İn vitro kolesterol düşürücü aktiviteye sahip limon endofitik bakterilerinin izolasyonu, taranması ve tanımlanması
Teknolojinin gelişmesi ve insanların yaşam standartlarının iyileşmesiyle birlikte, insanların hiperlipidemi ve yüksek kolesterole olan ilgisi giderek yaygınlaşmaktadır. İstatistiklere göre, dünyada her gün hiperlipideminin neden olduğu kardiyovasküler hastalıklardan ölenlerin sayısı yaklaşık 4000'dir. Çin'de ateroskleroz, koroner kalp hastalığı, hipertansiyon ve inme gibi hiperlipideminin neden olduğu kardiyovasküler ve serebrovasküler hastalıklardan ölenlerin sayısı yıllık 12% oranında artmaktadır. Obezitenin neden olduğu birçok komplikasyonun oluşumunu azaltmak için, son yıllarda daha fazla araştırma, hastalıkların görülme sıklığını azaltmak için diyet tedavisi yoluyla kan lipitlerini azaltmaya odaklanmıştır. Yabancı literatür çalışmaları, anormal yağ metabolizmasını düzenlemek için diyetle birlikte laktik asit bakterilerini kullanmaya çalışmıştır. Aynı zamanda, diğer çalışmalar faydalı laktik asidin yağ kütlesi ve glikoz intoleransının birleşik sağlık sorunlarını doğrudan iyileştirebileceği ve böylece obeziteyi iyileştirebileceği sonucuna varmıştır.

Çok sayıda araştırma sonucuna göre, mikroorganizmalardaki farklı probiyotik türleri kolesterolü düşürme ve bağırsak mikrobiyotasını iyileştirme etkisine sahiptir. Örneğin, TMC3115 yaşlı insanların bağırsak mikrobiyotasını, glikoz ve lipid profilini iyileştirebilir. Lipid düşürücü etkinin ve bağırsak mikrobiyotasının iyileştirilmesinin doğrudan veya dolaylı olarak mikrobiyal aktiviteyle ilişkili olduğu ve lipid düşürücü aktivitenin mikroorganizmaların türüyle ilişkili olduğu doğrulanmıştır. Örneğin, alkolik olmayan yağlı karaciğer hastalığı olan hastaların bağırsak mikrobiyotası üzerine yapılan araştırmalarda, ilaç tedavisinin şu anda hala en önemli yöntem olduğu bulunmuştur. Bununla birlikte, probiyotikler ve diğer ilaçların kombinasyonu da bağırsak mikrobiyotasını iyileştirme ve kolesterolü düşürme konusunda iyi bir etkiye sahip olabilir. Şu anda, alkolik olmayan yağlı karaciğer hastalığının (NAFLD) tedavisi hakkında çok az rapor bulunmaktadır.

Limon (L.) Burm f.)， Yimu meyvesi olarak da bilinen dikotiledon bitki takımının Rutaceae familyasına ait bir narenciye bitkisidir. Güneydoğu Asya kökenlidir ve şu anda Çin'deki ana üretim alanlarından biri olan Yibin, Sichuan'da bulunmaktadır. Limon, ister geleneksel Çin ilacı ister meyve olarak tüketilsin, ekşi ve buruk bir tada sahiptir. Fermente bir meyve suyuna fermente edildiğinde kabul edilmesi daha kolaydır. Son yıllarda Çin'de enzimler üzerine araştırmalar yeni yeni ortaya çıkmakta ve sürekli olarak yeni politikalar, kanun ve yönetmelikler uygulamaya konulmaktadır. Bununla birlikte, Çin tıbbi malzemelerinin doğrudan içeceklere işlenmesi konusunda neredeyse hiç araştırma yoktur. Bu deney, limonu fermantasyon teknikleri kullanarak işlemek, probiyotikleri yetiştirmek ve izole etmek, izole edilen suşları tanımlamak ve lipit düşürücü işlevi olan probiyotikleri seçme hedefine ulaşmak için lipit düşürücü aktivite taraması yapmak için mikrobiyal teknolojiyi kullanmayı amaçlamaktadır. Bu, daha sonraki aşamada kolesterol düşürücü probiyotiklerin uygulanması için teorik temel sağlayabilir.

 

Bu deneyde substrat olarak kolesterol kullanılmış ve limondaki endofitik bakterilerin kolesterol parçalama oranını taramak için yüksek performanslı sıvı kromatografisi kullanılmış, ardından 16S veya 26S rDNA gen dizileri kullanılarak tanımlama yapılmıştır. 17 bakteri suşu taranmış ve 25%'nin üzerinde bir kolesterol parçalama oranına sahip oldukları bulunmuştur. Tanımlama sonuçları sırasıyla Candida albicans, Pichia pastoris, Wickham mayası, Pichia pastoris ve Acetobacter cloacae olmak üzere 16 maya suşu ve 1 Acetobacter suşu göstermiştir.
1963 yılında Shaper Laboratuvarı, Afrika'daki bazı kabilelerin laktobasil ile fermente edilmiş süt ürünlerini büyük miktarlarda tükettikten sonra serum kolesterol seviyelerinin genellikle daha düşük olduğunu keşfetmiştir. Araştırmalar, sıradan hayvanların dışkılarında steril hayvanlara göre daha fazla kolesterol salgıladığını ve her iki hayvan da aynı anda yüksek kolesterollü gıdalarla beslendiğinde, steril hayvanların kanındaki kolesterol içeriğinin sıradan hayvanlarınkinin iki katı olduğunu ortaya koymuştur. Bu da bağırsak mikrobiyotasının bağırsakta kolesterol emilimi üzerinde etkisi olabileceğini düşündürmektedir. Şimdiye kadar yapılan çok sayıda deney, farklı laktik asit bakteri türlerinin kolesterolü düşürme etkisine sahip olduğunu ve bunların arasında Lactobacillus acidophilus'un en bol bulunan materyal olduğunu doğrulamıştır.
Bu deney, kolesterolü düşürme etkisine sahip çok sayıda maya ve Acetobacter suşunu tarayarak, daha sonraki aşamada lipid düşürücü fermente gıdaların veya ilaçların geliştirilmesi için daha fazla bakteri suşu sağladı.