Yanıt Yüzey Metodolojisi ile Altın Lotus Çiçeğinin Toplam Fenolik Asit Ekstraksiyon Sürecinin ve Beyazlatma Aktivitesinin Optimizasyonu
Altın Lotus, Ranunculaceae familyasından bir bitki olan Trollius chinensis Bge'nin kurutulmuş çiçeğidir. Altın Ebegümeci, Kurak Alan Lotusu, Altın Erik Otu ve Altın Düğüm olarak da bilinir. Esas olarak Çin'de Shanxi Eyaleti ve Henan Eyaleti'nin kuzey kesimlerinde, Hebei Eyaleti'nin kuzeybatısında, İç Moğolistan Özerk Bölgesi'nin doğu kesiminde ve Liaoning Eyaleti ile Jilin Eyaleti'nin batı kesimlerinde dağılım gösterir. Altın Lotus Çiçeği ilk olarak Compendium of Materia Medica'da kaydedilmiş ve "yumuşak ve acı bir tada, toksisiteye ve soğuk bir yapıya" sahip olduğu belirtilmiştir. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nin 1977 baskısı (Cilt 1) başlangıçta acı ve hafif soğuk bir tada sahip olarak tanımlanan Jinlianhua şifalı bitkisini içeriyordu. Başlıca işlevleri antibakteriyel ve anti-enflamatuar olan bu bitki üst solunum yolu enfeksiyonları, farenjit, bademcik iltihabı, orta kulak iltihabı, akut konjonktivit ve akut lenfanjit için kullanılıyordu. Jinlianhua sadece şifalı bir bitki olarak kullanılmaz, aynı zamanda "Çin Seddi'nin dışındaki Ejderha Kuyusu" olarak da bilinir. Halk kültüründe "iki liang çay içmektense üç çiçek içmek daha iyidir" şeklinde bir deyiş vardır. Demlendikten sonra altın rengi ve ferahlatıcı bir tadı vardır. Uzun süreli tüketimi boğazı temizleyip nemlendirebilir, iç harareti giderebilir ve zihni canlandırabilir. Ev kullanımı için olmazsa olmazdır, misafirler, aile ve arkadaşlar için harika bir hediyedir. Modern farmakolojik araştırmalar Jinlian çiçeğinin antibakteriyel, anti-enflamatuar, antiviral, antioksidan, anti-tümör, ateş düşürücü ve analjezik gibi çeşitli biyolojik aktivitelere sahip olduğunu göstermiştir. Kimyasal bileşenleri esas olarak flavonoidler, fenolik asitler, alkaloidler vb. içerir.

Kapsamlı literatür taraması sonucunda flavonoidlerin lotus çiçeklerinde nispeten bol miktarda bulunduğu tespit edilmiştir. Şu anda Çin'de nilüfer çiçeklerinin etkili bileşenleri üzerine yapılan araştırmalar ağırlıklı olarak flavonoidlere odaklanmakta olup, fenolik asit bileşenleri üzerine nispeten az sayıda rapor bulunmaktadır. Dahası, lotus çiçeklerinden toplam fenolik asitlerin ekstraksiyon süreci üzerine yapılan araştırmalar daha da nadirdir. Bununla birlikte, çalışmalar lotus çiçeklerindeki fenolik asit bileşenlerinin yüksek biyoyararlanıma sahip olduğunu ve vücudun lotus çiçeklerindeki fenolik asit bileşenlerini emiliminin flavonoidlerinkinden önemli ölçüde daha iyi olduğunu bulmuştur. Son yıllarda, geleneksel Çin tıbbında toplam fenolik asitlerin farmakolojik aktivitesi hakkında giderek daha fazla araştırma raporu bulunmaktadır. Geleneksel Çin tıbbındaki toplam fenolik asitlerin antibakteriyel, anti-enflamatuar, antioksidan ve antiviral gibi çeşitli farmakolojik aktivitelere sahip olduğu bulunmuştur. Bazı çalışmalar, doğal antioksidanlar olarak, geleneksel Çin tıbbındaki fenolik asit bileşiklerinin sıradan diyet bitkilerinden daha güçlü antioksidan aktiviteye sahip olduğunu göstermiştir ve ayrıca bazı bitkilerdeki toplam fenolik asitlerin tirozinaz inhibitör etkilere sahip olduğu bulunmuştur. Buna ek olarak, bitki polifenolleri yaşlanma karşıtı ve nemlendirici etkileri nedeniyle kozmetikte yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, lotus çiçeklerindeki toplam fenolik asitlerin beyazlatma aktivitesi hakkında çok az rapor bulunmaktadır.

Bu nedenle, ilk kez bu deneyde lotus çiçeklerinden toplam fenolik asitlerin ekstraksiyon sürecini optimize etmek için yanıt yüzey analizinde Kutu Behnken Tasarımı (BBD) deneyi kullanılmış ve bunların in vitro antioksidan ve tirozinaz inhibitör etkileri incelenerek lotus çiçeklerinde beyazlatıcı aktif maddelerin gelecekte araştırılması ve daha fazla bilimsel ve rasyonel gelişim ve kullanım için temel atılmıştır.

Lotus çiçeklerinden toplam fenolik asitlerin etanol geri akış yöntemi kullanılarak ekstraksiyonunu araştırmak için tek faktörlü deneyler yapılmış ve optimum ekstraksiyon işlemi koşulları yanıt yüzey metodolojisinde BBD deneyi ile optimize edilmiştir. Optimum ekstraksiyon koşulları şu şekilde elde edilmiştir: 1:40 katı-sıvı oranı, 60% etanol konsantrasyonu, 90 dakika reflü süresi ve 60 ℃ reflü sıcaklığı. Bu koşullar altında lotus çiçeklerinden elde edilen toplam fenolik asit verimi 92.245mg/g'a ulaşabilmiştir. Bu yöntem kararlı, uygulanabilir ve iyi bir tekrarlanabilirliğe sahip olup lotus çiçeklerinde toplam fenolik asitlerin daha fazla araştırılması ve geliştirilmesi için temel oluşturmaktadır. İn vitro antioksidan aktivite çalışmasının sonuçları, 0.01~0.05mg/mL konsantrasyon aralığında, Jinlian çiçeğinin toplam fenolik asidinin DPPH serbest radikallerini ve hidroksil serbest radikallerini temizleme yeteneğinin yanı sıra iyi in vitro antioksidan aktivite ile indirgeme yeteneğini kademeli olarak artırdığını göstermiştir. Hücre deneylerinin sonuçları, lotus çiçeklerindeki toplam fenolik asitlerin 62.5 ila 500 μg/mL arasında değişen konsantrasyonlardaki deney gruplarının tirozinaz aktivitesini önemli ölçüde inhibe edebildiğini ve belirli beyazlatma potansiyeline sahip olduğunu göstermiştir. Yukarıdaki araştırma, Jinlianhua tıbbi malzemelerinin kapsamlı gelişimi ve kullanımı için teorik bir temel sağlamaktadır.

Gelecekte, Jinlian çiçeğinin toplam fenolik asitleri ayrıştırılıp saflaştırılabilir ve beyazlatma mekanizması daha fazla incelenerek Jinlian çiçeğiyle ilgili beyazlatma ürünlerinin geliştirilmesi ve kullanılması için bilimsel bir teorik temel sağlanabilir.