Farklı kökenlerden Platycodon grandiflorum'un HPLC parmak izi ve kimyasal desen tanıma üzerine çalışma
Platycodon grandiflorum (Jacq.) A.DC. hem gıda hem de ilaç olarak kullanılabilen önemli bir şifalı bitkidir. Platycodon grandiflorum familyasından bir bitki olan Platycodon grandiflorum (Jacq.) A.DC.'nin kurutulmuş köklerinden elde edilir. Klinik uygulamada yaygın olarak öksürük, balgam, göğüste sıkışma, boğaz ağrısı, ses kısıklığı ve akciğerlerden gelen irin akıntısı için kullanılır. Bu tür, güneyde Guangdong ve Guangxi'den batı Sichuan'a, doğuda Japonya ve Kore'ye ve kuzeyde Sibirya'ya kadar geniş bir alana yayılmıştır. Platycodon grandiflorum Kuzeydoğu, Doğu, Orta ve Güneybatı Çin'de yaygın olarak yetiştirilir ve tıbbi malzemeleri çoğunlukla yetiştirme ve üretimden gelir. İç Moğolistan'daki Chifeng Şehrindeki ekim alanı en büyüğüdür ve yıllık yaklaşık 50000 ila 70000 mu ekim alanı ile toplam ulusal üretimin yaklaşık 50% ila 60%'sini oluşturmaktadır. Önceki çalışmalar Platycodon grandiflorum'un saponinler, flavonoidler ve fenolik asitler gibi çeşitli bileşenler içerdiğini göstermiştir. Bunlar arasında saponinler, Platycodon grandiflorum'da öksürüğün giderilmesi ve balgamın yok edilmesi için ana aktif bileşenlerdir. Şu anda, Platycodon grandiflorum'dan 70'ten fazla saponin bileşiği izole edilmiştir.
Bu nedenle, Platycodon grandiflorus için ana saponin bileşenlerine dayalı bilimsel ve makul bir kalite kontrol yöntemi oluşturmak, klinik uygulama ve yeni ilaç geliştirme için son derece gereklidir. Önceki çalışmalar çoğunlukla Platycodon grandiflorum'daki kimyasal bileşenlerin ayrıştırılmasına ve çok az sayıda saponin bileşeninin belirlenmesine odaklanmıştır. Bazı çalışmalarda evaporatif ışık saçılım dedektörleriyle donatılmış yüksek performanslı sıvı kromatografisi kullanılarak parmak izi spektrumları oluşturulmuştur, ancak parmak izi spektrumları oluşturmak ve kimyasal örüntü tanıma kullanarak Platycodon grandiflorum'un kalite kontrolünü ve değerlendirmesini araştırmak için ultraviyole görünür ışık dedektörleriyle birlikte yüksek performanslı sıvı kromatografisinin kullanımına ilişkin herhangi bir rapor bulunmamaktadır. Çalışmada YMC Hydrosphere C18 analitik kromatografi kolonu (250 × 4,6 mm, 5 μm), degrade elüsyon için mobil fazlar olarak su ve asetonitril ile 210 nm tespit dalga boyu kullanılmıştır. Farklı kökenlerden gelen 15 parti Platycodon grandiflorum'un HPLC parmak izi spektrumları oluşturulmuştur (Tablo 2). Benzerlik değerlendirmesi, küme analizi, temel bileşen analizi ve ortogonal kısmi en küçük kareler diskriminant analizi gibi kimyasal örüntü tanıma yöntemleri, farklı kökenlerden Platycodon grandiflorum'un kalite ve kontrol yöntemlerini analiz etmek ve değerlendirmek için kullanılmıştır.

Platycodon grandiflorum hem ilaç hem de gıda olarak kullanılabilen büyük bir şifalı bitkidir ve ana etken maddesi platycodon saponinlerdir. Bu bitkinin kalite değerlendirmesi ve kalite kontrol yöntemleri büyük önem taşımaktadır. Bu çalışmada Platycodon grandiflorus'taki ana saponin bileşenlerinin HPLC parmak izi spektrumları oluşturulmuş ve bunlardan 7 tanesi tanımlanmıştır. Benzerlik değerlendirmesi, küme analizi, temel bileşen analizi ve ortogonal kısmi en küçük kareler diskriminant analizi gibi çeşitli kimyasal örüntü tanıma yöntemlerini birleştirerek, yalnızca içerik belirleme veya parmak izi spektrumlarına dayanan mevcut kalite değerlendirme ve kalite kontrol yöntemleriyle karşılaştırıldığında, yalnızca Platycodon grandiflorus tıbbi kalitesinin tutarlılığı etkili bir şekilde değerlendirilmekle kalmaz, aynı zamanda Platycodon grandiflorus tıbbi malzemelerindeki kalite farklılıklarına katkıda bulunan ana faktörler de aydınlatılabilir ve Platycodon grandiflorus'un kalite değerlendirmesi ve kalite kontrolü için daha zengin bilgiler sağlanabilir.

