Krizantem sap ve yapraklarından elde edilen toplam flavonoidlerdeki antioksidan maddelerin spektral etki ilişkisine göre taranması ve mekanizmasının araştırılması

Krizantemlerin uzun bir klinik uygulama geçmişi vardır. Krizantemlerdeki aktif bileşenler üzerine araştırmaların sürekli derinleşmesiyle birlikte, krizantemlerle ilgili giderek daha fazla işlenmiş ürün ortaya çıkmaktadır. Bununla birlikte, krizantem hasadının yan ürünleri olan krizantem sapları ve yaprakları genellikle hayvan yemi olarak kullanılır veya atılır. Şu anda, derinlemesine ve sistematik bir araştırma eksikliği bulunmaktadır. Önceki çalışmalar krizantem sap ve yapraklarının krizantem bileşenlerine benzer flavonoidler, fenolik asitler, polisakkaritler, uçucu yağlar, nükleozitler ve amino asitler gibi kaynak bazlı kimyasal bileşenler içerdiğini göstermiştir. Ayrıca antioksidan, anti-enflamatuar, lipid düşürücü ve bağırsak fonksiyon bozukluğunu iyileştirme gibi farmakolojik etkileri de vardır. Günümüzde yapılan çalışmalar, Chrysanthemum morifolium'un (TFCSL) sap ve yapraklarından elde edilen toplam flavonoidlerin iyi antibakteriyel ve serbest radikal önleyici etkilere sahip olduğunu göstermiştir. Buna ek olarak, krizantem gövde ve yaprak ekstreleri, insan karaciğer hücrelerinde tert bütanol peroksit tarafından indüklenen oksidatif stres üzerinde de belirli bir koruyucu etkiye sahiptir. Bu nedenle, krizantem sapları ve yaprakları, kaynak israfını azaltmak için büyük önem taşıyan toplam flavonoid aktif bileşenler için ekstraksiyon malzemeleri olarak da kullanılabilir.
Geleneksel Çin tıbbı spektrumu ile etkinlik arasındaki ilişkinin incelenmesi, geleneksel Çin tıbbındaki her bir bileşenin parmak izi spektrumunu farmakolojik sonuçlarla ilişkilendirmek, çeşitli veri işleme modelleri aracılığıyla her bir bileşenin farmakolojik etkiye katkı oranını netleştirmek ve böylece farmakolojik etkiyle ilgili bileşik gruplarını belirlemektir. Ağ farmakolojisi, hedef tahmini, etki mekanizması ve fizyolojik ve patolojik süreç analizine çapraz olarak uygulanan, ilaçla ilgili hedefleri çoklu perspektiflerden belirleyen ve karmaşık hastalık mekanizmalarını ortaya çıkaran yeni bir ilaç araştırma modelidir. Moleküler yerleştirme, geleneksel Çin tıbbındaki etken maddeler ve hedefler arasındaki etkileşimi ve konumu moleküler düzeyde aydınlatan bilgisayar destekli bir ilaç tasarımı yöntemidir. Vasküler endotel hücreleri, vasküler işlevi düzenleyen aktif maddeler salgılayarak dinamik dengeyi korur. Yüksek glikoz, insan umbilikal ven endotel hücrelerinde (HUVEC'ler) reaktif oksijen türlerinin üretiminde artışa neden olarak oksidatif strese ve fonksiyonel bozukluklara yol açabilir. Malondialdehit (MDA) ve süperoksit dismutaz (SOD) seviyelerinin eş zamanlı olarak ölçülmesi, vasküler endotel hücrelerindeki oksidatif stres durumunu daha doğru bir şekilde yansıtabilir. Bu çalışma, malzeme temelini taramak için farklı TFCSL partilerinin parmak izi spektrumlarını oluşturarak ortak pikler ve antioksidan stres aktivasyonu arasındaki korelasyonu araştırmıştır; Hastalık hedeflerini taramak, geleneksel Çin tıbbı bileşen hedef ağı oluşturmak ve temel antioksidan hedefleri ve mekanizmaları tahmin etmek için Gen Kartları ve OMIM gibi veri tabanlarını kullanmak; Krizantem hasadının yan ürünleri olarak krizantem sapı ve yaprağının kullanım değerini artırmak, sonraki aşamada krizantem kaynaklarının kapsamlı gelişimi ve kullanımı için teorik temel sağlamak ve geleneksel Çin tıbbının kaynak kullanımını iyileştirmek amacıyla küçük moleküller ve proteinler arasındaki etkileşimleri keşfetmek için moleküler yerleştirmeyi birleştirmek.

