol giderme ad\u0131m\u0131n\u0131n eklenmesi gerekir.
\nGanoderma lucidum, \u00c7in'de \u00e7e\u015fitli biyoaktif maddeler ve fizyolojik i\u015flevler i\u00e7eren geleneksel ve de\u011ferli bir t\u0131bbi mantard\u0131r. Ergothionein i\u00e7eri\u011fi bir\u00e7ok yenilebilir mantar aras\u0131nda nispeten y\u00fcksektir, ancak ticari olarak \u00fcretilen bir t\u00fcr olarak verimi hala d\u00fc\u015f\u00fckt\u00fcr. Bu nedenle, y\u00fcksek ergothionein \u00fcretimine sahip yeni bir Ganoderma lucidum t\u00fcr\u00fcn\u00fcn yeti\u015ftirilmesi b\u00fcy\u00fck \u00f6nem ve pratik uygulama de\u011feri ta\u015f\u0131maktad\u0131r. Yukar\u0131daki nedenlere dayanarak, laboratuvar\u0131m\u0131z protoplast f\u00fczyon rejenerasyonu, izolasyonu ve tan\u0131mlanmas\u0131 yoluyla bir grup s\u00f6zde f\u00fczyon \u00fcr\u00fcn\u00fc elde etmi\u015ftir. Bu y\u00f6ntemin do\u011frulama s\u00fcrecinde kullan\u0131lan Ganoderma lucidum f\u00fczyon \u00fcr\u00fcnlerinin t\u00fcm\u00fc bu kaynaktan elde edilmi\u015ftir.
\nBu \u00e7al\u0131\u015fmada olu\u015fturulan y\u00f6ntem EGT'nin fiziksel ve kimyasal \u00f6zelliklerine dayanmaktad\u0131r ve tespit sistemi hassas ve kararl\u0131d\u0131r. EGT \u00fcreten end\u00fcstriyel fermantasyon su\u015flar\u0131n\u0131n \u0131slah s\u00fcrecinde b\u00fcy\u00fck miktarlarda numunenin h\u0131zl\u0131 bir \u015fekilde kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131lmas\u0131 i\u00e7in uygundur. Teorik olarak, su\u015flar\u0131n b\u00fcy\u00fck \u00e7o\u011funlu\u011funda EGT i\u00e7eri\u011finin y\u00fcksek verimli h\u0131zl\u0131 tespitini sa\u011flamak, orijinal EGT ara\u015ft\u0131rmas\u0131n\u0131n s\u0131n\u0131rlamalar\u0131n\u0131 k\u0131rmak ve EGT'nin genel geli\u015fimi ve uygulama ara\u015ft\u0131rmas\u0131 i\u00e7in yeni y\u00f6ntemler ve fikirler sa\u011flamak i\u00e7in sadece basit \u00f6rnek EGT ekstraksiyon optimizasyonu gereklidir.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Research on High throughput Detection Method of Lingzhi Ergothionein Ergothioneine (EGT), also known as 2-thio-Lhistidine trimethyl inner salt, is a natural amino acid that is abundant in many animals and plants. It is only synthesized in some microorganisms (actinomycetes, streptomyces), fungi, and certain cyanobacteria, and cannot be synthesized by animal organisms themselves. The human body […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n