Endofitik bakterilerin da\u011f\u0131l\u0131m\u0131 ve Xiangmaidong'da farkl\u0131 b\u00fcy\u00fcme a\u015famalar\u0131nda steroidal saponin \u00fcreten su\u015flar\u0131n \u00f6n taramas\u0131
\nHubei maidong Liriope spicata var. prolifera Y.T. Ma olarak da bilinen Xiangmaidong, \u00c7in Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nde (2010 bask\u0131s\u0131) Shanmaidong'un kaynak bitkilerinden biridir. Steroid saponinler ana aktif bile\u015fenidir ve sapogenin temel iskeleti spirostan t\u00fcrevine aittir (27 karbon atomundan olu\u015fur). Spirostan yap\u0131s\u0131ndaki C25 konfig\u00fcrasyonuna ve F halkas\u0131n\u0131n siklik durumuna g\u00f6re, a\u015fa\u011f\u0131daki d\u00f6rt ana t\u00fcre ayr\u0131labilir: spirostanol (C25 S konfig\u00fcrasyonudur), izosterostanol (C25 R konfig\u00fcrasyonudur) ve furostanol (F halkas\u0131 a\u00e7\u0131k zincirli bir t\u00fcrevdir), modifiye spirostanol alkolleri (F halkas\u0131 be\u015f \u00fcyeli bir tetrahidrofuran halkas\u0131d\u0131r). Ophiopogon japonicus'tan, her ikisi de C25 (S) izomeri olan ana glikozitler diosgenin ve ruscogenin olmak \u00fczere on d\u00f6rt tip steroidal saponin izole edilmi\u015ftir. Bunlar aras\u0131nda, Ophiopogon japonicus'taki saponin C (Ls-S3) i\u00e7eri\u011fi nispeten y\u00fcksektir. Steroid saponinler \u00e7ok say\u0131da farmakolojik aktiviteye sahiptir ve kimyasal olarak sentezlenebilen birka\u00e7\u0131 d\u0131\u015f\u0131nda, \u00e7o\u011funlukla kimyasal ekstraksiyon yoluyla do\u011frudan geleneksel \u00c7in t\u0131bbi malzemelerinden elde edilirler. Xiangmaidong steroid saponinleri de bir istisna de\u011fildir. Bununla birlikte, uzun \u00fcretim d\u00f6ng\u00fcleri, tarlada s\u00fcrekli k\u0131rpma engelleri, d\u00fc\u015f\u00fck saponin i\u00e7eri\u011fi, y\u00fcksek ekstraksiyon maliyetleri ve \u00f6nemli \u00e7evre kirlili\u011fi gibi sorunlar nedeniyle, Xiangmaidong steroidal saponinlerinin s\u00fcrd\u00fcr\u00fclebilir \u00fcretimi ve tedariki k\u0131s\u0131tl\u0131d\u0131r. Bu nedenle, saponinleri b\u00fcy\u00fck miktarlarda haz\u0131rlamak i\u00e7in yeni yollar aramak gerekmektedir.<\/p>\n
Daha \u00f6nce, Dianzhong ve Huazhong binalar\u0131ndan steroidal saponin \u00fcretebilen endofitik bakterilerin izole edildi\u011fini bildiren \u00e7al\u0131\u015fmalar vard\u0131. Bundan esinlenen ara\u015ft\u0131rma ekibimiz, Xiangmaidong'dan steroidal saponinleri metabolize eden ve \u00fcreten endofitik bakteri su\u015flar\u0131n\u0131 izole etmeye ve ke\u015ffetmeye \u00e7al\u0131\u015fm\u0131\u015ft\u0131r. Saf k\u00fclt\u00fcr y\u00f6ntemleri ve 16SrDNA-PCRDGGE teknolojisini kullanarak, Xiangmaidong'un ilk ortaya \u00e7\u0131k\u0131\u015f, h\u0131zl\u0131 b\u00fcy\u00fcme ve olgun hasat d\u00f6nemlerinde \u00f6rneklerdeki (yumru veya k\u00f6kler) endofitik bakterilerin da\u011f\u0131l\u0131m\u0131n\u0131 analiz ettik ve tan\u0131mlad\u0131k. Ayn\u0131 zamanda, hedef su\u015flar\u0131 elde etmek ve steroidal saponinlerin \"fabrika, \u00f6l\u00e7ek ve h\u0131zl\u0131\" \u00fcretimi i\u00e7in teorik destek sa\u011flamak amac\u0131yla, elde edilen saf k\u00fclt\u00fcr su\u015flar\u0131n\u0131n saponin \u00fcretim yetene\u011fini \u00f6n de\u011ferlendirmek i\u00e7in renk reaksiyonu, TLC ve HPLC y\u00f6ntemleri kullan\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r.<\/p>\n
