UHPLC-Q-Orbitrap HRMS'ye dayalı yaşlı mandalina kabuğunun kan bileşenlerinin analizi
Chenpi, Rutaceae familyasından Citrus reticulata Blanco ve kültür çeşitlerinin kurutulmuş ve olgunlaşmış kabuğudur. Eski zamanlardan beri Xinhui, Guangdong'da üretilen Chenpi'nin daha kaliteli olduğuna inanılmaktadır. Geleneksel olarak, qi'yi düzenleme ve dalağı güçlendirme, nemi kurutma ve balgamı çözme işlevlerine sahip olduğuna inanılır ve karın şişkinliği, aşırı yeme, kusma ve ishal, öksürük ve balgam gibi semptomları tedavi etmek için kullanılır. Chenpi esas olarak flavonoidler, uçucu yağlar, alkaloidler, limonoid ve diğer kimyasal bileşenleri içerir. Modern farmakoloji, lipit düşürücü ve antioksidan etkilere sahip olduğunu ve klinik uygulamada yaygın olarak kullanıldığını göstermiştir.
Geleneksel Çin tıbbı teorisi, kurutulmuş mandalina kabuğunun kullanılmadan önce yıllandırılması gerektiğini öne sürer. Bununla birlikte, mandalina kabuğunun belirli yaşlandırma süresine ilişkin olarak, tarih boyunca çeşitli bitki kitaplarında farklı görüşler yer almıştır. "Tıbbi Ayna", "mandalina kabuğu iki yılda bir yaşlandırılmalıdır", "mandalina kabuğu güzel olmak için uzun süre yaşlandırılmalıdır" olarak da bilinir; The Compendium of Materia Medica, "mandalina kabuğu sadece bir sonraki yıl kullanılabilir"; "Daily Materia Medica", "yaşlandırılmış mandalina kabuğu daha da iyidir" diye kaydeder. Aynı eski kitap için bile, mandalina kabuğunun yaşlanma süresi henüz net değildir. Yaşlandırılmış mandalina kabuğunun yaşlanma süresi üzerine yapılan modern araştırmalar, esas olarak kimyasal bileşimini ve farmakolojik etkilerini karşılaştırmaya odaklanmakta ve genellikle in vitro olarak farklı yaşlandırma sürelerine sahip yaşlandırılmış mandalina kabuğunun kimyasal bileşimini incelemektedir. Araştırma ekibi daha önce UHPLC-Q-Orbitrap HRMS teknolojisini kullanarak farklı zamanlarda yaşlandırılmış mandalina kabuğundaki flavonoid bileşenleri analiz etmiştir. Geleneksel Çin ilaçlarının çoğu hala ağızdan uygulanmaktadır ve geleneksel Çin tıbbının doğrudan etkili maddelerini in vivo olarak belirlemek için oral uygulamadan sonra serumun kimyasal bileşimini analiz etmek, geleneksel Çin tıbbının farmakolojik madde temelini hızlı ve doğru bir şekilde incelemek ve belirlemek için etkili bir yol haline gelmiştir. Şu anda, kurutulmuş mandalina kabuğunun iç bileşenleri hakkında çok az rapor bulunmaktadır.
Bu çalışma, farklı yıllarda kurutulmuş mandalina kabuğunun kan bileşenlerini karşılaştırmak için yüksek ayırma, yüksek çözünürlük ve yüksek hassasiyete sahip ultra yüksek performanslı sıvı kromatografi kuadrupol elektrostatik alan orbital tuzağı yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS) teknolojisini kullanan ilk çalışmadır ve kurutulmuş mandalina kabuğunun farmakolojik madde temeli ve farmakolojik araştırması için bir referans sağlamaktadır.

Geleneksel Çin tıbbı yaşlanma konusunda uzun bir geçmişe sahiptir ve mandalina kabuğu "Altı Çen "in ilkidir. Bitkisel ilaçlarla ilgili tarihi çalışmalar ve modern araştırmalar bir araya getirildiğinde, mandalina kabuğunun spesifik yaşlanma süresi henüz çözülememiştir. Araştırma ekibi, erken evrede farklı zamanlarda yaşlandırılmış mandalina kabuğundaki flavonoid bileşenleri analiz etmek için UHPLC-Q-Orbitrap HRMS teknolojisini kullandı. In vitro bir bakış açısıyla, "mandalina kabuğunun iki yılda bir yaşlandırılması gerekir" ifadesinin belirli bir mantığı olduğu kanıtlanmıştır.

