Molek\u00fcler yerle\u015ftirme ve enzim inhibisyon kineti\u011fine dayanarak, Rhodiola rosea'dan ekstrakte edilen \u03b1 - glukozidaz\u0131n in vitro inhibit\u00f6r aktivitesini ara\u015ft\u0131r\u0131n. diyabet, iki t\u00fcre ayr\u0131labilen yayg\u0131n bir hastal\u0131kt\u0131r: diyabet tip 1 (T1DM) ve diyabet tip 2 (T2DM). T2DM, diyabet hastalar\u0131n\u0131n 90%'sinden fazlas\u0131n\u0131 olu\u015fturur ve esas olarak ins\u00fclin direnci ve anormal ins\u00fclin salg\u0131lanmas\u0131 nedeniyle artan postprandiyal kan glikozundan kaynaklan\u0131r. Alfa glukozidaz, postprandiyal hiperglisemiye neden olan ana enzimlerden biridir ve alfa glukozidaz aktivitesini inhibe etmek, postprandiyal hiperglisemiyi kontrol etmenin ve T2DM'yi tedavi etmenin ana yolu haline gelmi\u015ftir. G\u00fcn\u00fcm\u00fczde, klinik uygulamada yayg\u0131n olarak kullan\u0131lan alfa glukozidaz inhibit\u00f6rleri akarboz, miglitol vb.dir. Y\u00fcksek inhibit\u00f6r aktiviteye sahip olmalar\u0131na ra\u011fmen pahal\u0131d\u0131rlar ve haz\u0131ms\u0131zl\u0131k gibi bir dizi gastrointestinal reaksiyona e\u011filimlidirler. Bitkilerden elde edilen do\u011fal \u00fcr\u00fcnler, d\u00fc\u015f\u00fck toksisiteleri ve yan etkileri nedeniyle y\u00fcksek kaliteli terap\u00f6tik ajan kaynaklar\u0131 haline gelmi\u015ftir. Bu nedenle, do\u011fal aktif maddelerden g\u00fcvenli ve d\u00fc\u015f\u00fck advers reaksiyonlu alfa glukozidaz inhibit\u00f6rlerinin ara\u015ft\u0131r\u0131lmas\u0131 bir ara\u015ft\u0131rma noktas\u0131 haline gelmi\u015ftir.<\/p>\n
G\u0131da ve ila\u00e7 homolojisine sahip geleneksel \u00c7in t\u0131bbi malzemelerinden biri olan Rhodiola sachalinensis, salidroside, kate\u015fin, tirosol ve di\u011fer aktif bile\u015fenleri i\u00e7erir. \u015eu anda, yurti\u00e7i ve yurtd\u0131\u015f\u0131ndaki ara\u015ft\u0131rmalar esas olarak anti hipoksi, anti apoptoz, anti-t\u00fcm\u00f6r, stres hasar\u0131n\u0131 hafifletme vb. \u00fczerine odaklanmaktad\u0131r. Baz\u0131 \u00e7al\u0131\u015fmalar ayr\u0131ca diyabet kemirgen modellerinde belirli bir rol\u00fc oldu\u011funu ve 5 '- adenozin monofosfat ba\u011f\u0131ml\u0131 protein kinaz (AMPK) ile ilgili sinyal yollar\u0131n\u0131 aktive ederek diyabet farelerinde hiperglisemi, hiperlipidemi ve idrar \u015fekeri semptomlar\u0131n\u0131 hafifletebilece\u011fini g\u00f6stermektedir. Son zamanlarda, ara\u015ft\u0131rmac\u0131lar Rhodiola \u00f6z\u00fct\u00fcn\u00fcn farelerde yemek sonras\u0131 kan \u015fekeri seviyelerini \u00f6nemli \u00f6l\u00e7\u00fcde azaltabildi\u011fini ve aktif bile\u015fenlerinin in vitro olarak belirli bir derecede inhibit\u00f6r etki sergiledi\u011fini, ancak spesifik inhibisyon mekanizmas\u0131n\u0131n net olmad\u0131\u011f\u0131n\u0131 