Bu \u00e7al\u0131\u015fmada, geleneksel mikrobiyal saf yeti\u015ftirme y\u00f6ntemleri kullan\u0131larak, farkl\u0131 b\u00fcy\u00fcme a\u015famalar\u0131ndaki Xiangmaidong k\u00f6k yumrular\u0131 ve lifli k\u00f6klerinden 15 cins ve 22 t\u00fcr endofitik bakteri izole edilmi\u015ftir. Bunlar aras\u0131nda 4 Bacillus t\u00fcr\u00fc ve 4 Staphylococcus t\u00fcr\u00fc, 2 Pseudomonas t\u00fcr\u00fc ve Salmonella, Enterobacter, Pseudoxanthomonas, Morganella, Agrobacterium, Microbacterium, Porphyromobacter, Acinetobacter, Lysinibacter ve Sphingosine dahil olmak \u00fczere kalan 12 cins vard\u0131. Sphingomonas, Sphingomonas ve Curtobacterium cinslerinde sadece birer bakteri t\u00fcr\u00fc bulunmaktad\u0131r.<\/p>\n
Bu \u00e7al\u0131\u015fma, 16SrDNA PCR DGGE tan\u0131mlamas\u0131 yoluyla, Xiangmaidong'un endofitik bakteri toplulu\u011fu yap\u0131s\u0131n\u0131n, ilk ortaya \u00e7\u0131k\u0131\u015f d\u00f6nemi, h\u0131zl\u0131 geni\u015fleme d\u00f6nemi ve yumrular\u0131n\u0131n olgun hasat d\u00f6nemi boyunca temelde ayn\u0131 oldu\u011funu ve su\u015f gruplar\u0131nda \u00e7ok az farkl\u0131l\u0131k oldu\u011funu ortaya koymu\u015ftur. Dizi hizalamas\u0131 yoluyla, izole edilen dizilerden 3 Bacillus t\u00fcr\u00fc ve 3 Staphylococcus t\u00fcr\u00fc, 2 Serratia t\u00fcr\u00fc ve 2 Pseudomonas t\u00fcr\u00fc dahil olmak \u00fczere 15 cins ve 21 bakteri t\u00fcr\u00fc ve Pseudomonas, Pectobacterium, Bordetella, Stenotrophomonas, Porphyromobacter, Curtobacterium, Enterobacter, Methylobacterium, nitrojen sabitleme dahil olmak \u00fczere kalan 11 cins tan\u0131mlanm\u0131\u015ft\u0131r. Sadece bir Azotobacter, Microbacterium ve Pseudoclavibacter su\u015fu bulunmaktad\u0131r. Yukar\u0131da bahsedilen 22 saf endofitik bakteri su\u015fu ile kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131ld\u0131\u011f\u0131nda, DGGE 7 yeni cins tan\u0131mlam\u0131\u015ft\u0131r: Serratia, Pectobacterium, Bordetella, Stenotrophomonas, Methylobacterium, Azotobacter ve Pseudomonas.<\/p>\n
Bu \u00e7al\u0131\u015fmada, saf yeti\u015ftirilebilir endofitik su\u015flar\u0131n saponin \u00fcretme kabiliyeti de\u011ferlendirilmi\u015f ve steroidal saponin \u00fcretme a\u00e7\u0131s\u0131ndan \u00f6nemli \u00f6zelliklere sahip \u00fc\u00e7 bakteri su\u015fu, Pseudoxanthomonas mexicana, Staphylococcus caprae ve Microbacterium testaceum, \u00f6nceden tan\u0131mlanm\u0131\u015ft\u0131r. HPLC tespit sonu\u00e7lar\u0131na g\u00f6re, bu \u00fc\u00e7 endofitik bakterinin t\u00fcm\u00fc 15.98, 57.64 ve 75.19 dakikal\u0131k zaman noktalar\u0131nda karakteristik pikler g\u00f6stermi\u015ftir, bu da fermantasyon \u00fcr\u00fcnlerindeki en az \u00fc\u00e7 saponinin ayn\u0131 yap\u0131ya sahip olabilece\u011fini ve bunun daha fazla deneysel do\u011frulama gerektirdi\u011fini g\u00f6stermektedir. \u015eu anda, steroidal saponinleri tespit etmek i\u00e7in iki ana strateji vard\u0131r: biri