Angelica sinensis'ten elde edilen toplam flavonoidlerin anti romatoid artritteki anahtar bileşenlerinin spektral etki ilişkisi ve bileşen nakavtına dayalı olarak araştırılması
Geleneksel bir Çin ilacı olan Lamiophlomis Herba (LH), Lamiaceae familyasından bir bitki olan Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo'nun kurutulmuş toprak üstü kısmıdır. Tibetliler tarafından yaygın olarak kullanılan şifalı bir bitkidir ve aynı zamanda geleneksel bir Çin ilacı olarak da yaygın olarak kullanılmaktadır. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nin 2020 baskısı, kan dolaşımını teşvik etme, kanamayı durdurma, rüzgarı giderme ve ağrıyı hafifletme etkilerine sahip olduğunu belirtmektedir. Düşme, romatizma ve sarı su hastalığının neden olduğu yaralanmaları tedavi etmek için kullanılabilir. Tibet tıbbındaki isimleri "Daba" ve "Dabuba" olup, "Yue Wang Yao Jian", "Four Medical Classics", "Jing Zhu Ben Cao" gibi Tibet tıp eserlerinde kaydedilmiştir. Şimdiye kadar 1200 yıllık bir uygulama geçmişine sahiptir; "Jingzhu Bencao", Du Yi Wei'nin "sarı su hastalığının" tedavisinde kullanılabileceğini gösteren "Du Yi Wei'nin özü katılaştırdığını ve sarı suyu yönlendirdiğini" kaydeder. Klinik belirtilere göre, Tibet tıbbında kaydedilen "sarı su hastalığı" geleneksel Çin tıbbında "bi sendromu" olarak sınıflandırılabilir. "Bi sendromu "ndan gelişen "kemik bi" ve "li jie hastalığı", modern tıptaki "romatoid artrit (RA) "in klinik özellikleriyle daha yakından ilişkilidir. Bu nedenle, Du Yi Wei RA'yı tedavi etme potansiyeline sahiptir ve mevcut araştırmalar da Du Yi Wei'nin RA karşıtı etkileri olduğunu göstermiştir.
RA, kronik ve çoklu eklem iltihapları ile karakterize otoimmün bir hastalıktır. Patolojik özellikleri arasında sinovyal hücrelerin tümör benzeri proliferasyonu ve vasküler opasitelerin oluşumu yer almakta olup, fibroblast benzeri sinoviyositler (FLS) ana efektör hücreleridir. Günümüzde RA'nın patogenezi hala belirsizdir. Görülme sıklığı ve sakatlık oranı yüksektir ve genellikle gizli seyreder. Hastalığın geç evresi, Dünya Sağlık Örgütü tarafından belirtilen modern bir refrakter hastalık olan farklı derecelerde geri dönüşümsüz sakatlığa yol açabilir. Klinik uygulamada RA tedavisinde yaygın olarak kullanılan kimyasal ilaçlar arasında nonsteroid antienflamatuvar ilaçlar, immünosupresanlar, glukokortikoidler ve biyolojikler yer almaktadır. İlk üç kimyasal ilaç önemli yan etkilere sahipken, biyolojik ilaçların pahalı fiyatı uzun süreli uygulamalarını sınırlamaktadır. Bu nedenle, düşük yan etkileri ve stabil terapötik etkileri olan yeni klinik anti RA ilaçlarının geliştirilmesi özellikle gereklidir.
Araştırma grubu, Du Yi Wei'nin RA tedavisindeki farmakolojik madde temelini ve etki mekanizmasını keşfetmek için ilk kez ağ farmakolojisini kullandı. Du Yi Wei'nin RA üzerindeki terapötik etkisinin, flavonoidlerin yaklaşık 40%'yi oluşturduğu 23 bileşeniyle ilişkili olduğu bulunmuştur; bu da flavonoidlerin, özellikle luteolin olmak üzere Du Yi Wei'nin anti RA sürecinde önemli bir rol oynadığını göstermektedir; Du Yi Wei'nin anti RA etkisinin ana mekanizmasının, PI3K Akt sinyal yolunu inhibe ederek sinovyal hücrelerin apoptozunu indüklemek olabileceği önerilmektedir. Bu arada, Du Yi Wei'nin anti RA etkisi ve farmakolojik madde temeli bir sıçan adjuvan artrit modeli ile incelenmiş ve sonuçlar Du Yi Wei'nin toplam flavonoidlerinin iyi anti RA etkilerine sahip olduğunu göstermiştir. Du Yi Wei'nin toplam flavonoidleri anti RA etkisi için ana farmakolojik maddelerden biri olabilir, ancak Du Yi Wei toplam flavonoidlerindeki anahtar anti RA bileşenleri hala belirsizdir ve daha fazla araştırma gerektirir. Bu nedenle, bu çalışma, Angelica sinensis'in RA tedavisinde klinik uygulaması için teorik temel ve referans sağlamak amacıyla, spektral etki ilişkileri ve bileşen nakavt teknikleri yoluyla Angelica sinensis'in toplam flavonoidlerindeki temel anti RA bileşenlerini araştırmayı amaçlamaktadır.

