Resveratrolün farelerde JNK yolağına dayalı immün karaciğer hasarı üzerindeki etkisi üzerine çalışma
İmmün karaciğer hasarı, genellikle inflamatuar hücre infiltrasyonu ve karaciğer hücre kord yapısının bozulması ile birlikte immün yanıtın aracılık ettiği bir durumdur. Dahası, bu hasar karaciğer fibrozu, siroz ve hatta karaciğer tümörleri gibi son evre lezyonların ortaya çıkması ve gelişmesi için gerekli bir yoldur ve hastalığın sonucunu ve kötüleşmesini belirler. Son zamanlarda, Çin'de immün karaciğer hasarının görülme oranı her geçen yıl artmaktadır. İmmünsüpresanlar çoğunlukla klinik olarak kullanılmaktadır, ancak tedavi etkisi açık değildir ve ilacın kesilmesinden sonra nüksetmesi kolaydır. Bu nedenle, immün karaciğer hasarının önlenmesi ve tedavisi için etkili ilaçlar aramak acildir. Sardunya, Geraniaceae familyasının ve Geranium cinsinin bir üyesidir. Esas olarak Kuzeydoğu ve Kuzey Çin'in çeşitli bölgelerinde ve bazı Asya ülkelerinde üretilmektedir. Geranin esas olarak Geranium wilfordii'den izole edilir ve antioksidan ve anti-inflamatuar gibi çeşitli etkilere sahiptir. Çalışmalar, resveratrolün H2O2 tarafından indüklenen pro apoptotik protein Bax ekspresyonunu azalttığını ve anti apoptotik protein Bcl-2 ekspresyonunu teşvik ettiğini göstermiştir, ancak ilgili apoptotik yollar tam olarak incelenmemiştir. Buna ek olarak, Wu ve arkadaşlarının çalışması resveratrol ve kolşisin kombinasyonunun farelerde lipopolisakkarit (LPS) ile uyarılmış RAW 264.7 makrofajlarını ve asetaminofen (APAP) ile indüklenmiş immün karaciğer hasarını önemli ölçüde azaltabildiğini göstermiştir. Şu anda, resveratrolün JNK yolağına dayalı immün karaciğer hasarı üzerindeki etkisini bildiren ilgili bir literatür bulamadık. Bu nedenle, Wu ve arkadaşlarının ve araştırma grubumuzun resveratrolün D-galaktozamin ve karbon tetraklorür kaynaklı karaciğer hasarı üzerinde koruyucu bir etkiye sahip olduğunu doğrulamasına dayanarak, bu deney resveratrolün JNK yolu aracılığıyla LPS kaynaklı immün karaciğer hasarı fareleri üzerindeki etkisini daha fazla araştırmakta ve etki mekanizmasını araştırmaktadır.

Karaciğer, ALT ve AST en yaygın ikisi olmak üzere çeşitli enzimler açısından zengindir. Genel olarak, karaciğer dokusundaki transaminaz içeriği kandakinden 100 kat daha yüksektir. Karaciğer hücrelerinin 1%'si hasar görürse, serumdaki transaminaz seviyesi iki katına çıkacaktır, bu da karaciğer hasarı geri bildiriminin en erken ve en hassas göstergelerinden biridir. ALP ve TBIL, karaciğer hasarının klinik değerlendirmesi için önemli göstergeler olarak kabul edilir. SOD, vücudun antioksidan sisteminde önemli bir antioksidan enzimdir ve vücuttaki serbest oksijen radikallerini ortadan kaldırmak için oksijen ve hidrojen peroksit üretmek üzere reaksiyona girerek sonraki lipid peroksidasyon reaksiyonlarını engeller. MDA, hücre zarı yapısının bütünlüğünü ciddi şekilde tehdit eden, hücre şişmesine ve nekrozuna neden olan peroksidasyonun son ürünüdür. Dokulardaki MDA içeriği, serbest radikaller tarafından saldırıya uğradığında karaciğerdeki hasarın derecesini dolaylı olarak yansıtabilir. GSH sadece vücuttaki metabolizma için önemli bir madde ve en önemli indirgeyici madde değil, aynı zamanda serbest oksijen radikalleri ve süperoksit anyonları gibi toksik maddeleri ortadan kaldırabilen ve peroksitlerin hücre zarlarını istila etmesini önleyen GSH Px için bir substrattır. Deneysel sonuçlardan, LPS ile immün karaciğer hasarı oluşturulan farelerde serum ALT, AST, ALP, TBIL ve MDA seviyelerinin önemli ölçüde arttığı, SOD ve GSH Px aktivitelerinin ise önemli ölçüde azaldığı görülmektedir ki bu da Chou ve arkadaşlarının raporuyla tutarlıdır. Resveratrol ile tedaviden sonra, farelerin serumundaki karaciğer fonksiyon faktörleri ALT, AST, ALP, TBIL ve oksidatif stres indeksi MDA seviyeleri azalırken, SOD ve GSH Px aktiviteleri önemli ölçüde artmıştır. Yukarıdaki deneysel sonuçlara dayanarak, resveratrol ile immün karaciğer hasarının önlenmesi ve tedavisinin transaminaz yükselmesinin inhibisyonu ve antioksidan etkilerle ilişkili olduğunu düşünüyoruz.

