Farklı Gelişim Aşamalarındaki Yeşil Kaliks Eriklerinin Bileşim Farklılıklarının ve Antioksidan Aktivitelerinin UPLC ile Kombine UPLC-QE-MS ile Karakterizasyonu
Yeşil sepal erik, Rosaceae familyasından bir bitki olan Prunus mume (Sieb.) Sieb. et Zucc. türünün kurutulmuş bir çiçek tomurcuğudur. Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısında yaygın olarak kullanılan bir geleneksel Çin ilacı olarak yer almaktadır. Karaciğeri yatıştırma, sindirimi teşvik etme, balgamı çözme ve nodülleri dağıtma etkilerine sahiptir. Genellikle karaciğer ve mide qi ağrısı, depresyon ve skrofula gibi hastalıkları tedavi etmek için kullanılır. Hem eski kayıtlar hem de modern araştırmalar, erik çiçeklerinin "yeşil çanak yaprakları" ile tıbbi kullanım için mükemmel olduğunu göstermektedir. Özellikleri arasında grimsi yeşil çanak yaprakları ve sarı beyaz taç yaprakları, hoş kokulu bir aroması ve iyi bir klinik etkinliği vardır. Tıbbi ve yenilebilir bir bitki olarak, yeşil kaliks eriği çay, hamur işleri ve diğer yiyeceklerin yapımında da kullanılabilir. Kışın taze ve zarif bir şekilde çiçek açar ve yüksek süs değeri olan en iyi çiçek olarak listelenir. Yeşil kaliks eriğinin kapsamlı uygulamaları giderek daha fazla ilgi görmektedir.
Yerli ve yabancı akademisyenler erik çiçeğinin kimyasal bileşimi ve farmakolojik etkileri üzerine kapsamlı araştırmalar yapmıştır. Klorojenik asit tarafından temsil edilen fenilpropanoid ve flavonoid bileşenler, erik çiçeğinin farmakolojik aktivitesinin ana maddesidir. Antioksidan, anti trombosit agregasyonu, anti melanin üretimi ve antidepresan etkileri yaygın olarak rapor edilmiştir. Son yıllarda, erik çiçeğindeki flavonoidler antioksidan ve antidepresan özellikleri nedeniyle artan bir ilgi görmektedir. Klorojenik asit, isorhamnetin, quercetin, isoquercitrin, hyperoside, rutin ve diğer flavonoidler erik çiçeklerinden izole edilmiş ve tanımlanmıştır. Bununla birlikte, yeşil kaliks eriğinin genel kimyasal bileşimi hakkında çok az rapor vardır, bu da ikincil metabolitlerinin derinlemesine araştırılmasını ve geliştirilmesini engellemektedir.
Tıbbi bitkilerin sekonder metabolitleri çeşitli biyolojik aktivitelere sahiptir ve tıbbi bitkilerin farmakolojik etkilerini göstermeleri için önemli bir materyal temelidir. Araştırmalar, bitkilerin farklı büyüme ve gelişme aşamalarının, bitkilerde ikincil metabolitlerin birikimini etkileyen önemli faktörler olduğunu ortaya koymuştur. Özellikle çiçekli şifalı bitkiler için hasat dönemi, ikincil metabolitlerin birikimini önemli ölçüde etkileyebilir. Farklı gelişim aşamalarında yeşil kaliks erik organlarındaki kimyasal bileşenlerin dinamik değişimlerini ve antioksidan aktivitedeki farklılıkları incelemek için, ilk olarak, yeşil kaliks erik kimyasal bileşimini açıklığa kavuşturmak için kalitatif analiz için ultra yüksek performanslı sıvı kromatografi dört kutuplu elektrostatik alan orbital tuzak kütle spektrometrisi (UPLC-QE-MS) kullanıldı; UV? Görünür spektrofotometri, üç gelişim aşamasındaki 18 parti yeşil kaliks erik örneğinin toplam flavonoid ve toplam fenilpropanoid içeriğini belirlemek için kullanılmıştır; Ayrıca, yeşil kaliks erik örneklerinde sekiz indikatör bileşenin (neoklorojenik asit, klorojenik asit, kafeik asit, rutin, hiperosid, izoquercitrin, izoklorojenik asit B ve quercitrin) içeriğini belirlemek için ultra yüksek performanslı sıvı kromatografisi (UPLC) kullanılmış ve farklı gelişim aşamalarında sekiz bileşenin içeriğindeki farklılıklar karşılaştırılmıştır; Antioksidan aktiviteyi belirlemek için DPPH yöntemi kullanılmış ve toplam bileşenlerin ve indikatör bileşenlerin içeriği ile antioksidan aktivite arasında korelasyon analizi yapılmıştır. Araştırma sonuçları, farklı gelişim aşamalarında yeşil kaliks eriğinin kimyasal bileşimi ve aktivitesindeki farklılıkların açıklığa kavuşturulması ve yeşil kaliks eriği tıbbi malzemeleri için en uygun hasat döneminin belirlenmesi için bilimsel bir temel sağlamaktadır.

