Paeonia lactiflora ve işlenmiş ürünlerinin kalitesi üzerine HPLC karakteristik spektrumu ile içerik tayini kullanılarak karşılaştırmalı çalışma
Beyaz şakayık, Ranunculaceae familyasından bir bitki olan Paeonia lactiflora Pall'ın kuru köküdür. Doğası gereği acı, ekşi ve hafif soğuktur. Karaciğer ve dalak meridyenlerine geri döner. Kanı besleyici ve meridyenleri düzenleyici, yini tonifiye edici ve terlemeyi durdurucu, karaciğeri yumuşatıcı ve ağrıyı dindirici ve karaciğer yangını sakinleştirici etkileri vardır. Kan eksikliği ve sararma, adet bozuklukları, spontan terleme, gece terlemeleri, kaburga ağrısı, karın ağrısı, uzuv spazmları, baş ağrısı ve baş dönmesi için kullanılır. Paeonia lactiflora'nın ana etken maddesi Paeonia lactiflora'nın toplam glukozitleridir (TGP). TGP, paeoniflorin, paeoniflorin, benzoil paeoniflorin ve anti-enflamatuar, bağışıklık düzenleyici ve hepatoprotektif etkileri olan diğer bileşenlerin bir karışımıdır. Karıştırılarak kızartılmış beyaz şakayık ve şarap beyaz şakayık, beyaz şakayığın işlenmiş ürünleridir. Modern farmakolojik araştırmalar, işlenmiş beyaz şakayıkların farmakolojik etkilerinin genel olarak arttığını ve işlenmiş ürünlerin analjezik etkisinin ham ürünlerden daha önemli olduğunu göstererek beyaz şakayık işlemenin önemini tam olarak ortaya koymuştur. Ulusal Çin Tıbbı İşleme Standartları şarapta beyaz şakayık, karıştırılarak kızartılmış beyaz şakayık ve toprakta karıştırılarak kızartılmış beyaz şakayık için işleme yöntemleri içermektedir; "Jingyue Quanshu" ve Jiao Shude'nin "İlaç Deneyimi Üzerine On Ders" adlı eserlerinin her ikisi de karıştırılarak kızartılmış beyaz şakayık kullanımını kaydetmektedir. Beyaz şakayık kızartıldıktan sonra soğutma özellikleri hafifler ve kan ve kollateralleri besleyici, dalak ağrısını hafifletici etkilere sahiptir ve dalak eksikliği veya karaciğer dalak uyumsuzluğundan kaynaklanan ishal ve karın ağrısını tedavi etmek için kullanılabilir. "Bian Que Xin Shu" kitabı beyaz şakayığın "şarapla karıştırılarak kızartılması" yöntemine öncülük ederken, "Tang Ye Ben Cao" beyaz şakayık şarabının meridyende bekletilmesinin merkezi karın ağrısını hafifletebileceğini kaydeder; The Compendium of Materia Medica "orta soğuktan kaçınanların şarapla karıştırarak kızartması gerektiğini" ve "yin'i beslemek için şarapla karıştırarak kızartılması gerektiğini" belirtir. Beyaz şakayık şarabı ile karıştırılarak kızartıldıktan sonra, ekşi ve soğuk doğası azaltılabilir ve orta, yavaş ve acil olanı uyumlu hale getirmede iyidir. Genellikle kaburga ağrısı, karın ağrısı, özellikle doğum sonrası karın ağrısı için kullanılır.

Kükürt fümigasyonu, böcek istilasını, küf oluşumunu önlemek ve geleneksel Çin tıbbi malzemelerinin saklama süresini uzatmak için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Ancak, kükürt fümigasyonu bazı geleneksel Çin tıbbi malzemelerinde aşırı SO2 kalıntısına neden olabilir, bu da etkili bileşenlerde ve içeriklerinde değişikliklere yol açarak etkinliklerini azaltır ve hatta onları "zehir" haline getirerek geleneksel Çin tıbbi malzemelerinin kalitesini ve güvenliğini ciddi şekilde etkiler. Paeonia lactiflora'nın modern işleme çalışmaları, sülfür fümigasyonunun Paeonia lactiflora'daki paeoniflorin içeriğinde bir azalmaya yol açabileceğini göstermiştir. Kükürt fümigasyonunun bazı paeoniflorinleri yeni bir bileşen olan paeoniflorin sülfite dönüştürebileceği ve böylece paeoniflorin içeriğini azaltabileceği tahmin edilmektedir.

