Çin wolfberry'sindeki lignanların kimyasal bileşenleri ve karaciğer hücrelerini koruyucu etkileri üzerine çalışma
Leonuri Fructus, Lamiaceae familyasından bir bitki olan Leonurus japonicus Houtt'un kurutulmuş ve olgunlaşmış meyvesinden elde edilir. Tıbbi özellikleri arasında kan dolaşımını teşvik etmek, menstrüasyonu düzenlemek, karaciğeri temizlemek ve görüşü iyileştirmek yer alır. İlk olarak "Shennong Bencao Jing" de kaydedilmiştir ve keskin ve hafif tadının yanı sıra görüşü iyileştirme, özü besleme ve nemi giderme yeteneği ile bilinir. Uzun bir tıbbi kullanım geçmişine sahiptir. Yimucao ve Wuweizi, farklı tıbbi kısımları olan aynı bitkiden elde edilen iki geleneksel Çin ilacıdır. Geleneksel etkilerinin de benzerlikleri ve farklılıkları vardır. "Compendium of Materia Medica" iki Çin ilacının işlevlerini ve endikasyonlarını birbirinden ayırmaktadır: "Yimucao kan dolaşımını teşvik eder ve kanı besler... Gerçekten kan ailesinin kutsal ilacıdır. Wuweizi ise kadınların düzensiz meridyenlerini, fetal doğumu ve her türlü kan ve qi hastalığını tedavi etmek için mükemmeldir. Kökleri, sapları, çiçekleri ve yapraklarının hepsi ilaç olarak kullanılır ve birlikte kullanılabilir. El ve ayak durgunluğunu, yin ve kan ayrılmasını, rüzgar ve ısıyı tedavi ediyorsa, karaciğer ısısını temizliyor ve arındırıyorsa, görüşü ve özü iyileştiriyorsa ve kadınların meridyenlerini düzenliyorsa, Wuweizi tek başına iyidir. Şişlik, toksinler, yaralar ve ülserleri tedavi ederse, iltihabı ortadan kaldırabilir. Su kan dolaşımını teşvik eder ve bir kadın hamilelik sırasında çeşitli hastalıklardan muzdaripse, iyi olması için birlikte kullanılması tavsiye edilir. Buradan, hem anaç hem de kurt üzümü kan dolaşımını teşvik etme ve kan stazını giderme işlevine sahip olduğu görülebilir, ancak ilki kan dolaşımını teşvik etme ve kan stazını gidermede iyiyken, ikincisi karaciğeri temizlemede ve görüşü iyileştirmede iyidir. Bununla birlikte, Polygonatum sibiricum üzerine yapılan mevcut araştırmaların genişliği ve derinliği Leonurus heterophyllus üzerine yapılanlardan çok daha azdır. Kimyasal çalışmalar Leonurus heterophyllus'ta 300'den fazla kimyasal bileşenin izole edildiğini ve tanımlandığını ortaya koymuştur ve vazodilatasyon, antiplatelet agregasyonu ve uterus düz kasının düzenlenmesindeki farmakolojik etkilerini ve mekanizmalarını açıklayan birçok literatür vardır. Bununla birlikte, Polygonatum sibiricum'da ana bileşen türleri triterpenoidler, siklik peptitler, flavonoidler, steroller, fenilpropanoidler, lignanlar ve alkaloidler olmak üzere 70'den az bileşik rapor edilmiştir. Modern farmakolojik çalışmalar, Polygonatum sibiricum'un uterus kasılması, karaciğer hücresi koruması, tirozinaz ve asetilkolinesteraz aktivitesinin inhibisyonu, anti-kanser, anti-inflamatuar, nöroprotektif vb. etkilere sahip olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, farmakolojik çalışmaların çoğu sadece ekstraktın farmakolojik etkilerine odaklanmakta ve tek tek bileşenlerin farmakolojik etkileri ve mekanizmaları hakkında nispeten az araştırma bulunmaktadır. Ön araştırmada, araştırma ekibi Çin kurt üzümü tohumlarındaki tetrahidrofuran lignanların önemli karaciğer hücresi koruyucu aktiviteye sahip olduğunu buldu ve floresan boyama, Western blot ve diğer yöntemlerle olası etki mekanizmasını araştırdı. Bu nedenle, Fructus Polygonatum sibiricum'da karaciğer koruyucu etkileri olan aktif bileşenleri daha fazla araştırmak için, bu çalışmada Fructus Polygonatum sibiricum'un n-butanol fraksiyonundan 8 lignanı izole etmek ve tanımlamak için çeşitli kromatografik ve spektroskopik teknikler kullanılmıştır. Ardından, MTT, Hoechst 33342 floresan boyama ve Western blot teknikleri, bileşiklerin karaciğer hücre hasarına karşı koruyucu etkilerini ve mekanizmalarını karakterize etmek için kullanılmıştır.