Bu deneyde, UPLC-QE-MS yöntemi kullanılarak yeşil kaliks eriklerinde toplam 328 ikincil metabolit tespit edilmiştir. Flavonoidler ve fenilpropanoidler sırasıyla 67 ve 50 bileşik ile yüksek bir orana sahipti. Flavonoidler arasında flavonoller en yüksek orana sahipti ve erik çiçekleri için kalite standartları olarak hizmet eden hiperosid ve izoquercitrin gibi bileşenlerin tümü bu madde sınıfına aittir. Çalışmalar flavonollerin çiçek organı gelişiminde önemli bir düzenleyici rol oynadığını ortaya koymuştur; yeşil kaliks erik çiçeğinin beyaz rengiyle ilgili olabilecek sadece bir antosiyanin bileşeni tespit edilmiştir.

Farklı gelişim aşamalarında yeşil kaliks eriğinin bileşimindeki değişikliklerin daha fazla karşılaştırılması, toplam flavonoid ve toplam fenilpropanoid içeriğinin tomurcuk aşamasında en yüksek olduğunu ve çiçek açma derecesi ile kademeli olarak azaldığını göstermiştir. Sekiz indikatör bileşenin (neoklorojenik asit, klorojenik asit, kafeik asit, rutin, hyperoside, isoquercitrin, isochlorogenic acid B, quercitrin) içerik belirleme sonuçları tomurcuk aşaması ile tam açık aşama arasında önemli farklılıklar göstermiş, neoklorojenik asit, klorojenik asit, rutin, isoquercitrin ve quercitrin son derece önemli farklılıklar göstermiştir (P<0.0001); Kimyasal stokiyometri analizi, üç dönemde yeşil kaliks eriğinin kimyasal bileşiminde belirli farklılıklar olduğunu ve klorojenik asidin ayırıcı bir kalite belirteci olarak kullanılabileceğini göstermiştir. Genel olarak, tomurcuk aşamasındaki yeşil kaliks eriği, yarı açık ve tam açık aşamalara kıyasla önemli farklılıklar ile kimyasal bileşim ve antioksidan aktivite açısından avantajlara sahiptir. Bu nedenle, tıbbi malzemelerin hasat dönemi tomurcuk aşamasında mümkün olduğunca kontrol edilmelidir.
Özetle, bu deneyde UPLC-QE-MS, UPLC yöntemiyle birlikte kullanılarak yeşil kaliks eriğinin farklı gelişim aşamalarındaki kimyasal bileşimi ve farklılıkları kalitatif ve kantitatif olarak analiz edilmiş ve DPPH yöntemiyle antioksidan aktivite farklılıkları karşılaştırılmıştır. Bu, yeşil kaliks eriğinin kimyasal bileşimindeki dinamik değişiklikler ve tıbbi malzemelerin en uygun hasat dönemi için bilimsel bir temel sağlar.