IL-1 β, enflamatuar yanıtta kilit bir hedeftir. Karaciğere doğrudan zarar veremese de, yüksek konsantrasyonlarda IL-1 β, enflamatuar ve bağışıklık hücrelerini bir dizi sitokin üretmeye teşvik ederek enflamatuar reaksiyonlara ve hatalı bağışıklık tepkilerine yol açabilir. TNF - α üretiminin spesifik mekanizması, karaciğer hasarı meydana geldikten sonra hücre zarının geçirgenliğinin artması, Ca2+ akışını teşvik etmesi ve Kupffer hücrelerini aktive ederek büyük miktarda TNF - α salgılanmasına yol açması ve karaciğer hasarının derecesini şiddetlendirmesidir. Aynı zamanda, yerel doku enflamatuar hücre infiltrasyonuna uğrar ve TNF - α IL-6 üretimini indükleyebilir. IL-6, TNF - α'nın ikinci bir aracı olarak hareket edebilir ve karaciğerde geniş hücresel dejenerasyon ve nekroza yol açarak şiddetli hepatitle sonuçlanabilir. Bu çalışmada, LPS modellemesinden sonra, fare karaciğer dokusunda IL-1 β, TNF - α ve IL-6 seviyeleri önemli ölçüde artmıştır. Bu gösterge verilerinin artış eğilimi Dong ve arkadaşları ile tutarlıdır ve normal gruba kıyasla önemli farklılıklar vardır. Resveratrol ile tedavinin, dokulardaki IL-1 β, TNF - α ve IL-6 seviyelerini düşürerek ve enflamatuar reaksiyonları hafifleterek LPS'nin neden olduğu bu değişiklikleri önemli ölçüde tersine çevirebilmesi ilginçtir. Bu sonuçlar, resveratrolün anti-enflamatuar etkiler yoluyla immün karaciğer hasarını da önleyebileceğini ve tedavi edebileceğini göstermektedir.

JNK, sinyal iletimi, enflamatuar yanıt, hücre apoptozu ve diğer süreçlerde yer alan MAPK yolundaki ana üyelerden biridir. Hücrelerin sakin durumunda, JNK esas olarak sitoplazmada bulunur. Yukarı akış sinyal serisi amino asit kalıntısı fosforilasyon modifikasyonunun kademeli reaksiyonu yoluyla aktivasyondan sonra, sitoplazmadaki JNK çekirdeğe göç eder, JNK'yi tamamen aktive eder ve enzimatik aktivite sergileyerek hücresel düzenlemeye katılır. Daha ileri araştırmalar, JNK yolunun aktivasyonunun hücre hasarına yol açtığını ve nihayetinde apoptozu tetiklediğini göstermiştir. JNK inhibisyonundan sonra hücre hasarı ve apoptozun da inhibe edildiğini belirtmek gerekir. ASK1, JNK yolunun yukarısında yer alır ve normal fizyolojik koşullar altında ilgili proteinlerle kompleksler oluşturur. Bununla birlikte, patolojik koşullarda ASK1, MAP2K (MKK4 ve MKK7 gibi) tarafından treonin 183 ve tirozin 185'in çift fosforilasyonu yoluyla aktive edilebilir. ASK1'in aşırı ekspresyonunun hepatosit apoptozunu indükleyebileceğine, ASK1'in susturulmasının ise hücre apoptozunu inhibe edebileceğine dair deneysel kanıtlar halen mevcuttur. C-Jun, JNK sinyal yolunun aşağı akışında yer alır ve aktive edilmiş JNK, c-Jun'u daha fazla fosforile ederek hücresel sinyalizasyon, proliferasyon, apoptoz ve diğer yaşam süreçlerinde önemli bir rol oynayabilir. Ayrıca c-Jun, klinik uygulamada inflamasyon ve kanser gibi çeşitli hastalıklar için bir araştırma hedefi olarak kabul edilmiştir. Bu deneyde, normal grupla karşılaştırıldığında, model gruptaki p-ASK1/ASK1, p-MKK4/MKK4, p-JNK/JNK ve p-c-Jun/c-Jun oranları, JNK yolağının aktivasyonunu gösteren bir artış eğilimi göstermiştir; Resveratrolün her doz grubunun dokularındaki p-ASK1/ASK1, p-MKK4/MKK4, p-JNK/JNK ve p-c-Jun/c-Jun oranlarının model gruba kıyasla değişen derecelerde azalması, resveratrolün JNK aktivasyonunu ve JNK sinyal yolundaki anahtar proteinlerin ekspresyonunu inhibe ettiğini ve böylece karaciğer hücresi apoptoz aktivitesini zayıflattığını göstermektedir.

Özetle, resveratrol yüksek transaminaz seviyelerini, oksidatif stres seviyelerini ve enflamatuar yanıtları inhibe edebilir ve apoptotik aktiviteyi azaltmak için JNK sinyal yolunu düzenleyerek immün karaciğer hasarını önemli ölçüde iyileştirebileceğini gösterir.