Bu çalışma, Paeonia lactiflora tıbbi malzemeleri ve işlenmiş ürünleri için Çin Farmakopesi standardının 2020 baskısına dayanarak, HPLC yüksek performanslı sıvı kromatografisi kullanarak Paeonia lactiflora, Paeonia lactiflora şarabı, Paeonia lactiflora kızartması ve Paeonia lactiflora kükürt tütsülenmesinin karakteristik spektrumlarını oluşturmuş ve altı aktif bileşen tanımlamıştır: gallik asit, kateşinler, paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-pentagalloil glukoz ve benzoil paeoniflorin; Beyaz şakayık, şarap beyaz şakayık, kızartılmış beyaz şakayık ve kükürt tütsülenmiş beyaz şakayıkta yukarıda belirtilen altı aktif bileşenin içeriğini eş zamanlı olarak ölçmek ve karakteristik spektrumların benzerlik hesaplaması ve kemometrik analiz yöntemlerini kullanarak beyaz şakayık, işlenmiş ürünler ve kükürt tütsülenmiş ürünlerin kalitesini değerlendirmek. Bu çalışma, beyaz şakayık, işlenmiş ürünler ve kükürt tütsülenmiş ürünlerin tanımlanması ve kalite değerlendirmesi için bir referans sağlamaktadır.

Test çözeltisinin hazırlanması. Bu çalışmada, farklı konsantrasyonlardaki metanol ve etanolün ekstraksiyon etkinliği tek faktör analizi ile araştırılmıştır. Kromatografik pik "toplam pik alanı/örnek boyutu" karakteristik spektrum için değerlendirme indeksi olarak kullanılmış ve gallik asit, kateşinler, paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-pentagalloil glukoz ve benzoil paeoniflorin toplam içeriği içerik belirleme indeksi olarak kullanılmıştır. Son olarak, seyreltik etanol ekstraksiyon çözücüsü olarak belirlenmiş; iki ekstraksiyon yöntemi, ısıtma reflüsü ve ultrasonik işlem üzerinde karşılaştırmalı bir çalışma yapılmış ve farklı ekstraksiyon yöntemlerinin Paeonia lactiflora'nın ekstraksiyon verimliliği üzerinde çok az etkisi olduğu bulunmuştur. Bu nedenle, işlemin basitliği göz önünde bulundurularak ultrasonik işlem seçilmiştir; Aynı zamanda, numunelerin ultrasonik işlem süresi (15, 30, 45 dakika) araştırılmış ve 30 dakikalık ultrasonik işlemin çeşitli bileşenleri tamamen çıkarabileceği bulunmuştur. Yukarıdaki araştırmaya dayanarak, beyaz şakayık test çözeltisi için en iyi hazırlama yönteminin 50 mL seyreltik etanolün 30 dakika boyunca ultrasonik işlemle (güç 250W, frekans 40kHz) muamele edilmesi olduğu belirlenmiştir.

Özellik haritalarının oluşturulması ve analizi. Karakteristik spektrumların araştırma sonuçları, beyaz şakayık, kızarmış beyaz şakayık ve şarap beyaz şakayığının HPLC karakteristik spektrumlarında 6 ortak pik ve kükürt tütsülenmiş beyaz şakayığın HPLC karakteristik spektrumlarında 7 ortak pik olduğunu göstermektedir. Çalışma süresini kısaltmak ve iş verimliliğini artırmak için numune tespiti için farklı üreticilerin Agilent, Waters ve Thermo cihazlarının kullanılması nedeniyle, aynı kromatografik kolon kullanılsa bile, karakteristik spektrumdaki kromatografik piklerin alıkonma süresi, farklı üreticiler arasındaki makine ölü hacmindeki farklılıklar nedeniyle değişebilir. Pik 4 S piki olarak alınır ve bağıl alıkonma süresi hesaplanırsa, her bir karakteristik pikin bağıl alıkonma süresi nispeten sabit olacaktır. Pik 7, Paeonia lactiflora'nın kükürt fümigasyonundan sonra oluşur ve bunun paeoniflorin sülfit olduğu tahmin edilmektedir. Paeonia lactiflora, kızarmış Paeonia lactiflora ve şarap Paeonia lactiflora'nın altı karakteristik bileşeni referans standartlarla tanımlanmıştır: gallik asit, kateşinler, paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-pentagalloil glukoz ve benzoil paeoniflorin. OPLS-DA analizi, Paeonia lactiflora'nın işlenmesi ve kükürt fümigasyonundan sonra pik 7, pik 4 (paeoniflorin) ve pik 5'te (1,2,3,4,6-pentagalloil glukoz) önemli değişiklikler olduğunu gösteren üç farklı biyobelirteç tanımlamıştır.