bulmu\u015flard\u0131r. Ekibimizin \u00f6n ara\u015ft\u0131rmas\u0131, Rhodiola rosea'daki polifenolik maddelerin belirli in vitro alfa glukozidaz inhibit\u00f6r aktivitesine sahip oldu\u011funu buldu. Yukar\u0131daki ara\u015ft\u0131rma ge\u00e7mi\u015fine dayanan bu \u00e7al\u0131\u015fma, Rhodiola rosea \u00f6z\u00fct\u00fcn\u00fcn alfa glukozidaz \u00fczerindeki inhibit\u00f6r etkisini g\u00f6rselle\u015ftirilmi\u015f bir \u015fekilde ara\u015ft\u0131rmak i\u00e7in enzim inhibisyon kineti\u011fi, UHPLC-QE-MS ve molek\u00fcler yerle\u015ftirme teknolojisini birle\u015ftirmektedir. Ara\u015ft\u0131rma, Rhodiola rosea'n\u0131n daha fazla geli\u015ftirilmesini ve kullan\u0131lmas\u0131n\u0131 te\u015fvik etmek amac\u0131yla hipoglisemik ila\u00e7lar\u0131n ve sa\u011fl\u0131kl\u0131 g\u0131dalar\u0131n geli\u015ftirilmesi i\u00e7in teorik referans sa\u011flamay\u0131 ama\u00e7lamaktad\u0131r.<\/p>\n
<\/p>\n
<\/p>\n
Alfa glukozidaz v\u00fccutta ince ba\u011f\u0131rsak mukozas\u0131n\u0131n f\u0131r\u00e7a s\u0131n\u0131r\u0131nda bulunur ve oligosakkaritleri veya disakkaritleri monosakkaritlere par\u00e7alayabilir. Aktivitesinin engellenmesi karbonhidrat hidrolizini ve glikoz \u00fcretim h\u0131z\u0131n\u0131 yava\u015flatabilir, b\u00f6ylece ince ba\u011f\u0131rsak taraf\u0131ndan glikoz emilimini ve yemek sonras\u0131 kan glikozunu azaltabilir. Ara\u015ft\u0131rmalar y\u0131ld\u0131z elmas\u0131, fil baca\u011f\u0131 muzu, siyah kurt \u00fcz\u00fcm\u00fc, Schisandra chinensis, mor yer elmas\u0131 ve Guizhou karahindibas\u0131 gibi \u00e7e\u015fitli bitkilerden elde edilen \u00f6z\u00fctlerin hepsinin alfa glukozidaza kar\u015f\u0131 inhibit\u00f6r aktiviteye sahip oldu\u011funu g\u00f6stermektedir. Yar\u0131 maksimal inhibit\u00f6r konsantrasyon (IC50), inhibit\u00f6rlerin enzimler \u00fczerindeki inhibit\u00f6r etkisini de\u011ferlendirmek i\u00e7in kullan\u0131labilir. IC50 ne kadar k\u00fc\u00e7\u00fckse, inhibit\u00f6r aktivite o kadar y\u00fcksektir. Ekibin \u00f6nceki ara\u015ft\u0131rmas\u0131, Rhodiola polifenollerinin alfa glukozidaz \u00fczerinde 2,83 mg\/mL IC50 ile iyi bir inhibit\u00f6r etkiye sahip oldu\u011funu g\u00f6stermi\u015ftir. Bu deneyde elde edilen RCE IC50 de\u011feri 1,538 mg\/mL olup, bu de\u011fer sadece akarbozdan de\u011fil, ayn\u0131 zamanda Rhodiola polifenollerinden de daha d\u00fc\u015f\u00fckt\u00fcr. Bunun nedeni RCE'deki flavonoidler, organik asitler ve di\u011fer maddelerin varl\u0131\u011f\u0131 olabilir. \u0130nhibit\u00f6rler taraf\u0131ndan enzim inhibisyonu t\u00fcrleri geri d\u00f6n\u00fc\u015f\u00fcml\u00fc inhibisyon ve geri d\u00f6n\u00fc\u015f\u00fcms\u00fcz inhibisyon olarak ikiye ayr\u0131labilir. Bu \u00e7al\u0131\u015fmada elde edilen RCE ve \u03b1 - glukozidaz, inhibit\u00f6r