Tartışma ve Sonuç
Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin parmak izi üzerine bir ön çalışma, diyot dizi dedektörlü yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC-DAD) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Angelica sinensis toplam flavonoid örneklerinin her bir partisinin parmak izi spektrumları ile belirlenen kontrol parmak izi spektrumları arasındaki benzerlik 0,9'dan büyüktü ve bu da Angelica sinensis toplam flavonoid örneklerinin farklı partilerinde bulunan kimyasal bileşenlerin tutarlı olduğunu gösteriyordu. Araştırma grubu, Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin farklı konsantrasyonlarının ve uygulama sürelerinin erken aşamada FLS hücre canlılığı üzerindeki etkilerini araştırmıştır. Buna dayanarak, Angelica sinensis'teki farklı toplam flavonoid partilerinin FLS hücre canlılığı üzerindeki etkilerini araştırmak için FLS hücrelerini 48 saat boyunca 64 μg/mL konsantrasyonda tedavi etmek için CCK-8 yöntemi kullanılmıştır. Sonuçlar, Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin 13 partisinin tümünün FLS hücre canlılığını önemli ölçüde inhibe edebildiğini göstermiştir. Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin parmak izi spektrumuna ve hücre etkinliği deneylerinin sonuçlarına dayanarak, Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin RA'ya karşı spektrum etki ilişkisini kurmak için gri ilişkisel analiz ve kısmi en küçük kareler (PLS) regresyon analizi kullanılmıştır. Sonuçlar, Angelica sinensis'in toplam flavonoidleri içindeki verbascoside ve verbascoside bileşenlerinin anti RA etkinliğinde önemli bir rol oynadığını göstermiştir. İnce tabaka kromatografisine dayanarak, Angelica sinensis'in toplam flavonoidlerindeki yüksek verbascoside içeriği etkili bir şekilde elimine edildi ve her bir numunenin FLS hücre canlılığı üzerindeki etkisi CCK-8 yöntemi ile belirlendi. Sonuçlar, tüm bileşen ve hedef bileşen örneklerinin FLS hücre canlılığını önemli ölçüde inhibe edebildiğini, hedef negatif bileşen örneğinin ise FLS hücre canlılığı üzerinde önemli bir inhibitör etkisi olmadığını göstermiştir. Aynı zamanda, eşit miktarda verbascoside ve verbascoside'in RA-FLS hücrelerinin canlılığı üzerindeki etkileri karşılaştırılmıştır. Sonuçlar, hem verbascoside hem de verbascoside'ın FLS hücrelerinin canlılığını önemli ölçüde inhibe edebildiğini, ancak verbascoside grubu ile verbascoside grubu arasında önemli bir fark olmadığını göstermiştir.
Özetle, bu çalışmanın sonuçları verbascoside ve verbascoside bileşenlerinin Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin anti RA etkinliğinde önemli bir rol oynadığını göstermektedir. Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin parmak izi analizi ile birleştirildiğinde, verbascoside içeriğinin verbascoside içeriğinden önemli ölçüde daha yüksek olduğu ve verbascoside'in (C21H20O11) anti RA için Angelica sinensis'teki toplam flavonoidlerin anahtar bileşeni olduğunu göstermektedir. RA tedavisinde Du Yi Wei'den elde edilen toplam flavonoidlerin klinik uygulaması için bilimsel bir temel sağlayabilir. Osmanthus glikozitleri çeşitli tıbbi bitkilerde yaygın olarak bulunur ve minimum toksik yan etkilerle birlikte anti-enflamatuar, antioksidan, antikanser ve hipoglisemik yönlerden önemli etkilere sahiptir. Verbascoside bileşenleri nispeten yaygın olmasına rağmen, şu anda verbascoside'in anti RA etkileri hakkında literatür eksikliği bulunmaktadır. Bu çalışmada, verbascoside'in RA-FLS hücre canlılığı üzerindeki etkisini araştırmak için CCK-8 yöntemi kullanılmış ve verbascoside'in FLS hücre canlılığı üzerinde inhibe edici bir etkiye sahip olduğu açıkça gösterilmiştir. Daha sonra, in vivo etkinlik doğrulaması için bir sıçan artrit modeli oluşturulabilir ve etki yolu açıklanabilir, böylece RA tedavisinde Angelica sinensis'in toplam flavonoidlerinin klinik kullanımı için daha fazla referans ve temel sağlanabilir.