 

Bu çalışmada 12 parti TFCSL numunesi için HPLC parmak izi spektrumları oluşturulmuş, 12 ortak pik belirlenmiş ve standart numuneler kullanılarak 9 pik tanımlanmıştır. Yüksek şeker koşulları altında, HUVEC hasar görebilir ve fizyolojik faktör salgılanması bozulabilir, bu da hücre apoptozunu teşvik ederek, süpernatanttaki LDH ve MDA içeriğini önemli ölçüde artırarak ve SOD aktivitesini önemli ölçüde azaltarak kendini gösterir. TFCSL ile tedaviden sonra, hücre apoptozunu önemli ölçüde inhibe etmenin yanı sıra, oksidatif stresle ilgili faktörlerin seviyelerini de iyileştirebilir ve HUVEC'in normal fizyolojik işlevini koruyabilir. Her bir ortak pik ile antioksidan aktivite arasındaki korelasyonu analiz etmek için gri ilişkisel analiz ve kısmi en küçük kareler regresyonu kullanılarak, pik 5 (apigenin 7-O - β - D-glukozit), pik 6 (izoklorojenik asit C) ve pik 7'nin (vanilin 7-O - β - D-glukozit) TFCSL antioksidan stresinin maddi temeli olduğu tahmin edilmektedir.
Spektrum etki korelasyon analizinden elde edilen üç bileşenin antioksidan stres etkileri üzerinde ağ farmakolojisi analizi yapılmış ve bir etken madde hedef ağı oluşturulmuştur. TNF ve CASP3 potansiyel anahtar hedefler olarak taranmıştır. KEGG zenginleştirme analizi, krizantem sap ve yapraklarındaki toplam flavonoidlerin antioksidan aktivitesinin TNF yolu, MPKA yolu, IL-17 sinyal yolu ve diğer yollarla ilişkili olabileceğini göstermiştir. GO zenginleştirme analizi, protein kinaz aktivitesi, ATP bağlanması, enzim bağlanması gibi moleküler işlevlerin yanı sıra sinyal iletimi ve hücresel biyolojik süreçlerin düzenlenmesi yoluyla antioksidan stres etkileri gösterebilir. TNF, TNF - α'nın vazodilatasyonu uyarabildiği ve endotel hücre geçirgenliğini artırabildiği önemli pro-enflamatuar faktörlerden biridir. Apigenin 7-O - β - D-glukozit, MAPK yolunu inhibe ederek ve TNF - α ekspresyonunu düzenleyerek dekstran sülfat kaynaklı koliti hafifletebilir; Modern farmakolojik çalışmalar, izoklorojenik asit C'nin makrofajlarda TNF - α ekspresyonunu ve transkripsiyonunu azaltabileceğini göstermiştir; CASP, apoptozda önemli bir rol oynamanın yanı sıra, pro-enflamatuar sitokinlerin üretimini de teşvik eder. Vanilin 7-O - β - D-glukozit, serum içermeyen koşullar altında vasküler endotel hücreleri üzerinde koruyucu bir etkiye sahiptir, hücre içi ROS seviyelerini azaltır ve CASP3 seviyelerini aşağı doğru düzenler.
Discovery Studio yazılımının moleküler kenetlenme sonuçlarının analiz edilmesi ve karşılaştırılmasıyla, TFCSL'deki üç ana aktif bileşenin TNF ve CASP3 ile nispeten kararlı bağlanma aktivitesine sahip olduğu bulunmuştur. Daha ileri tarama ve docking sonuçları sayesinde, üç bileşen ile TNF ve CASP3 proteinleri arasındaki etkileşimde yer alan kalıntıların çoğunun aynı olduğu bulunmuştur. Bunlar arasında, birden fazla reseptör etkileşimi türü ve güçlü etkileri olan ortak kalıntılar esas olarak SER9 LYS11、PRO12、ALA156、ASP10、LYS11， Reseptörlerin aktif bölge kalıntıları olabileceği sonucuna varılmıştır.
Krizantem kaynakları Çin'de yaygın olarak bulunmaktadır, ancak şu anda krizantemlerin geliştirilmesi ve kullanımında eksiklikler vardır. Kökler, gövdeler, yapraklar vb. gibi tıbbi olmayan diğer kısımlar hakkında nispeten az sayıda araştırma raporu bulunmaktadır. Krizantemin tıbbi olmayan kısımlarının kimyasal bileşimi, önemli biyolojik aktiviteye sahip krizantem ile son derece benzerdir. Bununla birlikte, derinlemesine araştırma eksikliği nedeniyle, bu etkili bileşenler uygun şekilde kullanılmamış ve geliştirilmemiştir. Bu çalışma, krizantem sap ve yapraklarının geliştirilmesi, kullanımı ve sanayileştirilmesi için bilimsel temel ve referans sağlamak amacıyla, TFCSL'nin antioksidan aktivasyonu üzerine ön araştırma ve keşif yapmış, ardından belirsiz ortak zirvelerin yapısal analizini yapmış ve farmakolojik deneyler yoluyla işlevlerini daha da geliştirmiştir.