ve enzim aras\u0131nda kovalent olmayan ba\u011flanma ile karakterize edilen ve fiziksel y\u00f6ntemlerle enzim aktivitesini geri kazand\u0131rabilen tersinir inhibisyondur. Tersinir inhibisyon t\u00fcrleri ayr\u0131ca d\u00f6rt kategoriye ayr\u0131labilir: yar\u0131\u015fmal\u0131 inhibisyon, yar\u0131\u015fmal\u0131 olmayan inhibisyon, anti yar\u0131\u015fmal\u0131 inhibisyon ve kar\u0131\u015f\u0131k inhibisyon. Kar\u0131\u015f\u0131k inhibisyon t\u00fcrleri rekabet\u00e7i ve rekabet\u00e7i olmayan kar\u0131\u015f\u0131k inhibisyonu i\u00e7erir. Bu t\u00fcr\u00fcn \u00f6zelli\u011fi, inhibit\u00f6r konsantrasyonundaki bir art\u0131\u015f\u0131n enzimatik reaksiyonun maksimum reaksiyon h\u0131z\u0131n\u0131 (Vmax) azaltmas\u0131 ve Michaelis sabitini (Km) art\u0131rmas\u0131d\u0131r. Bu \u00e7al\u0131\u015fma, RCE konsantrasyonundaki bir art\u0131\u015f\u0131n Vmax'ta bir azalmaya yol a\u00e7t\u0131\u011f\u0131n\u0131 g\u00f6stermektedir Km'deki art\u0131\u015f yukar\u0131daki \u00f6zelliklerle tutarl\u0131d\u0131r, bu nedenle RCE'nin \u03b1-glukozidaz \u00fczerindeki inhibisyon tipi, Rhodiola \u00f6z\u00fct\u00fcn\u00fcn etkili bir do\u011fal \u03b1-glukozidaz inhibit\u00f6r\u00fc oldu\u011funu g\u00f6steren karma bir rekabet\u00e7i ve rekabet\u00e7i olmayan inhibisyon tipi olarak belirlenmi\u015ftir. RCE, Rhodiola rosea'dan elde edilen polifenoller, Schisandra chinensis'ten elde edilen polisakkaritler ve Scenedesmus macrophylla'dan elde edilen polisakkaritler taraf\u0131ndan \u03b1-glukozidaz\u0131n inhibisyon tipleriyle tutarl\u0131d\u0131r. Bununla birlikte, hangi bile\u015fiklerin rekabet\u00e7i inhibisyona ve hangi bile\u015fiklerin rekabet\u00e7i olmayan inhibisyona ait oldu\u011funun a\u00e7\u0131kl\u0131\u011fa kavu\u015fturulmas\u0131 ve daha fazla ara\u015ft\u0131rmaya ihtiya\u00e7 vard\u0131r. RCE iyi bir \u03b1 - glukozidaz inhibit\u00f6r aktivitesine sahiptir, ancak etkinin in vivo olarak anlaml\u0131 olup olmad\u0131\u011f\u0131n\u0131 do\u011frulamak i\u00e7in daha fazla hayvan modeline ihtiya\u00e7 vard\u0131r. \u015eu anda, ba\u015fta bira mayas\u0131, Aspergillus niger, termofilik Bacillus subtilis ve Leuconostoc enterica olmak \u00fczere bir\u00e7ok alfa glukozidaz kayna\u011f\u0131 bulunmaktad\u0131r. Farkl\u0131 kaynaklardan elde edilen \u03b1-glukozidaz\u0131n \u00f6zellikleri b\u00fcy\u00fck \u00f6l\u00e7\u00fcde farkl\u0131l\u0131k g\u00f6stermektedir ve bu \u00e7al\u0131\u015fmada kullan\u0131lan \u03b1-glukozidaz bira mayas\u0131ndan elde edilmi\u015ftir. Bu nedenle, RCE'nin di\u011fer kaynaklardan gelen enzimler \u00fczerinde ayn\u0131 inhibit\u00f6r etkiye sahip olup olmad\u0131\u011f\u0131n\u0131 belirlemek i\u00e7in daha fazla ara\u015ft\u0131rmaya ihtiya\u00e7 vard\u0131r.
