Farklı kökenlerden gelen nilüfer çiçeklerinin kalitesinin kimyasal örüntü tanıma yöntemiyle birleştirilmiş parmak izi spektrumuna dayalı olarak değerlendirilmesi
Uyuyan nilüfer, Nymphaeaceae familyasından, İli, Altay, Bohu ve Sincan'daki diğer bölgelere özgü, çok yıllık suda yaşayan otsu bir bitkidir. Uygur tıbbında yaygın olarak kullanılan bir şifalı bitki olan Uyuyan Nilüfer'in kurutulmuş çiçek tomurcukları, Çin Halk Cumhuriyeti Sağlık Bakanlığı İlaç Standartlarının Uygur Tıbbı Bölümüne dahil edilmiştir. Ateşi düşürme, öksürüğü hafifletme, ısıyı temizleme ve detoksifiye etme, zihni sakinleştirme etkilerine sahiptir ve baş ağrısı, ateşe bağlı öksürük, çocuklarda ateşin neden olduğu akut ve kronik rüzgar şokunu tedavi etmek için kullanılabilir. Uyuyan lotus esas olarak flavonoidler ve fenolik bileşikler içerir. Modern farmakolojik çalışmalar, antioksidan, anti-enflamatuar, hipoglisemik, antiviral vb. gibi çeşitli biyolojik aktivitelere sahip olduğunu göstermiştir. Bu çalışma, Çin şifalı bitkisinin içsel kalitesini daha iyi kontrol etmek amacıyla, çok bileşenli içerik tespiti yapmak için kimyasal örüntü tanıma yöntemiyle birlikte parmak izi spektrumunu kullanmayı, farklı üretim alanlarındaki Çin şifalı bitkilerinin bileşimindeki farklılıkları kapsamlı bir şekilde analiz etmeyi, üretim alanları ve karakteristik bileşenlerdeki farklılıkları netleştirmeyi, Çin şifalı bitkilerinin tanımlanması ve kalite standardı formülasyonu için referans sağlamayı ve daha fazla geliştirme ve kullanım için bir temel oluşturmayı amaçlamaktadır.

Ekstraksiyon çözücüsünün seçimi. Uyuyan Lotus şifalı bitkisinde birçok kimyasal bileşen ve farklı özellikler bulunmaktadır. Şifalı bitkinin içerdiği kimyasal bileşenlerin bilgisini kromatogramda daha iyi yansıtmak için bu makalede çok sayıda literatüre başvurulmuş ve bu deneyde ekstraksiyon çözücüleri olarak metanol, 50% metanol ve etanol seçilmiştir. Ekstraksiyon çözücüleri olarak 50% metanol ve etanol kullanıldığında, 15 parti Sleeping Lotus'un parmak izi spektrumlarının analizi sonucunda 273nm dalga boyunda 23 ortak pik olduğu tespit edilmiştir. Pik 1, gallik asidin iyi bir şekilde ayrılması ve geniş bir pik alanına sahip olması nedeniyle referans pik olarak kullanılmıştır. 350nm'de 17 ortak pik vardır ve bunların arasında tannik asit, havai fişek glikozidi, mor bulut glikozidi ve kuersetin olmak üzere 4 bileşen tanımlanmıştır. Bu arada, 15 parti numunenin parmak izi spektrumlarının benzerliği değerlendirilmiş ve sonuçlar kontrol parmak izi spektrumları ile iyi benzerlik göstermiştir. Az sayıda tepe noktası eksik ekstraksiyona yol açmaktadır. Çeşitli faktörlerin kapsamlı analizi yoluyla, çözücü olarak metanol kullanılarak en uygun ekstraksiyon yöntemi belirlenmiştir.