Bu deney, UHPLC-Q-Orbitrap HRMS'nin hızlı ve doğru özelliklerine, sabit hasat zamanına, örnekleme konumuna, depolama ortamına ve diğer koşullara dayanmaktadır. İlk kez, yaşlandırılmış mandalina kabuğunun kan bileşenlerinin karşılaştırmalı bir analizi yapılmış ve 2, 4 ve 8 yıllık yaşlandırılmış mandalina kabuğu için sırasıyla 34, 24 ve 15 bileşen tanımlanmıştır. Deney, yaşlandırılmış mandalina kabuğundaki kan bileşenlerinin türlerinin üç yılda da aşağı yukarı aynı olduğunu ortaya koymuştur. Pik alanı ve bağıl içeriğin karşılaştırılmasına dayanarak, yaşlandırılmış mandalina kabuğu iki yılda diğer iki yıla göre daha yüksekti ve bu da önceki in vitro deneylerin sonuçlarıyla tutarlıydı. Bu durum, yaşlandırılmış mandalina kabuğundaki kimyasal bileşen içeriğindeki farklılıkların kan bileşeni içeriğinde de farklılıklara yol açabileceğini kanıtlamakta ve yaşlandırılmış mandalina kabuğunun iki yılda bir yaşlandırılması gerektiği yönündeki açıklama için daha fazla kanıt sağlamaktadır.

Mandalina kabuğunun ana bileşenleri, karaciğer hasarına karşı koruyucu etkileri olan ve kan lipitlerini düşüren flavonoidlerdir. Chuanchenpi ekstresi, pAkt, p-CREB, BDNF ve Bcl-2 yolaklarını aktive ederek ve sıçanlarda BBB geçirgenliğini artırarak serebral iskemiye karşı koruyabilen nöroproteksiyonun temsili bir bileşenidir. Portakal kabuğu ekstresi, mitokondriyal JNK/Baxpathway yoluyla kardiyomiyositler üzerinde anti apoptotik etkiler gösterebilir. İzoportakal flavonoidleri, HL-60, A549, HO8910 ve MCF-7 olmak üzere dört tip kanser hücresi üzerinde önemli anti proliferatif etkiler göstermiştir. Emodin antioksidan, anti-enflamatuar ve antiviral etkilere sahiptir. Kurutulmuş mandalina kabuğunun geleneksel etkinliğine ve modern farmakolojik araştırmalarına dayanarak, naringin ve mandalina kabuğu ekstresi dahil olmak üzere yedi flavonoidin kurutulmuş mandalina kabuğunun potansiyel farmakolojik madde temeli olabileceği sonucuna varılmıştır. Bununla birlikte, biyolojik aktivite testi ve farmakolojik değerlendirme daha sonraki aşamada hala gereklidir ve geleneksel Çin tıbbı klinik etkinliği ile ilgili aktiviteleri ifade edebilen bileşenlerin farmakolojik madde temeli olarak taranması gerekir. Bu deney, kurutulmuş mandalina kabuğunun farmakolojik madde temelini incelemek için yeni ve etkili bir yöntem sağlar. Daha sonraki aşamada, farklı yaşlardaki kurutulmuş mandalina kabuğunun kan bileşenleri üzerinde karşılaştırmalı çalışmalar yapılabilir ve "yaşlı mandalina kabuğu iyidir" ifadesinin bilimsel çağrışımı farmakolojik etkileriyle birlikte açıklanabilir.

Bazı izomerler için Compound Discoverer 3.0 yazılımı, yapısal çıkarım için fragman bilgilerinden yalnızca ana iyon hakkında belirli bilgileri çıkarabilir ve izomerler arasında ayrım yapamaz. Bu izomerlerin yapısını tanımlamak için nükleer manyetik rezonans teknolojisini birleştirmek gerekir.