do\u011frudan tespit, di\u011feri ise b\u00f6l\u00fcnm\u00fc\u015f saponinlerin kalitatif ve kantitatif analizi yoluyla dolayl\u0131 tespittir. Ara\u015ft\u0131rmac\u0131lar Dioscorea nipponica, ararot, sisal ve zambak tomurcuklar\u0131ndaki dioscin i\u00e7eri\u011fini belirlemek i\u00e7in HPLC y\u00f6ntemini kullanm\u0131\u015flard\u0131r. Bu deneyde Xiangmaidong steroidal saponinlerinin standart ve izole edilmi\u015f saf \u00f6rneklerinin bulunmamas\u0131 nedeniyle, haz\u0131rlanan Xiangmaidong k\u00f6k\u00fc steroidal saponinleri (kar\u0131\u015f\u0131m) ge\u00e7ici olarak pozitif kontrol olarak kullan\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Ayn\u0131 tespit ko\u015fullar\u0131 alt\u0131nda ayn\u0131 zaman noktas\u0131nda karakteristik piklerin ortaya \u00e7\u0131k\u0131p \u00e7\u0131kmayaca\u011f\u0131 kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131larak, endofitik bakterilerin glikozit \u00fcretim \u00f6zellikleri \u00f6nceden tan\u0131mlanm\u0131\u015ft\u0131r. Gelecekte, laboratuvar\u0131m\u0131z fermantasyon \u00fcr\u00fcn\u00fc saponin \u00f6z\u00fct\u00fcn\u00fc daha da ay\u0131racak ve safla\u015ft\u0131racak ve daha do\u011fru karakterizasyon i\u00e7in k\u00fctle spektrometresi, n\u00fckleer manyetik rezonans ve di\u011fer y\u00f6ntemleri kullanacakt\u0131r.<\/p>\n
16SrDNA V6 \uff5e V8'in y\u00fcksek de\u011fi\u015fken b\u00f6lgesinin DGGE analizine dayanan ve steroidal saponin \u00fcretebilen saf k\u00fclt\u00fcrlenmi\u015f endofitik bakterilerin tarama sonu\u00e7lar\u0131yla birle\u015ftirilen bu deney, bir fenomen buldu: Xiangmaidong'un k\u00f6k yumrular\u0131n\u0131n h\u0131zl\u0131 geni\u015fleme d\u00f6neminde ve olgun hasat d\u00f6neminde, Meksika ps\u00f6do-sar\u0131 ps\u00f6domonas P. k\u00f6k yumrular\u0131ndan tespit edilebilir K\u00f6k yumrular\u0131n\u0131n ilk a\u015famas\u0131nda mexicana'n\u0131n varl\u0131\u011f\u0131 tespit edilmedi. Xiangmaidong'un k\u00f6k yumrular\u0131ndaki steroidal saponinlerin biyok\u00fctlesinin ve i\u00e7eri\u011finin ba\u015flang\u0131\u00e7 a\u015famas\u0131ndan itibaren kademeli olarak artt\u0131\u011f\u0131 ve hasad\u0131n h\u0131zl\u0131 geni\u015fleme ve olgunluk a\u015famalar\u0131nda zirveye ula\u015ft\u0131\u011f\u0131 do\u011frulanm\u0131\u015ft\u0131r. Bu fenomen Meksika'daki Pseudomonas aeruginosa'n\u0131n Ophiopogon japonicus yumrular\u0131nda steroidal saponinlerin birikiminde pozitif korelasyonlu bir rol oynad\u0131\u011f\u0131 anlam\u0131na m\u0131 gelmektedir? Bu da daha fazla deneysel do\u011frulama gerektirmektedir.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Endofitik bakterilerin da\u011f\u0131l\u0131m\u0131 ve farkl\u0131 b\u00fcy\u00fcme a\u015famalar\u0131nda Xiangmaidong'da steroidal saponin \u00fcreten su\u015flar\u0131n \u00f6n taramas\u0131 Hubei maidong Liriope spicata var. prolifera Y.T. Ma olarak da bilinen Xiangmaidong, \u00c7in Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nde (2010 bask\u0131s\u0131) Shanmaidong'un kaynak bitkilerinden biridir. Steroid saponinler ana aktif [...]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n