Perilla frutescens yaprakları ve Cycas alba yaprakları arasındaki kalite farklılıklarının ön kolon türevlendirme GC-MS teknolojisine dayalı olarak araştırılması
Perilla frutescens (L.) Britt. ballıbabagiller (Lamiaceae) familyasından Perilla cinsine ait bir yıllık dik otsu bir bitkidir. Tarih boyunca önemli bitkisel ilaçlar, her iki tarafı da tamamen mor olan veya yeşil bir yüzü ve mor bir sırtı olan yapraklara "Su" veya "Perilla" olarak atıfta bulunurken, yaprakları tamamen yeşil olanlara "Yan" veya "Bai Su" denir. Her ikisi de sebze olarak tüketilebilir, ancak kullanımlarında hala bazı farklılıklar vardır. Perilla frutescens, yüksek doğal pigment içeriği nedeniyle doğal gıda renklendirici maddeler alanında yaygın olarak kullanılmaktadır. Çin Farmakopesi'nde (2020 baskısı) Perilla frutescens yapraklarının özelliklerinin "üst yüzeyde iki tarafı mor veya yeşil, alt yüzeyde mor" olarak tanımlanmasına atıfta bulunarak, Perilla frutescens'in otantik Perilla frutescens tıbbi malzemelerinin bir bitki kaynağı olduğu sonucuna varılabilir. Beyaz Su sadece sebze olarak değil, aynı zamanda gıda koruyucusu olarak da kullanılabilir. 1970'lerde "Flora of China" yabancı taksonomist Elmer Drew Merrill'in görüşüne atıfta bulunarak "Perilla frutescens" ve "White Su "yu tek bir tür olarak birleştirmiş ve orijinal varyantı P Frutescens var. Frutescens olarak adlandırmıştır. 1980'lerde Çin tıbbı akademisyenleri, araştırmalarına ve Perilla frutescens ile Paeonia lactiflora frutescens var. arguta arasındaki etkinlik farklılıklarına dayanarak "Perilla frutescens "i P. frutescens olarak adlandırmayı önerdiler ， 'Bai Su'nun adı P frutescens var. frutescens ， Ve Liu ve arkadaşları, tarla gözlemleri ve yetiştirme deneyleri yoluyla, ekimden sonra tüm perilla tohumlarının hala perilla olduğunu, ekimden sonra ise beyaz perilla tohumlarının tüm yapraklarının her iki tarafta da yeşil olduğunu ve herhangi bir varyasyon bulunmadığını bulmuşlardır. Perilla frutescens bitkilerinin sınıflandırılmasında hala bazı tartışmalar olduğu ve ilgili akademisyenlerin Perilla frutescens ve Cymbidium'un sınıflandırılması için temel olarak güvenilir ve evrensel olarak uygulanabilir özellikleri sürekli olarak araştırmaları gerektiği görülebilir.
Perilla frutescens (L.) Britt. dış soğukluğu giderme, qi dolaşımını teşvik etme ve mideyi düzenleme etkilerine sahip olan Perilla frutescens'in kurutulmuş bir yaprağıdır (veya yumuşak dalları ile). Genellikle soğuk algınlığı, nezle, öksürük, bulantı, hamilelik sırasında kusma ve balık ve yengeç zehirlenmesi tedavisinde kullanılır. Çin Florası Perilla frutescens ve Perilla frutescens'i tek bir tür olarak birleştirdiğinden, Perilla frutescens yapraklarının kaynak bitkileri de Perilla frutescens'i içermelidir. Bununla birlikte, Perilla frutescens yaprakları ile Perilla frutescens yaprakları arasında görünüm, kimyasal bileşim ve diğer yönlerden önemli farklılıklar vardır. Li