\nUHPLC-QE-MS h\u0131z ve do\u011fruluk \u00f6zelliklerine sahiptir ve karma\u015f\u0131k \u00c7in t\u0131bbi malzemelerindeki bile\u015fiklerin hedef d\u0131\u015f\u0131 analizi i\u00e7in kullan\u0131labilir. Bu \u00e7al\u0131\u015fmada RCE analiz edilmi\u015f ve negatif iyon modunda 263 bile\u015fik ve pozitif iyon modunda 982 bile\u015fik dahil olmak \u00fczere veri taban\u0131 ile kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131larak 1245 bile\u015fik tan\u0131mlanm\u0131\u015ft\u0131r. Rhodiola rosea'n\u0131n aktif bile\u015fenlerinin ekstraksiyonu i\u00e7in ana \u00e7\u00f6z\u00fcc\u00fcler etanol ve sudur. Saf su ile kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131r\u0131ld\u0131\u011f\u0131nda, organik \u00e7\u00f6z\u00fcc\u00fclerin sulu \u00e7\u00f6zeltileri daha fazla bile\u015fi\u011fi ekstrakte edebilir. Sulu ekstrakttaki gallik asit i\u00e7eri\u011fi alkol ekstrakt\u0131ndakinden daha y\u00fcksekken, tirozol, klorojenik asit ve tanen i\u00e7eri\u011fi su alkol ekstrakt\u0131ndakinden daha d\u00fc\u015f\u00fckt\u00fcr. Bu nedenle, daha fazla bile\u015fik elde etmek amac\u0131yla, bu deneyde RCE ekstraksiyonu haz\u0131rl\u0131\u011f\u0131 i\u00e7in \u00e7\u00f6z\u00fcc\u00fc olarak 50% etanol kullan\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Bununla birlikte, tek ekstraksiyon \u00e7\u00f6z\u00fcc\u00fcs\u00fc nedeniyle, tespit edilen bile\u015fikler mutlaka Rhodiola rosea'n\u0131n t\u00fcm bile\u015fikleri olmayabilir ve hala ekstrakte edilemeyen veya tan\u0131mlanamayan baz\u0131 bile\u015fikler vard\u0131r. Bu nedenle, farkl\u0131 ekstraksiyon \u00e7\u00f6z\u00fcc\u00fcleriyle daha fazla kar\u015f\u0131la\u015ft\u0131rmal\u0131 deney yap\u0131lmas\u0131 gerekmektedir. Zakharenko'nun ara\u015ft\u0131rmas\u0131 Rhodiola rosea'daki ana aktif bile\u015fenlerin salidrosid, luteolin, kate\u015fin, kuersetin, bitkisel ekstrakt ve kate\u015fin oldu\u011funu g\u00f6stermektedir. RCE y\u00fcksek d\u00fczeyde luteolin ve kuersetin i\u00e7erdi\u011finden, bu \u00e7al\u0131\u015fman\u0131n sonu\u00e7lar\u0131yla tutarl\u0131d\u0131r. Molek\u00fcler yerle\u015ftirme, k\u00fc\u00e7\u00fck molek\u00fcll\u00fc ligandlar\u0131n resept\u00f6r proteinlerine ba\u011flan\u0131p ba\u011flanamayaca\u011f\u0131n\u0131 ve ilgili ba\u011flanma kuvvetlerini tahmin edebilir. Bu \u00e7al\u0131\u015fmada, UHPLC-QE-MS'den elde edilen y\u00fcksek i\u00e7erikli 20 bile\u015fik \u03b1-glukozidaz ile kenetlenmi\u015ftir. Sonu\u00e7lar, luteolin, salidrosid, kaempferol, (-) - epikate\u015fin 3-O-gallat, kafeik asit, L-malik asit, (+) - epikate\u015fin, kuersetin, (-) - eritrotro-anetol