Kimyasal desen tanıma verileri parmak izi spektrumlarının kromatografik pik alanından gelir, bu nedenle parmak izi spektrumlarının kalitesi kimyasal desenlerin analiz sonuçlarını doğrudan etkiler. İyi bir parmak izi spektrumu oluşturmak için bu çalışmada numune hazırlama yöntemi, tespit dalga boyu, mobil faz bileşimi ve kolon sıcaklığı araştırılmış ve optimize edilmiştir. Sonuç olarak, Çin Farmakopesi'nin 2015 baskısına göre optimize edilen numune hazırlama yönteminin çok sayıda platikodon saponin bileşeni elde edebileceği bulunmuştur. Metanol suyu, asetonitril suyu, asetonitril formik asit suyu ve asetonitril fosforik asit suyu gibi mobil faz sistemlerinin yanı sıra farklı kromatografik kolon sıcaklıkları ve tespit dalga boyu koşulları incelenerek, mobil faz olarak asetonitril suyu kullanmanın ve 35 ℃'de 210 nm'lik bir tespit dalga boyu seçmenin, kararlı taban çizgisi, iyi kromatografik pik ayrımı ve genel olarak yüksek kalitede parmak izi spektrumları elde edebileceği bulunmuştur.

Sonuçlardan, 15 parti Platycodon grandiflorus'un parmak izi spektrumlarının benzerliğinin 0.927 ila 0.991 arasında değiştiği görülebilir, bu da farklı üretim alanlarından gelen ekili ve yabani Platycodon grandiflorus arasında yüksek bir kalite benzerliği olduğunu gösterir. Kümeleme analizi ve temel bileşen analizi, 15 parti Platycodon grandiflorus örneğini farklı kategorilere ayırabilir; bu da bu çalışmada oluşturulan yöntemin yalnızca Platycodon grandiflorus tıbbi kalitesinin tutarlılığını değil, aynı zamanda Platycodon grandiflorus tıbbi malzemelerinin farklılıklarını da değerlendirebileceğini göstermektedir. OPLS-DA, örnek farklılıklarının diskriminant analizi için yaygın olarak kullanılan denetimli bir diskriminant analizi istatistiksel yöntemidir. Deneysel sonuçlar, 6, 9, 13, 18 ve 20 numaralı kromatografik piklerin farklı kökenlerden gelen Platycodon grandiflorum'un kalite farklılıkları üzerinde önemli bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir. Bu çalışmada, küme analizi ve temel bileşen analizi yabani örnekleri ve ekili çeşitleri ayrı ayrı kümeleyerek yabani örnekler ve ekili örnekler arasında bileşenlerin dağılımında belirli farklılıklar olduğunu göstermiştir. OPLS-DA analiz sonuçlarına göre, üç yabani örneğin parmak izi spektrumlarındaki 6 numaralı kromatografik pikin bağıl pik alanının 0.064% ile 0.088% arasında değiştiği ve bu değerin ekili çeşitten 0.012% ile 0.056% arasında daha yüksek olduğu sonucuna varılabilir; 13. kromatografik pikin bağıl pik alanı 0.059% ile059% ile 0,182% arasında değişmektedir, bu da ekili çeşidin 0,018% ile 0,046% arasındaki değerinden daha yüksektir; 9. kromatografik pikin bağıl pik alanı 0,044% ile 0,056% arasında değişmektedir, bu da ekili çeşidin 0,011% ile 0,032% arasındaki değerinden daha yüksektir; 15, 18 ve 20 numaralı kromatografik pikler de aynı eğilimi göstermiştir. Bu nedenle, bu bileşenlerin pik alanlarındaki küçük farklılıklar yabani örnekler ve ekili çeşitler arasındaki kümelenme farklılıklarının ana nedeni olabilir.

Özetle, bu çalışmada ülke genelinde farklı bölgelerden gelen Platycodon grandiflorus örneklerinin kalitesini araştırmak ve analiz etmek için kimyasal örüntü tanıma teknolojisiyle birlikte parmak izi spektroskopisi kullanılmış ve farklı bölgelerden gelen Platycodon grandiflorus'ta farklılıklara neden olan karakteristik bileşenler taranmıştır. Bu, Platycodon grandiflorus'un kalite kontrolü ve sonraki gelişimi için bilimsel referans ve deneysel temel sağlar.