ve arkadaşları, Çin'in çeşitli bölgelerinden farklı Perilla frutescens germplazmları toplamış, ekimden sonra morfolojik özelliklerini gözlemleyip kaydetmiş ve GC-MS teknolojisini kullanarak kimyasal türlerini belirlemiştir. Sonuçlar, Perilla frutescens yapraklarının çoğunlukla iki taraflı yeşil ve PK (mor keton) tipi olduğunu, Perilla frutescens yapraklarının ise çoğunlukla iki taraflı mor ve PA (mor aldehit) tipi olduğunu göstermiştir. İkisi arasında yaprak boyutu, yaprak düzlüğü, yaprak kenarı ve diğer morfolojik özellikler açısından önemli farklılıklar vardı; Dai ve ark. HPLC teknolojisini kullanarak Perilla frutescens yaprakları ve Perilla frutescens yapraklarındaki fenolik asit içeriğini karşılaştırdı ve Perilla frutescens yapraklarındaki protokateşuik aldehit, kafeik asit, ferulik asit ve rosmarinik asit içeriğinin Perilla frutescens yapraklarından daha yüksek olduğunu buldu; Shangguan ve ark. Perilla frutescens yaprakları ile Perilla frutescens yaprakları arasındaki toplam flavonoid içeriğindeki farklılıkları karşılaştırmak için görünür spektrofotometri kullanmıştır. Sonuçlar, Perilla frutescens yapraklarındaki toplam flavonoid içeriğinin Perilla frutescens yapraklarından daha yüksek olduğunu göstermiştir; Huang ve arkadaşları, HPLC teknolojisini kullanarak perilla yapraklarındaki ve beyaz perilla yapraklarındaki rosmarinik asit içeriğini karşılaştırmış ve analiz etmiş ve aynı hasat döneminde perilla yapraklarındaki rosmarinik asit içeriğinin beyaz perilla yapraklarından daha yüksek olduğunu bulmuştur. Şu anda, Perilla frutescens yaprakları ve Perilla frutescens yaprakları arasındaki kimyasal bileşim farklılıkları üzerine yapılan araştırmalar esas olarak uçucu yağlar, flavonoidler, fenolik asitler ve diğer bileşenlere odaklanmaktadır. İkisi arasındaki amino asit, organik asit, şeker ve diğer bileşenlerin içeriğindeki farklılıklar konusunda hala araştırma eksikliği vardır. Perilla frutescens yaprakları ile Perilla frutescens yaprakları arasındaki farkların daha sistematik ve kapsamlı bir şekilde analiz edilmesi gerekmektedir.
Bu çalışmanın amacı, perilla yaprakları ve beyaz perilla yaprakları için bir ön kolon türevlendirme GC-MS analiz yöntemi oluşturmak ve her ikisinde de amino asitlerin, organik asitlerin, şekerlerin, yağ asitlerinin, fenolik asitlerin ve diğer bileşenlerin içeriğini belirlemek; Temel bileşen analizi (PCA) ve ortogonal kısmi en küçük kareler diskriminant analizi (OPLS-DA) gibi çok değişkenli istatistiksel analiz yöntemlerini kullanarak ikisi arasındaki kimyasal bileşimdeki farklılıkları karşılaştırmak ve farklı biyobelirteçleri taramaktır; Perilla frutescens yaprakları ve Perilla frutescens yaprakları arasındaki kimyasal bileşim farklılıklarının sistematik olarak incelenmesiyle, Perilla frutescens'in botanik sınıflandırması ve Perilla frutescens'in farklı germplazm kaynaklarının uygulanması için belirli referanslar sağlanacaktır.