glikol 1-glukozit, 3-hidroksi-4,6-heptyne-1-il 1-glukozit ve tirozol dahil olmak \u00fczere 11 bile\u015fi\u011fin \u03b1 - glukozidaza ba\u011flanabildi\u011fini g\u00f6stermi\u015ftir. Bunlar aras\u0131nda kafeik asit en fazla hidrojen ba\u011f\u0131n\u0131 olu\u015fturmu\u015ftur. His-515, Arg-437, Glu-432 ve His-348 kal\u0131nt\u0131lar\u0131na ba\u011flanabilir. (+) - Epikate\u015fin, en d\u00fc\u015f\u00fck ba\u011flanma enerjisi (-17,08 kJ\/mol) ile Asn-443 ve His-515 ile en iyi ba\u011flanma aktivitesine sahiptir; PNPG'nin \u03b1-glukozidaz ile kenetlenmesi, Arg-437 ve Glu-432'nin iki ba\u011flanma b\u00f6lgesi oldu\u011funu ortaya koymu\u015ftur. Kafeik asit PNPG, Arg-437 ve Glu-432 ile ayn\u0131 ba\u011flanma b\u00f6lgelerini payla\u015f\u0131rken, L-malik asit, kuersetin ve tirozol PNPG, Arg-437 ile ayn\u0131 ba\u011flanma b\u00f6lgesini payla\u015fmaktad\u0131r. Bu nedenle, kafeik asit, L-malik asit, kuersetin ve tirozol\u00fcn \u03b1-glukozidaz \u00fczerindeki inhibisyon t\u00fcrlerinin rekabet\u00e7i inhibisyon olabilece\u011fi, di\u011fer alt\u0131 bile\u015fi\u011fin ise rekabet\u00e7i olmayan inhibisyon oldu\u011fu sonucuna var\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. Bununla birlikte, inhibisyon t\u00fcrlerini belirlemek i\u00e7in bile\u015fiklerin daha fazla safla\u015ft\u0131r\u0131lmas\u0131 ve Lineweaver Burk kar\u015f\u0131l\u0131kl\u0131 grafikleri gerekmektedir.
\n\u00d6zetle, bu \u00e7al\u0131\u015fmada RCE'nin \u03b1-glukozidaz \u00fczerindeki inhibit\u00f6r etkisi enzim inhibisyon kineti\u011fi, UHPLCQE-MS ve molek\u00fcler kenetlenme teknikleri arac\u0131l\u0131\u011f\u0131yla g\u00f6rselle\u015ftirilmi\u015f bir \u015fekilde ara\u015ft\u0131r\u0131lm\u0131\u015ft\u0131r. \u0130nhibisyon tipi, rekabet\u00e7i ve rekabet\u00e7i olmayan inhibisyonun kar\u0131\u015f\u0131k bir tipiydi ve (+) - epikate\u015fin ile \u03b1 - glukozidaz aras\u0131ndaki ba\u011flanma aktivitesi RCE'de en iyisiydi. Bu makale, do\u011fal bir alfa glukozidaz inhibit\u00f6r\u00fc olarak RCE'nin geli\u015ftirilmesi ve Rhodiola kaynaklar\u0131n\u0131n kullan\u0131m\u0131 i\u00e7in temel ara\u015ft\u0131rma sa\u011flamaktad\u0131r.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Based on molecular docking and enzyme inhibition kinetics, explore the inhibitory activity of \u03b1 – glucosidase in vitro extracted from Rhodiola rosea. diabetes is a common disease, which can be divided into two types: diabetes type 1 (T1DM) and diabetes type 2 (T2DM). T2DM accounts for more than 90% of diabetes patients, mainly caused by […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n