Dijincao özütü miR-106-5p/TLR4 sinyal yolağı aracılığıyla alkolik olmayan yağlı karaciğer hastalığını iyileştirir
Non alkolik steatohepatit (NASH), hepatik lipid metabolizması bozuklukları, endoplazmik retikulum stresi (ER), mitokondriyal disfonksiyon ve fibrozisin aracılık ettiği inflamasyon ile karakterize, alkolik olmayan yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD) gelişiminde patolojik bir değişikliktir. Klinik lezyonların gelişiminde anahtar bir bağlantı olarak kabul edilir ve siroz ve karaciğer kanseri gelişimi ile yakından ilişkilidir. NASH progresyonunda bağırsak karaciğer ekseninin düzensizliği, enflamatuar yanıtlara aracılık etmede önemli bir rol oynamaktadır. Bağırsak bariyerinin hasar görmesi, metabolik endotoksinlerin "bağırsak karaciğer ekseni" yoluyla karaciğere taşınmasına neden olarak karaciğer iltihabına yol açar. Bunlar arasında miRNA, karaciğer enflamasyonunun oluşmasında ve gelişmesinde önemli bir düzenleyici rol oynar. Kodlamayan mikroRNA'lar (miRNA'lar) protein kodlamayan, ancak hedef gen mRNA'sının 3'UTR'sini hedefleyerek gen ifadesini engelleyebilen bir nükleotid dizileri sınıfıdır. MiRNA'lar neredeyse tüm fizyolojik ve patolojik süreçlerde yer almaktadır. miRNA'lar, gebe hipertansif farelerin karaciğerinde oksidatif stres hasarına ve inflamatuar infiltrasyona aracılık eden miR-106 düşük ekspresyonu gibi inflamasyonla ilgili genleri hedefleyerek MAPK sinyal yolunu aktive edebilir. Lusiferaz raportör gen analizi ile miR-106a'nın Th17 transkripsiyon faktörü Ror ve aktive T hücre (Nfat) nükleer faktör 5'in hedef özgüllüğünü düzenlediği bulunmuştur. Bu sonuçlar, miR-106'nın düşük ekspresyonunun ilgili enflamatuar faktörlerin ekspresyonuna aracılık edebileceğini ve enflamatuar yanıtlar oluşturabileceğini göstermektedir.
Euphorbia humifusa Willd. Euphorbiaceae familyasından ve Euphorbiaceae cinsinden bir bitkidir. Genellikle bakteriyel dizanteri, gastroenterit, hemoptizi, rektal kanama ve diğer hastalıkların tedavisinde kullanılır. Modern farmakoloji, Dijincao'nun anti-enflamatuar, antioksidan, lipid düşürücü, hipoglisemik ve bakteriyostatik etkileri olan polifenoller, flavonoidler, alkaloidler ve triterpenoidler gibi çeşitli aktif bileşenler içerdiğini göstermiştir. Bu nedenle, bu deneyde, NASH fare modeli (HFD+DSS) oluşturmak için hayvan düzeyinde dekstran sülfat sodyum (DSS) beslemesi ile birlikte kısa süreli yüksek yağlı diyet (HFD) kullanılmıştır. DSS, farelerde bağırsak bariyerine zarar verebilen ve genellikle kolit oluşturmak için kullanılan bir tür hayvan modelidir. Bu modele dayanarak, Dijincao özütünün NASH'a müdahalesi ve olası mekanizmaları incelenerek NASH'ın önlenmesi ve tedavisi için yeni fikirler sağlanmıştır.

 

Yüksek yağlı diyetle indüklenen NAFLD hayvan modeli yaygın olarak kullanılmaktadır, ancak basit diyet indüksiyonunun belirgin karaciğer iltihabı fenotipini göstermesi birkaç ay sürmektedir ve daha uzun modelleme süresinin ilaç taraması için birçok sınırlayıcı faktörü vardır. Yüksek yağlı diyete dekstran sülfat sodyum (DSS) eklenmesi, yüksek yağlı diyetle indüklenen NASH fare modelinde bağırsak iltihabını şiddetlendirebilir. Kwon ve arkadaşları, DSS ile tedavi edilen farelerin bağırsak bariyeri işleviyle ilgili proteinlerin ekspresyonunda azalma ve plazma LPS seviyelerinde artış sergilediğini, bunun da DSS'nin neden olduğu bağırsak bariyeri işlev bozukluğunu gösterdiğini bulmuştur. Aynı zamanda, bu fareler NASH oluşumunu ve gelişimini teşvik eden karaciğer yağ birikimi ve enflamatuar fenotip de sergilemiştir. Araştırma grubunun ön deneyleri, farelerin HFD ve DSS ile beslenmesinin, kısa sürede alkolsüz steatohepatite dönüşebilen yüksek yağlı diyetin neden olduğu lipid birikimini ve bağırsak bariyeri hasarını indükleyebileceğini de ortaya koymuştur. Özetle, bu yöntem kısa bir süre içinde ilaç taraması ve mekanizma araştırması için uygun bir in vivo NASH modeli oluşturabilir.
Akut akciğer hasarı (ALI) fare modelinde, LPS tarafından uyarılan makrofajların akciğer dokusunda miR-106a ekspresyonunun önemli ölçüde azaldığına dair araştırma raporları vardır. MiR-106a, TLR4 ekspresyonunu hedefleyerek NF - κ B aktivasyonunu ve aşağı akış enflamatuar faktörlerin üretimini inhibe edebilir. Yüksek glukoz (25mmol/L), insan umbilikal ven endotel hücrelerinde (HUVEC'ler) HMGB1 ekspresyonunda bir artışa ve miR-106 ekspresyonunda bir azalmaya neden olarak HUVEC apoptozuna ve enflamatuar faktörlerin ekspresyonuna aracılık edebilir. Özetle, bu veriler toplu olarak azalmış miR-106 ifadesinin inflamatuar yanıt sinyal yolunu aktive edebileceğini göstermektedir. Araştırma sonuçlarımız ayrıca NASH fare modelinde miR-106a ekspresyonunun düşük ve TLR4 ekspresyonunun karaciğer dokusunda yüksek olduğunu ve böylece NASH oluşumuna ve gelişimine aracılık ettiğini göstermektedir. Dijincao ekstresi uygulandıktan sonra ALT ve TG seviyeleri düşmüş; karaciğer dokusunda TNF - α'nın mRNA seviyesi azalmış ve patolojik hasarın derecesi azalmıştır. Aynı zamanda model grubun karaciğer dokusunda miR-106-5p ekspresyonunun düşük olduğu, miR-106-5p hedefli TLR4 ekspresyonunun ise yukarı regüle olduğu tespit edilmiştir. Ardından, TLR4 sinyal yolağının aşağı akışındaki TNF - α, IL-1 β ve IL-6'nın karaciğer dokusunda önemli ölçüde arttığı gözlenmiştir. İlaç müdahalesi miR-106-5p ifadesinde artışa yol açabilir ve TLR4 sinyal yolunu inhibe edebilir.
Özetle, Dijincao ekstresi, yüksek yağlı ve glukan sodyum sülfat diyetlerinin neden olduğu alkolik olmayan yağlı karaciğer hastalığını iyileştirebilir. Alkolik olmayan yağlı karaciğer hastalığını iyileştirmedeki etki mekanizması, hedeflenen TLR4 sinyal yolunun aracılık ettiği enflamatuar yanıtı inhibe etmek için miR-106-5p ekspresyonunu düzenleyerek olabilir, böylece enflamatuar karaciğer hasarını iyileştirir ve NASH terapötik ilaçlarının geliştirilmesi için deneysel kanıt sağlar.