 

 

Perilla frutescens ve Perilla frutescens arasındaki mevcut sınıflandırma anlaşmazlığı çözülmemiştir. "Flora of China" Latince adı Perilla frutescens ve Perilla frutescens'i tek bir tür olarak birleştirmektedir, ancak Çin Farmakopesi yaprakların tek taraflı mor veya çift taraflı mor olduğunu açıkça belirtmektedir, bu da Farmakopede belirtilen tıbbi Perilla frutescens çeşitlerinin Perilla frutescens'i içermediğini göstermektedir. Uzun yıllar boyunca, perilla yaprakları ve beyaz perilla yaprakları arasındaki farklar üzerine yapılan araştırmalar esas olarak ikincil metabolitlere odaklanmıştır. Şu anda perilla yapraklarında 200'den fazla kimyasal izole edilmiş ve tanımlanmıştır, bunların başlıcaları uçucu yağlar (perilla aldehit, perilla keton, vb.), fenolik asitler (rosmarinik asit, kafeik asit, vb.) ve flavonoidlerdir (luteolin, apigenin, vb.). Bu bileşenler perilla yapraklarının kalitesine önemli katkılarda bulunur. Aslında, önceki araştırmacılar tarafından kapsamlı bir şekilde incelenmiş olan ikincil metabolitlere ek olarak, perilla yapraklarında şekerler, amino asitler, organik asitler vb. gibi bazı yüksek polariteli birincil metabolitler de vardır ve bunlar da perilla yapraklarının kalitesine önemli katkılarda bulunur. Bu birincil metabolitler üzerine yapılan araştırmaların sınırlı olmasının bir nedeni de kapsamlı analitik yöntemlerin bulunmamasıdır. Perilla yaprakları ve beyaz perilla yaprakları arasındaki bu bileşenlerin içeriğindeki farklılıkları karşılaştırmak için bu çalışmada ön kolon türevlendirme GC-MS teknolojisi kullanılmıştır. Bu teknoloji, numunenin GC-MS analizinden önce kimyasal yöntemler kullanarak hedef maddeyi benzer bir bileşiğe dönüştürür, böylece hedef bileşiğin polaritesini ve kaynama noktasını azaltır, maddenin uçuculuğunu ve termal kararlılığını artırır ve uçucu olmayan maddelerin kalitatif ve kantitatif analizi için daha uygun hale getirir. Araştırma enstitümüz tarafından perilla yaprağı örnekleri için oluşturulan ön kolon türevlendirme yöntemi, hafif koşullara, basit kullanıma, iyi örnek stabilitesine ve doğru sonuçlara sahiptir. Perilla yapraklarındaki amino asitler, şekerler, yağ asitleri, fenolik asitler ve diğer bileşenler için hızlı ve yüksek verimli bir analiz ve belirleme yöntemi olarak kullanılabilir.

Perilla yaprakları geleneksel bir tıbbi ve yenilebilir bitkidir. Bu çalışmada Perilla frutescens ve Cymbidium bungeanum yapraklarındaki çeşitli bileşenlerin kalitatif ve kantitatif analiz sonuçları, her ikisinin de insan vücudu için altı temel amino asit (L-valin, L-lösin, L-izolösin, L-treonin, L-fenilalanin) içerdiğini göstermiştir, L-lizin) ve Perilla frutescens yapraklarındaki ortalama içeriklerinin Cymbidium bungeanum yapraklarından daha yüksek olması, amino asit seviyesi açısından Perilla frutescens yapraklarının besin değerinin Cymbidium bungeanum yapraklarından daha iyi olduğunu göstermektedir. Aynı zamanda, hem perilla yapraklarının hem de beyaz perilla yapraklarının yüksek düzeyde rosmarinik asit içerdiği bulunmuştur. Rosmarinik asit, anti-enflamatuar, antikanser, antibakteriyel, antioksidan ve immünosupresif gibi çeşitli aktivitelere sahip doğal olarak oluşan bir fenolik asittir. Karşılaştırmalı sonuçlar, perilla yapraklarındaki rosmarinik asit içeriğinin beyaz perilla yapraklarındakinden önemli ölçüde daha yüksek olduğunu ve perilla yapraklarının daha iyi bir tıbbi bitki kaynağı olduğunu göstermektedir. Beyaz perilla yapraklarındaki tartarik asit, L-alanin, L-glisin, L-glutamik asit, palmitik asit, oleik asit ve diğer bileşenlerin içeriği perilla yapraklarındakinden daha yüksektir ve bu da bazı yenilebilir ve tıbbi değerlere işaret etmektedir. Yukarıdaki sonuçlar, Perilla frutescens yaprakları ve Perilla frutescens yapraklarının birincil metabolitlerinde önemli farklılıklar olduğunu göstermektedir. Botanik sınıflandırmada Perilla frutescens'in Perilla frutescens yapraklarından ayrılması, Perilla frutescens tıbbi malzemelerinin uygun şekilde saflaştırılması için faydalıdır. Yukarıdaki sonuçlar, perilla yapraklarının kalite kontrolü ve yüksek kaliteli perilla germplazmının taranması için büyük önem taşımaktadır.