Paeonia lactiflora'nın kızartma, şarapta kavurma ve kükürt fümigasyonundan sonra kimyasal bileşimindeki değişiklikler. Beyaz şakayık, kızarmış beyaz şakayık, şarap beyaz şakayık ve kükürt tütsülenmiş beyaz şakayıkta bilinen altı bileşenin içerik belirleme sonuçları, gallik asit hariç diğer beş bileşenin değişen derecelerde değişiklik gösterdiğini ortaya koymuştur. Kızartma ve şarapta kavurma işlemlerinden sonra beyaz şakayıktaki paeoniflorin içeriği azalırken, paeoniflorin lakton ve benzoil paeoniflorin içeriği artmıştır. Bunun nedeni, beyaz şakayığın işlenmesi sırasında paeoniflorinin paeoniflorin lakton ve benzoil paeoniflorine dönüşmesi olabilir; Kükürt fümigasyonundan sonra, paeoniflorin içeriğinin azaldığı, bunun da kükürt fümigasyonundan sonra beyaz şakayığın paeoniflorin sülfite dönüşmesinden kaynaklandığı tahmin edilmektedir. Kateşinler ısıya maruz kaldıklarında kararsızdırlar. Bu nedenle, kızartma ve şarap kavurma işlemleri beyaz şakayıktaki kateşin içeriğini önemli ölçüde azaltırken, kükürt fümigasyon işlemi belirgin bir ısıya maruz kalmaması nedeniyle kateşin içeriğinde önemli değişiklikler göstermemiştir. Buna ek olarak, şarap kavurma ve kükürt fümigasyonundan sonra, 1,2,3,4,6-pentagalloilglukoz içeriği önemli ölçüde artmıştır; bunun, 1,2,3,4,6-pentagalloilglukozun dönüşümünü teşvik eden Paeonia lactiflora'nın işlenmesi sırasında yardımcı malzemelerdeki ısı ve bazı kimyasal bileşenlerin katalitik etkisinden kaynaklandığı sonucuna varılmıştır. Spesifik mekanizmanın daha fazla araştırılması gerekmektedir.

Geleneksel Çin tıbbı teorisine göre, geleneksel Çin tıbbının farklı işlenmiş ürünlerinin klinik uygulamalarında, iç kimyasal bileşimlerindeki farklılıklarla ilgili farklılıklar olmalıdır. Paeonia lactiflora kanı besleyici, yini besleyici, karaciğeri koruyucu ve spazmları giderici etkilere sahiptir. Karıştırarak kızarttıktan sonra soğutma özellikleri hafifler, dalak rahatlatıcı ve ağrı kesici etkileri artar. Alkolle kavrulduktan sonra ekşi ve soğuk özellikleri azalır, ılımlı ve acil etkileri artar. Bu durum Paeonia lactiflora'daki paeoniflorin içeriğinin azalması, glikozit laktonlar ve benzoil paeoniflorin içeriğinin artması ile ilgili olabilir. Paeonia lactiflora'nın kükürt fümigasyonu böcekleri önleyebilse, küflenmeyi ve çürümeyi önleyebilse de, aşırı kükürt fümigasyonu paeoniflorin içeriğinde önemli bir azalmaya yol açar, bu da bazı paeoniflorinlerin paeoniflorin sülfite dönüşmesinden kaynaklanabilir, dolayısıyla tıbbi malzemeleri ciddi şekilde etkiler. Kaynatma parçalarının kalitesi sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir, bu nedenle kükürt fümigasyon işlemi sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir. Daha sonraki aşamada, Paeonia lactiflora'nın kükürt fümigasyon süreci hakkında daha fazla araştırma yapılacak, farklı derecelerde kükürt fümigasyonunun Paeonia lactiflora'nın etkili bileşenleri üzerindeki etkileri araştırılacak ve optimum kükürt fümigasyon süreci belirlenecektir.