Köpek karaciğeri sebzelerinden elde edilen polisakkaritlerin LIN28A/NF - κ B sinyal yolağına dayalı olarak karaciğer fibrozunu hafifletmedeki etki mekanizması üzerine çalışma
Hepatik fibrozis (KY), viral enfeksiyonlar, ilaç toksisitesi, alkol ve otoimmün karaciğer hastalığına verilen sürekli yara iyileşme yanıtları dahil olmak üzere çeşitli zararlı uyaranlardan kaynaklanır ve karaciğer hasarına yol açar. Kronik karaciğer hastalığının önemli bir patolojik belirteci, siroz oluşumunda önemli bir olay ve son evre hepatoselüler karsinom ve ileri sirozun önemli bir nedenidir. Karaciğer fibrozu ve sirozu için klinik bir ilaç olarak kolşisin, esas olarak hepatik stellat hücrelerin erken aktivasyonunu ve proliferasyonunu inhibe eder, hepatik stellat hücre apoptozunu teşvik eder, kollajen metabolizmasına müdahale eder ve farklı etiyolojilerin neden olduğu KY üzerinde değişen terapötik etkilere sahiptir. Kolşisin ayrıca karın ağrısı, bulantı, iştah kaybı gibi birçok yan etkiye neden olabilir. Yüksek dozda kolşisin karaciğer ve böbrek yetmezliğine de yol açabilir. Bu nedenle, yeni güvenli ve etkili terapötik ilaçların araştırılması ve geliştirilmesi gerekmektedir. Geleneksel bir Çin şifalı bitkisi olan Dicliptera cinensis (L.) Juss, tatlı bir tada ve serin bir yapıya sahiptir. Isıyı temizleme, kanı soğutma, diürez, detoksifikasyon ve karaciğeri sakinleştirme etkilerine sahiptir. CCl4, D-galaktozamin hidroklorür ve lipopolisakkarit gibi çeşitli karaciğer hasarı modelleri üzerinde rahatlatıcı bir etkiye sahiptir. Önceki çalışmalarda, köpek karaciğeri bitkisel polisakkaritlerinin (DCP), esas olarak enflamatuar reaksiyonların hafifletilmesi ve oksidatif stresin önlenmesi ile ilgili karaciğer lipit metabolizması bozuklukları üzerinde iyi bir inhibitör etkiye sahip olduğu bulunmuştur. LIN28A, pluripotent kök hücrelerin indüklenmesinde, gelişimin, hücre büyümesinin ve metabolizmanın düzenlenmesinde önemli bir rol oynayan, yüksek oranda korunmuş bir RNA bağlayıcı proteindir. LIN28A'nın aşırı ekspresyonu özofagus kanseri ve yumurtalık kanseri gibi çeşitli kanser hücrelerinde bulunmuştur. Çalışmalar, LIN28A'nın karaciğere özgü silinmesinin fare hepatoselüler karsinomunu hafifletebileceğini ve kanserden etkilenen farelerin ömrünü etkili bir şekilde uzatabileceğini göstermiştir, bu da LIN28A'nın hepatoselüler karsinom veya karaciğer hastalıklarının tedavisi için potansiyel bir hedef olabileceğini düşündürmektedir. Bununla birlikte, şu anda KY ile ilişkisini bildiren bir literatür bulunmamaktadır. Bu çalışma, LIN28A ve KY arasındaki ilişkiyi araştırmayı ve DCP'nin LIN28A'yı inhibe ederek karaciğeri koruyup koruyamayacağını araştırmayı amaçlamaktadır.

Karaciğer fibrozu, perihepatik alanda hücre dışı matrisin (ECM) ilerleyici birikimi ile karakterize patolojik bir lezyondur ve kronik karaciğer hastalığının ana sorunudur. Nihai nedeni olan siroz nedeniyle, dünya çapında morbidite ve mortalitenin önde gelen nedeni haline gelmiştir ve küresel nüfusun tahmini 2%'si sirozdan etkilenmektedir. Bu nedenle, DCP'nin karaciğer üzerindeki koruyucu etkisinin incelenmesi büyük önem taşımaktadır.
Deneyde karaciğer fibrozunu indüklemek için CCl4 kullanılmış ve bu da insan klinik KY'sine çok benzer patolojik değişikliklere neden olmuştur. HA, LN, PCIII ve IV-C karaciğer hücrelerindeki hücre dışı matrisin ana bileşenleridir. Karaciğer fibrozunda, hücre dışı matrisin artan sentezi ve yetersiz bozunması nedeniyle, gösterge seviyelerindeki yükselme derecesi karaciğer fibrozunun derecesi ile pozitif korelasyon gösterir. Çalışmada, model grup sıçanlarda HA, LN, PC Ⅲ ve Ⅳ - C seviyeleri önemli ölçüde artmıştır. H&E boyama ve Masson boyama sonuçları, model grup sıçanların karaciğer dokusunun önemli ölçüde lipid dejenerasyonu ve kolajen birikimi sergilediğini ve başarılı modellemeye işaret ettiğini göstermiştir. DCP uygulamasından sonra, sıçan serumundaki HA, LN, PC Ⅲ ve Ⅳ seviyeleri önemli ölçüde azalmış ve H&E boyamasındaki patolojik değişiklikler hafiflemiştir, bu da DCP'nin karaciğer ve karaciğer hücreleri üzerinde koruyucu bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir.