Algılama dalga boyu seçimi. Bu çalışmada lotus çiçeğinin parmak izi spektrumunda tam dalga boyu taraması (190-800nm) gerçekleştirmek için bir diyot dizisi dedektörü kullanılmıştır. Sunulan 3D spektruma dayanarak, kromatografik pik ayrımının yüksek olduğu, pik simetrisinin iyi olduğu, taban çizgisinin kararlı olduğu ve 273nm ve 350nm dalga boyu koşulları altında pik kapasitesinin büyük olduğu görülebilir. Test çözeltisinin elde edilen spektrumu daha zengin bilgi gösterebilir. Bu nedenle, ölçüm dalga boyları olarak 273nm ve 350nm seçilmiştir.

Kromatografik koşulların seçimi. Mobil fazlar olarak metanol ve asetonitrilin lotus çiçeklerinin parmak izi spektrumu üzerindeki etkisi araştırılmıştır. İzokratik analiz için mobil fazlar olarak metanol ve asetonitril kullanıldığında, ayırma verimliliği zayıftır. Her kromatografik pikin daha iyi ayrılmasını sağlamak için gradyan elüsyon seçilmiştir. Mobil faz olarak metanol asetonitril ile karşılaştırıldığında, parmak izi kromatogramında daha fazla kromatografik pik elde edilebilir. İki farklı mobil fazdan elde edilen kromatogramlar karşılaştırıldığında, asetonitril kullanılarak yapılan ayırma performansının metanolden daha iyi olduğu görülmüştür. Bu nedenle, asetonitril bu çalışma için mobil faz olarak seçilmiştir.
Analitik yöntemlerin değerlendirilmesi. Uyuyan nilüfer çiçeklerinden elde edilen 15 partinin parmak izi spektrumları analiz edilerek, 273nm dalga boyunda 23 ortak pik olduğu bulunmuştur. Pik 1, gallik asidin iyi bir şekilde ayrılması ve geniş bir pik alanına sahip olması nedeniyle referans pik olarak kullanılmıştır. 350nm'de 17 ortak pik vardır ve bunların arasında tannik asit, havai fişek glikozidi, mor bulut glikozidi ve kuersetin olmak üzere 4 bileşen tanımlanmıştır. Bu arada, 15 parti numunenin parmak izi spektrumlarının benzerliği değerlendirilmiş ve sonuçlar kontrol parmak izi spektrumları ile iyi benzerlik göstermiştir. HPLC parmak izi ve küme analizi, PCA, OPLS-DA kombinasyonu, farklı kökenlerden ve partilerden gelen tıbbi malzemelerin kümeleme ve bileşen ayrım analizi için kullanılabilir. Bu çalışmada, Nelumbo nucifera şifalı bitkisi üzerinde küme analizi, PCA ve OPLS-DA sınıflandırma modellerini yürütmek için kimyasal örüntü tanıma yöntemleri kullanılmıştır. Üç yöntemin analiz sonuçları tutarlıydı. Nelumbo nucifera'nın on beş partisi 273nm'de dört kategoriye ayrılmış ve farklılıklar esas olarak 17, 1, 4, 15, 20, 23, 3, 6, 2 ve 21 numaralı piklere yansımıştır. Bunlar arasında pik 1 gallik asit, pik 15 puerarin ve pik 20 kuersetin idi. 350nm'de, esas olarak 14, 1, 13, 7, 8, 11, 10 ve 2 numaralı piklerin taranmasına yansıyan farklılıklarla üç kategoriye ayrılır. Bunlar arasında 14. pik kuersetin, 7. pik havai fişek glikozidi ve 8. pik mor bulut glikozididir. Bu bileşenler, farklı üretim alanlarından gelen lotus tıbbi malzemelerinin kalitesini ayırt etmek ve tanımlamak için ana karakteristik bileşenler olarak hizmet edebilir. Araştırma grubumuz, lotus tıbbi malzemelerinin kalitesini değerlendirmek için daha kapsamlı bir referans sağlamak amacıyla bilinmeyen diferansiyel bileşenler üzerinde derinlemesine çalışmalar yapmaya devam edecektir.