 

Bu çalışmada, Polygonatum sibiricum'un n-butanol fraksiyonundan sekiz lignan izole edilmiş ve tanımlanmıştır ve 1-8 bileşiklerinin tümü Polygonatum sibiricum'dan ilk kez izole edilmiştir. Şu anda, triterpenoidler Polygonatum sibiricum tohumlarından izole edilen ana bileşiklerdir ve araştırma ekibi şimdiye kadar Polygonatum sibiricum'dan 23 lignan izole etmiştir. Literatür araştırması, Leonurus ve Leonurus'tan izole edilen monomerik bileşiklerin esas olarak terpenoidler olduğunu bulmuştur, ancak Leonurus'ta lignanlarla ilgili çok az rapor vardır. Bu nedenle, lignanların Leonurus ve Leonurus arasında ayırt edici maddeler olduğu tahmin edilmektedir.

Parasetamol olarak da bilinen asetaminofen, anilin bazlı bir ateş düşürücü ve analjezik ilaçtır. Aşırı kullanımı, esas olarak karaciğer hücrelerinde mitokondriyal disfonksiyona ve hücre apoptozuna neden olarak kolayca karaciğer hasarına ve hatta karaciğer yetmezliğine neden olabilir ve bu da ciddi karaciğer toksisitesine neden olur. Bu nedenle, APAP genellikle ilaca bağlı karaciğer hasarı için bir modelleme ilacı olarak kullanılır. Bu deneyde, in vitro karaciğer hasarı modeli oluşturmak için APAP kullanılmış ve izole edilen bileşikler karaciğer hücresi koruyucu aktivite açısından taranmıştır. Sonuçlar, bileşik 1 ve 3'ün sırasıyla 10,23 ± 2,45 μ mol/L ve 5,20 ± 1,28 μ mol/L EC50 değerleri ile APAP kaynaklı karaciğer hücresi hasarını önemli ölçüde engellediğini göstermiştir. Bu arada, floresan boyama deneyleri ile bileşik 3'ün HL-7702 hücrelerinde apoptozu inhibe edebildiği gözlenmiştir.

Hücre apoptozunun intrinsik yolu, bir protein-protein etkileşim ağı oluşturan ve mitokondriyal dış membranın geçirgenliğini etkileyerek hücre apoptozunu düzenleyen B-hücreli lenfoma (Bcl-2) ailesi proteinleri tarafından düzenlenir. Bcl-2 ve Bax, hücre apoptozunu düzenleyen bir çift anahtar proteindir. Bcl-2, karaciğer hücrelerinin çoğu DNA hasarı faktörüne karşı direncini artıran anti apoptotik bir protein iken, Bax, mitokondriyal membran geçirgenliğinin artmasına neden olan ve sitokrom c'yi serbest bırakarak hücre apoptozuna yol açan pro apoptotik bir proteindir. Bcl-2'nin Bax protein ifadesine oranı, apoptoz ile uyarıldıktan sonra hücrelerin hayatta kalma yeteneğini yansıtır. Bileşik 3'ün hücre apoptozunu inhibe etme mekanizmasını daha fazla araştırmak için, Bcl-2 ve Bax proteinlerinin ekspresyon seviyelerini tespit etmek için Western blot teknolojisi kullanılmıştır. Sonuçlar, bileşik 3'ün Bcl-2 protein ekspresyonunu yukarı, Bax protein ekspresyonunu aşağı düzenleyebildiğini ve Bcl-2/Bax oranını artırabildiğini göstermiştir; bu da bileşik 3'ün Bcl-2 ve Bax proteinlerinin ekspresyon seviyelerini düzenleyerek anti apoptotik etkiler gösterebileceğini ve böylece karaciğer hücreleri üzerinde koruyucu bir etki yaratabileceğini düşündürmektedir.

Bu çalışma, Radix Polygonatum sibiricum'daki karaciğer hücresi koruyucu aktivitenin farmakolojik madde temelini ve etki mekanizmasını araştırarak Radix Polygonatum sibiricum'un geleneksel etkinliğini aydınlatmak ve gelecekte tıbbi kaynakların rasyonel gelişimini ve kullanımını kolaylaştırmak için bir temel sağlamıştır. Araştırma ekibi şimdiye kadar Fructus Ranunculi'den frutoligide A fruleoligide B、lariciresinol-4-O-β-D-glucoside、lariciresinol-4′-O-β-D-glucoside、 (+) - Isoquercetin -9 '- O - β - D-glucoside, artemisinin dahil olmak üzere karaciğer hücresi koruyucu aktiviteye sahip altı lignan izole etmiştir. "Compendium of Materia Medica", Çin kurt üzümünün karaciğeri temizlemede ve görüşü iyileştirmede iyi olduğunu öne sürmektedir, ancak şu anda karaciğeri temizlemek ve görüşü iyileştirmek için maddi temeli ve etki mekanizması hakkında sınırlı araştırma vardır. Araştırma ekibinin araştırması sayesinde, Çin kurt üzümündeki lignanların iyi karaciğer hücresi koruma etkilerine sahip olduğu ve bunun Çin kurt üzümünün karaciğeri temizlemesi ve görüşü iyileştirmesi için aktif madde temeli olabileceği bulunmuştur.