NF kB, hücre apoptozu ve inflamasyonun düzenlenmesinde önemli rol oynayan çok sayıda geni düzenleyen bir nükleer transkripsiyon faktörüdür. Karaciğer enflamatuar bir tepkiye maruz kaldığında, NF kB aktive olur ve TNF - α, IL-6 ve IL-1 β gibi enflamatuar faktörleri serbest bırakarak karaciğer dokusu enflamasyonunun şiddetlenmesine yol açar. İnflamasyon bölgesinde COX-2 ve iNOS enzimlerinin ekspresyonunun indüklenmesi de artacaktır. Aşırı inflamatuar yanıt aynı zamanda bir inflamasyon belirteci olarak da işlev görür. Deneysel sonuçlar, model grup sıçanların karaciğer dokusunda NF-kBp65/\ COX-2 ve iN-OS'un mRNA bağıl içeriği ve protein ekspresyon seviyelerinin önemli ölçüde arttığını ve TNF - α, IL-6 ve IL-1 β'nın mRNA bağıl içeriğinin de önemli ölçüde arttığını göstermiştir; Model grupla karşılaştırıldığında, DCP'nin düşük, orta ve yüksek doz gruplarındaki sıçanların karaciğer dokusunda NF-2kBp65, COX-2 ve iNOS'un mRNA bağıl içeriği ve protein ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde azalmıştır. Enflamatuar faktörler TNF - α, IL-6 ve IL-1 β'nın mRNA bağıl içeriği de değişen derecelerde azalmıştır. Bu sonuç, DCP'nin NF-kBp65 proteininin ekspresyonunu inhibe ederek ve aşağı yönlü enflamatuar faktörlerin salınımını azaltarak anti-enflamatuar etkiler gösterebileceğini göstermektedir.
TGF - β 1, immün yanıt ve karaciğer fibrozunun gelişiminde rol oynayan çok işlevli bir sitokindir (pro fibrotik ve inflamatuar faktör). TGF - β 1 hepatik stellat hücrelerin (HSC'ler) aktivasyonuna, proliferasyonuna ve fibrozisine yol açabilir. Alfa SMA, HSC'nin aktivasyon durumunu yansıtabilir ve HSC aktivasyonu için bir marker protein olarak hizmet edebilir. Karaciğer fibrozunun derecesini değerlendirmek için de kullanılabilir. Matriks metalloproteinazlar (MMP'ler) hücre dışı matriksin bozulması ve yeniden şekillenmesinde kilit faktörlerdir. MMP9, karaciğer fibrozunun gelişimini teşvik edebilen normal karaciğer matrisini bozmak için en uygun MMP'lerden biridir. Western blot analizi, model grup sıçanların karaciğer dokusunda TGF - β 1, α - SMA ve MMP9'un protein ekspresyon seviyelerinin önemli ölçüde arttığını göstermiştir; Model grupla karşılaştırıldığında, DCP'nin düşük, orta ve yüksek doz gruplarındaki sıçanların karaciğer dokularındaki TGF-21, a-SMA ve MMP9'un protein ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde azalmıştır. Bu sonuç, DCP'nin CCl4 ile indüklenen karaciğer dokusunda TGF - β 1 ve MMP9 proteinlerinin ekspresyonunu azaltarak KY'yi hafifletebileceğini ve karaciğerdeki kolajen birikim oranını yavaşlatabileceğini göstermektedir.
LIN28A geni, benzersiz soğuk şok alanı (CSD) ve sistein sistein histidin sistein çinko parmak alanı eşleşmesi yoluyla tanınabilir ve diziye özgü mRNA bağlanması, miNNA bağlanması, miNNA ön işleme ve miNNA tarafından düzenlenen gen susturmada önemli bir rol oynar. Önceki çalışmalar, LIN28A'nın NF-kBp65 sinyal yolu aracılığıyla enflamatuar tepkilere katıldığını ve NF-kBp65 ekspresyonunu azaltmanın KY'yi hafifletmeye yardımcı olduğunu göstermiştir. Deneyde, normal grupla karşılaştırıldığında, model grup sıçanların karaciğerindeki LIN28A ve NF-kBp65'in protein ekspresyon seviyeleri ve mRNA bağıl içerikleri önemli ölçüde artmış ve düşük, orta ve yüksek doz DCP gruplarındaki sıçanların karaciğer dokularındaki LIN28A ve NF-kBp65'in protein ekspresyon seviyeleri ve mRNA bağıl içerikleri önemli ölçüde azalmış ve konsantrasyon bağımlılığı göstermiştir. Yukarıdaki sonuçlar KY inflamasyon sürecinin LIN28A'nın aktivasyonu ile ilişkili olabileceğini göstermektedir. DCP ile kombinasyon LIN28A ve NF-kBp65 ekspresyonunun yanı sıra NF-kBp65'te COX-2, iNOS, TNF - α, IL-6 ve IL-1 β gibi aşağı akış enflamatuar faktörlerin ekspresyonunu inhibe edebilir. DCP'nin KY için anti-enflamatuar ve terapötik mekanizmalarının LIN28A/NF kB sinyal yolunun inhibisyonu ile ilişkili olabileceği tahmin edilmektedir.
Özetle, DCP sıçan KY'si üzerinde önemli bir iyileştirme etkisine sahiptir ve farmakolojik mekanizması, enflamatuar yanıtı önlemek için LIN28A/NF kB sinyal yolağını düzenleyerek sağlanabilir.